造血干细胞的竞争性分化在照后白细胞减少中的作用

LACA小鼠经5 Gyγ线全身照射后l～4天腹腔注射经分离,洗涤和浓集的红细胞(供血鼠预先照射8.5Gyγ线)。其血红蛋白含量上升到正常对照的140.4%。照后20天骨髓CFU-E含量比照射对照组低4倍。虽然其红系造血受到明显抑制,但其骨髓CFU-S,CFU-GM及外周血粒细胞数分别比照射对照组高28、80.3和97.6‰。结果表明,小鼠受照后,存在造血干细胞的竞争性分化,向红系统分化占优势。多血通过反馈机制改变了干细胞的分化方向,使之多向粒系统分化.从而增加了外周血粒细胞数置。本文报告的结果表明照后造血干细胞的竞争性分化及向红系分化占优势是外周血白细胞数量减少的原因之一。     

小鼠长期分次照射后的造血恢复

长期的辐射作用可引起造血CFU减少,其程度取决于累积剂量的大小。因受照动物的造血是靠CFU或其后代来维持的,所以弄清这些细胞成份恢复的特点是很重要的。本文是研究小鼠每天受分次照射后,骨髓中CFU恢复的动力学,同时将受照小鼠骨髓CFU和其后代以及外周血细胞成份的恢复进行比较。方法:BALB/C系雄性小鼠8～10周龄。γ线每天照射50伦,直到总剂量250、1000及2000伦。照后不同时间内源法测定骨髓中的CFU量,同时计数骨髓有核细胞总数,分析骨髓象,测定外周血有形成份的含量。大剂量照射的两个组用~3H-TdR“自杀”试验测定在有丝分裂周期中的CFU百分数。结果:照射总剂量250、1000及2000伦,小鼠股骨骨髓中CFU数急剧减少,分别相当于对照组值的     

“523”药物对受照小鼠造血系统的影响

“５２３”是我所研究的抗放新药，不仅能提高受照小鼠的活存率，对其造血作用也有明显影响。我们研究了“５２３”药物对受８Ｇｙ照射小鼠外周血白细胞的作用，及对内、外源性脾结节和骨髓粒系祖细胞的作用。并对骨髓有核细胞周期作了进一步的研究。结果表明，照前应用“５２３”可使外周血白细胞明显升高，骨髓和髓外造血指标也明显增加．使正常小鼠骨髓有核细胞由Ｇ＿０／Ｇ＿１期向Ｓ期转化，从而使Ｓ期的细胞比例明显增加．提示“５２３”对受照小鼠外周血白细胞的作用可能是其作用于骨髓，使骨髓造血细胞增加所引起，而对骨髓的保护作用则是作用于骨髓有核细胞，使骨髓有核细胞处于Ｓ期的比例增加有关。     

RSPCM对受不同剂量照射小鼠的疗效观察

目的：观察造血生长因子对受照射小鼠的防治作用。方法用ＲＳＰ－ＣＭ和ＬＰ３－ＣＭ来源的集落刺激因子治疗受不同剂量＾６０Ｃｏγ射经照射的ＩＣＲ小鼠。通过观察３０ｄ存活率、死亡动物平均存活天数、保护系数及部分动物外周血白细胞计数、骨髓有核细胞计数和粒单系祖细胞集落培养,研究ＧＭ－ＣＳＦ对受照射小鼠重建造血的疗效及量效、时效关系。结果ＲＳＰ－ＣＭ能显著提高７．５Ｇｙ照射小鼠的存活率,而ＬＰ３－ＣＭ效果不显     

外照射慢性放射病诊断依据

本文总结42例外照射慢性放射病, 在分析病例的基础上, 对外照射慢性放射病的诊断依据进行了讨沦。临床症状以无力型神经衰弱综合征为主.客观检查显示以造血系统损伤为主，外周血白细胞数减少可有血红蛋白和/或血小板减少及骨髓相应的改变，并伴有机休多系统功能改变为特征的全身性疾病，本文对其临床症状、生育异常、脏器功能检查、淋巴细胞染色体畸变，淋巴细胞微核、血液系统等改变结合受照剂量对诊断的意义作了简要讨论。     

间充质干细胞治疗急性骨髓型放射病的实验研究

目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)在治疗急性骨髓型放射病中的作用,并对其机理做初步的探索。方法BALBc雌性小鼠分成MSCs组和照射对照组,MSCs组经5.5Gy60Coγ射线照射,2h内尾静脉输注C57BL6雄性小鼠的MSCs,照射对照组照射后不作处理。观察各组外周血象变化、骨髓细胞凋亡、细胞增殖周期、骨髓病理变化、骨髓造血粒系祖细胞集落(CFUGM)以及基质细胞集落(CFU-F)计数。结果与对照组相比,MSCs组的三系血细胞下降慢,最低值抬高,并且造血恢复更迅速,尤其白细胞、血小板变化更明显。骨髓细胞凋亡率和P53蛋白表达量少于对照组。照后2d,MSCs组G0G1期比值较对照组明显下降(P<0.01),G2M期比值及S期计数较对照组显著升高(P<0.01)。照后4dMSCs组胸骨骨髓增生活跃,对照组增生减低,照后20dMS-Cs组新生造血灶多于对照。CFU-GM、CFUF计数在照后初期、极期、恢复期均高于对照。结论MSCs对急性放射病治疗有良好的治疗作用,其机制可能与MSCs减少细胞凋亡、改善造血微环境、促进干细胞增殖分化有关。     

红景天苷对急性辐射损伤小鼠骨髓脂肪细胞生成的影响

目的：探讨红景天苷抑制辐射诱导小鼠骨髓脂肪化、促进辐射后造血恢复的情况,并研究其可能的机制。方法：取6~7周龄健康BALB/c小鼠按随机数字表法分为健康对照组、单纯照射组、药物干预组,每组各20只。辐射对照组和实验组均给予6.0 Gy ⁶⁰Co γ射线辐射处理,实验组于辐射后12 h腹腔注射红景天苷（30 mg·kg^-1·d^-1）至照后8 d,辐射对照组腹腔注射等体积生理盐水。辐射后14 d观察小鼠的一般情况、体重变化、外周血象,并取股骨制作骨髓切片观察骨髓病理改变,测定脂肪细胞面积,分离骨髓单个核细胞后提取总RNA,荧光定量PCR（q-PCR）检测PPAR-γ和FABP4 mRNA的相对表达量。结果：单纯照射组小鼠在照射后均出现外周血白细胞降低、血小板减低,骨髓脂肪细胞过度增生,骨髓有核细胞减少等骨髓造血抑制改变。与单纯照射组小鼠比较,红景天苷能改善照射后小鼠一般情况,并通过抑制PPAR-γ、FABP4的表达（t=8.64、13.19,P<0.05）,抑制骨髓脂肪细胞的过度增生,减少脂肪空泡面积（t=13.31,P<0.05）;照后7 d,药物干预组小鼠外周血白细胞计数高于单纯照射组（t=5.80,P<0.05）;照后14 d,药物干预组小鼠外周血白细胞计数较单纯照射组及照后7 d药物干预组小鼠外周血白细胞计数均有增高（t=13.78、7.54,P<0.05）,同时血红蛋白较单纯照射组高（t=14.66,P<0.05）。结论：红景天苷能抑制急性辐射损伤小鼠骨髓脂肪细胞生成,调节骨髓微环境,从而促进辐射损伤后小鼠造血恢复。     

细胞因子联合对4.5Gyγ射线照射比格犬造血损伤的治疗作用

目的 观察细胞因子组合对4.5 Gy γ射线照射比格犬造血系统损伤的治疗效果,为极重度骨髓型急性放射病的临床救治提供实验依据。方法 16只比格犬均给予4.5 Gy ⁶⁰Co γ射线全身照射,随机分为照射对照、综合对症和细胞因子3组。细胞因子组动物在综合对症支持治疗的基础上应用rhG-CSF、rhIL-11和rhIL-2联合治疗。2 d检测1次外周血象,分别于照射前4 d,照射后1和45 d收集骨髓和外周血进行造血细胞集落培养,制备胸骨病理切片观察组织形态学改变。结果 照射后各组动物外周血各类细胞数急剧下降,细胞因子联合治疗可提高白细胞最低值(1.04×10⁹/L,而照射对照组和综合对症组分别为0.28×10⁹/L和0.68×10⁹/L),缩短血小板减少持续时间(细胞因子组24 d,综合对症组33 d),使红细胞维持在正常值范围;照射后1 d骨髓及外周血中造血干细胞集落形成率明显下降,照射后45 d 2个治疗组造血干细胞集落数均恢复为照射前水平;照射对照组动物骨髓造血细胞完全消失,细胞因子治疗使得骨髓造血功能完全恢复,与照射前水平比较差异无统计学意义。结论 rhG-CSF、rhIL-11和rhIL-2联合应用可提高极期时外周血白细胞最低值,加速白细胞、血小板和红细胞恢复,促进4.5 Gy γ射线照射犬体内残留造血干/祖细胞的增殖、分化和成熟,从而加速造血功能的重建。rhG-CSF、 rhIL-11和rhIL-2不失为治疗极重度骨髓型急性放射病的有效措施。     

钙阻断剂异博定的辐射防护作用

本研究发现钙阻断剂异博定对于¹⁸⁷CsY射线致死量照射的小鼠具有明显的辐射防护作用。照前15分钟腹腔注八或照前30分钟口服给予异博定最大耐受量可使受照小鼠分别获得1.32和1.24的剂量减低系数(DRF)。异博定给药的小鼠6 GY照后9天的股骨骨髓有核细胞计数或外周血白细胞计数都明显的高于照射对照。     

异基因外周血造血干细胞移植治疗极重度骨髓型和肠型急性放射病的临床报告

目的 探讨异基因外周血造血干细胞移植在肠型和极重度骨髓型放射病救治中的作用和地位.方法 山东"10·21" 60Co 辐射事故中2例病人受到意外照射,病例A受照射剂量20～25Gy,诊断为"肠型放射病",病例B受照射剂量9～15Gy,诊断为"极重度骨髓型放射病".经联合环磷酰胺、抗淋巴细胞球蛋白和氟达拉滨预处理,2例分别行HLA半相合及全相合外周血造血干细胞移植.采用环孢霉素A和骁悉方案(病例A加用CD25单抗和供者间充质干细胞)预防移植物抗宿主病(GVHD).结果 2例均移植成功,供体完全存活,移植后9～11天白细胞开始恢复,2周后白细胞恢复正常、骨髓造血重建成功.2例均未发生移植排斥和GVHD.病例A照射后33天死于败血症和多器官功能衰竭.病例B照射后75天死于心衰为主的多器官功能衰竭.结论 HLA相合及半相合外周血造血干细胞移植救治极重度骨髓型和肠型急性放射病是完全可能和可行的,联合免疫抑制剂预处理对促进供体稳定植入是必要的,环孢霉素A、骁悉和CD25单抗及供者间充质干细胞对预防GVHD有重要作用.     

南京“5.7”192Ir源放射事故患者造血系统的改变

目的 通过对南京¹⁹²Ir源放射事故中患者的血液系统进行观察研究,探讨造血系统损伤规律,为核与辐射事故医学应急的救治和随访提供临床资料和积累经验。方法 应用血细胞分析仪动态观察患者的白细胞计数、淋巴细胞计数、血小板计数及血红蛋白值的变化,取其双侧髂骨骨髓涂片观察骨髓象的改变,采用PCR-以测序为基础的分型技术(PCR-SBT)方法检测融合基因突变情况;分别采用流式细胞术和放射免疫分析法测定T淋巴细胞亚群百分率和血清免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、补体(C3、C4)含量,评价细胞免疫和体液免疫功能。结果 患者骨髓造血轻度障碍,予以粒细胞集落刺激因子(G-CSF)治疗后,短时间内恢复正常,受照后约40 d进入恢复期;受照侧骨髓增生低下;融合基因检测未检测到突变;局部感染导致淋巴细胞计数及免疫功能下降。结论 轻度骨髓型急性放射病造血系统损伤较小,病程分期不明显,造血功能恢复较快,尚未造成免疫抑制,但局部感染可导致免疫功能下降。临床医生需注意全身治疗与局部治疗的统一。     

关于骨髓血细胞的分化及造血环境的研究

骨髓幼红细胞和粒细胞的分化及增殖所需的环境不同。通过照射Wister大鼠对比进行了研究,现将结果报告于下: ~(60)Co1000伦全身照射,照后二天外周血及骨髓有核细胞数均显著减少,骨髓内幼稚细胞消失,成为伴有明显出血的空虚骨髓,如不治疗,則一周内死亡。本实验是把上述照射二天后的动物与健康动物或多血动物分别进行主动脉吻合形成联体动物,经不同时间将动物杀死,观察照射动物骨髓的造血恢复过程。与健康动物联体者,在术后24小时,外周血白细胞数可达术前的3倍,以后逐渐增加。骨髓有核细胞数也明     

X线照射后骨髓基质的恢复

放射疗法损伤造血基质,使照射野的造血受抑制。有些研究者认为,基质细胞不参与辐射损伤的修复。为了测定基质对辐射的敏感性和该部位造血的恢复,作者以X线全身照射小鼠1000拉德以下,或用≥1000拉德X线进行局部照射(一侧后肢)。以照后l小时至1个月的有核红细胞计数和体外骨髓     

河南“4.26” 60Co辐射事故3例中、重度骨髓型急性放射病患者造血系统改变20年比较分析

目的 观察3例骨髓型急性放射病（ARS）患者造血系统的远后效应,探究急性外照射后造血系统的远后变化规律及其影响因素。 方法 对1999年河南“4.26”60Co辐射事故中2例中度骨髓型ARS患者(“天“和”旺”,均为男性,年龄分别为37岁和8岁)和1例重度骨髓型ARS患者(“梅”,女性,38岁)进行临床随访,随访时间截至2019年,共随访11次。依据《外照射急性放射病的远期效应医学随访规范》,于患者受照后半年开始定期采集3例患者的外周血和骨髓进行外周血象、骨髓穿刺涂片、骨髓祖细胞培养及造血刺激因子等检查。（1）外周血象检查:使用全自动血细胞分析仪分析外周血白细胞、血小板（PLT）、红细胞计数和血红蛋白（Hb）水平,以及中性粒细胞（NEUT）百分比和淋巴细胞（LYM）百分比。（2）骨髓穿刺检查:行骨髓穿刺涂片及造血祖细胞培养,检测红细胞集落生成单位（CFU-E）、爆式红细胞集落生成单位(BFU-E)、粒细胞-单核细胞集落生成单位（CFU-GM）。（3）造血刺激因子检查:检测促红细胞生成素（EPO）和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）。 结果 20年随访期间,3例患者的白细胞计数基本在正常范围内。受到照射后半年,LYM百分比均偏低,NEUT百分比均偏高。“梅”在随访期间多次出现NEUT百分比升高,“旺”多次出现LYM百分比和NEUT百分比异常。“梅”在受到照射后半年及第1年的随访中PLT计数轻度下降,分别为80×109个/L和91×109个/L;“旺”受到照射后半年,PLT计数轻度下降,为91×109个/L;“天”的PLT计数正常。“梅”的Hb水平多次轻度降低,受到照射后第5年中度下降,为85 g/L;“天”受到照射后第9年Hb水平异常升高;随访期间“天”和“旺”的Hb水平数次轻度升高或降低。3例患者随访期间的6次骨髓穿刺涂片检查的结果均为骨髓增生活跃或增生明显活跃。3例患者受到照射后半年的CFU-E、BFU-E和CFU-GM均异常升高;第2年,上述3项指标均降为0;其后缓慢回升,至第7年,CFU-E均高于正常值,CFU-GM基本恢复,BFU-E仍显著减低。在前3年的随访中,“天”的半年和1年EPO轻度异常,“梅”和“旺”EPO均在正常范围。受到照射后半年,3例患者的 GM-CSF均＜1.00 pg/mL;“梅”第1年的GM-CSF异常升高,为14.3 pg/mL,第2年恢复正常;“天”和“旺”第1~2年的 GM-CSF均正常。 结论 急性照射对造血系统的损伤具有剂量依赖性和长期性;造血刺激因子对骨髓造血功能的恢复具有长期影响;反映骨髓造血功能恢复情况的各指标间可缺乏一致性改变,随访中需要综合评估。      

不同年龄小鼠造血系统辐射损伤与修复的比较观察

目的 观察辐射对不同年龄小鼠（幼年鼠、青年鼠、老年鼠）造血系统的损伤及恢复的影响,探讨幼年鼠、老年鼠受照后造血系统的变化及其与青年鼠的差异。 方法 不同年龄（幼年鼠:3周龄、青年鼠:8周龄、老年鼠:14月龄）雄性C57BL/6小鼠各60只,按照随机区组法分为对照组、2 Gy照射组、4 Gy照射组,每组各20只。其中,照射组小鼠用137Cs γ射线给予全身照射,对照组给予假照射。分别于照射后第3、7、14、28天取材,检测小鼠外周血计数、单侧股骨骨髓有核细胞计数、骨髓中造血干细胞（HSC）百分比、造血祖细胞（HPC）百分比及粒单系造血祖细胞集落形成单位（CFU-GM）绝对百分比。多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验。 结果 照射组小鼠白细胞计数、单侧股骨骨髓有核细胞计数、HSC百分比和HPC百分比在第3天降至最低值,其中,幼年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的34.8%（t=6.129,P<0.05）、19.6%（t=7.084,P<0.05）,青年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的43.8%（t=3.043,P<0.05）、20.0%（t=7.084,P<0.05）,老年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的19.0%（t=22.080,P<0.05）、8.4%（t=24.590,P<0.05）, 4 Gy照射组降低程度重于2 Gy照射组,且呈剂量依赖性。第28天时幼年鼠照射组单侧股骨骨髓有核细胞计数未恢复正常,4 Gy照射组HSC绝对百分比仍低于50%,HPC绝对百分比恢复至50%左右。青年鼠照射组CFU-GM在第28天恢复至正常水平,而幼年鼠照射组（2 Gy照射:t=2.067,P<0.05;4 Gy照射:t=3.358,P<0.05）和老年鼠照射组（2 Gy照射:t=2.586,P<0.05;4 Gy照射:t=4.772,P<0.05）在第28天时显著低于青年鼠照射组,仍未恢复至正常水平。 结论 照射组小鼠造血系统大多数指标在第3天出现急性抑制且呈剂量依赖性,3 d后为损伤恢复期,多数指标在第28天可恢复至正常水平。与青年鼠相比,幼年鼠的血小板和造血干细胞功能对辐射损伤更为敏感,老年鼠的骨髓细胞增殖功能恢复能力下降。     

rhGM—CSF、shEPO在3例急性射病患者救治中的应用

目的：观察rhGM-SCF,rhEPO在3例急性放射病（ARS）救治中的疗效,方法：一例重度ARS患者使用了rhGM-CSF和rhEPO,另两种例中度ARS患者又仅用rhGM-CSF.3例患者均在照后10d,79d检测血清GM－CSF,EPO浓度,结果：使用rhGM-CSF后,外周血白细胞下降速度慢,低值持续时间短,回升速度快,骨髓恢复时间提前,使用rhEPO的患者,外周血网织红细胞为0的持续时间明时间短,回升速度快,骨髓恢复时间提前,使用rhEPO的患者,外周血网织红细胞为0的持续时间明显缩短,骨髓红系增殖池比例增加,3位患者照后10d血清GM－CSF,EPO浓度明显升高,并与受照剂量及骨髓损伤程度相关,结论：rhGM-CSF,rhEPO的应用促进了3例ARS患者造血功能恢复。     

LACA小鼠骨髓辐射损伤后干细胞因子受体表达的免疫组化研究

目的至今，尚未见到采用免疫组化技术研究骨髓辐射损伤后干细胞因子受体（Ｃ－ｋｉｔ）表达及其在造血重建中的意义。方法经６０Ｃｏγ射线全身照射ＬＡＣＡ小鼠，于照射后４周内分批活杀动物，采用光镜、电镜及ＬＳＡＢ免疫组化方法，研究了辐射诱导的造血细胞凋亡及Ｃ－ｋｉｔ的表达及意义。结果全身照射ＬＡＣＡ小鼠时，５．５Ｇｙ为其亚致死剂量，此剂量照射小鼠可导致外周血白细胞及骨髓有核细胞数减少；骨髓明显损伤及损伤后重建现象；在照后１天内可使骨髓造血细胞发生凋亡；５．５Ｇｙ照射后６小时，Ｃ－ｋｉｔ蛋白于造血细胞浆内明显增多，呈强阳性；照后１０天，骨髓造血细胞增生、恢复，Ｃ－ｋｉｔ蛋白于造血细胞膜表达明显增多，呈强阳性。结论Ｃ－ｋｉｔ表达与造血功能重建有关，在早期造血功能重建中起重要调节作用。     

骨髓血窦结构与骨髓血红蛋白含量的关系

本文对照射前和6.25GyY线全身照射后3小时到30天的大鼠,动态地观察了骨髓血红蛋白含量、外周血血红蛋白量和骨髓组织学变化。照后早期,骨髓血红蛋白含量增高,照后3天达峰值,照后30天恢复近照前水平,这一变化过程与骨髓血窦结构的破坏和修复在时象和程度上基本一致。因此,照后早期骨髓血红蛋白含量的变化可以间接反映骨髓血窦结构的破坏和功能障碍的状况,对了解照后骨髓造血功能的状态可以提供重要的信息。     

X线低剂量照射犬血和骨髓祖细胞(CFU-c)的反应

在外周血中造血干细胞维持着恒定的浓度。由全身照射或骨髓局部照射对骨髓干细胞群的任何干扰,都会影响外周血干细胞群的变化。作者利用外周血干细胞的变化探讨血干细胞能否作为照射的一个敏感生物学指标,并可判断预后。目前,对射线较敏感的多能干细胞的研究工作,还仅限于小鼠模型。因此,选用了外周血粒祖细胞琼脂培养技术(CFU-c)作为研究犬X线低剂量全身照射后的检测指标。本实验共选用13只雄性小猎犬,分别全身照射22、44、88伦(受照狗数依次为2、2、4只,     

2例急性放射病患者造血干细胞移植前后中性粒细胞碱性磷酸酶的观察

2004-10-21中国山东省济宁市发生60钴(60Co)辐射事故,两例患者受到意外照射,受照剂量大,病情严重,于2004年10月-2005年1月在解放军307医院血液科接受治疗,分别诊断为"肠型放射病"和"极重度骨髓型急性放射病",均接受造血干细胞移植.本文动态观察移植前后患者外周血碱性磷酸酶(NAP)的变化,现报告如下.