靶向CD147纳米微泡的制备及超声成像能力检测

目的 制备靶向CD147纳米微泡造影剂,并评价其理化性质、对肝细胞肝癌(肝癌)细胞的靶向能力及超声成像能力.方法 将PLGA-PEG、DSPE-PEG2000-COOH、全氟丙烷饱和水溶液混合,通过偶联反应与CD147抗体结合,制备靶向CD147纳米微泡.将靶向CD147及非靶向纳米微泡分别与MHCC-97H(肝癌细胞...     

载BDNF脂质体纳米微粒脂膜微泡超声造影剂的制备与初步评价

目的 探索制备一种新型的耦连包载BDNF脂质体纳米颗粒的脂膜微泡超声造影剂(BDNF-UMCA)。方法 以冷冻干燥法在“脂氟显”制备的基础上加入一定比例的含生物素化棕榈酰磷脂酰甘油钠-聚乙二醇2000-生物素[DPPG-PEG(2000)-Biotin]制备含生物素的脂质超声微泡造影剂,通过链亲和素来耦连含生物素化PEG载BDNF脂质体纳米微粒制备BDNF-UMCA,检测其理化性质、载药量、包封率、稳定性和体内声学特性进行检测。结果 BDNF-UMCA平均粒径4.2±0.79 μm,浓度为1.02×10₉/ml;总药物含量为1.18±1.96 mg/mL,包封率为71.6±2.6%;BDNF-UMCA在4℃条件下,平均粒径和包封率均无明显的变化;在24℃条件下,载BDNF脂质体纳米微粒的平均粒径随时间逐渐增大,第1、3、5、7天的粒径与初始粒径比较具有明显的统计学差异(均P<0.05),包封率在24℃下各个时间点无明显的统计学差异(均P>0.05);BDNF-UMCA能显著增强实验动物肝脏显影,平均峰值强度为21.4±0.9 dB,平均达峰时间为4.7±0.4 s。结论 应用生物素-亲和素偶联可成功制备载BDNF脂质体纳米微粒的脂膜超声微泡造影剂,为靶向显影及药物通过血脑屏障释放提供工具。     

载脑源性神经营养因子脂质体纳米微粒脂膜微泡超声造影剂的制备与初步评价

目的制备一种新型的载脑源性神经营养因子(BDNF)脂质体纳米微粒脂膜微泡超声造影剂(BDNF-UMCA),并对其应用进行初步评价。方法以冷冻干燥法在"脂氟显"制备的基础上加入与二棕榈酰磷脂酰胆碱等量的含生物素化棕榈酰磷脂酰甘油钠-聚乙二醇2000-生物素,制备含生物素化脂膜超声微泡造影剂,通过链亲和素耦连含生物素化聚乙二醇载BDNF脂质体纳米微粒制备BDNF-UMCA,检测其物理性质、载药量、包封率、稳定性及体内声学特性。结果 BDNF-UMCA平均粒径(4.20±0.79)μm,浓度1.02×109/ml,总药物含量(1.18±1.96)mg/ml,包封率(71.6±2.6)%。在4℃下,BDNF-UMCA平均粒径和包封率各时间点无明显变化;在(24±2)℃下,BDNF-UMCA的平均粒径随时间推移逐渐增大,第1、3、5、7天的粒径与初始粒径比较差异均有统计学意义(均P0.05),包封率在(24±2)℃下各时间点比较差异无统计学意义。BDNF-UMCA能显著增强实验动物肝脏显影,平均峰值强度(21.5±3.5)d B,平均达峰时间(19.2±5.2)s。结论应用生物素-亲和素耦连可成功制备BDNF-UMCA;BDNF-UMCA可为靶向显影及药物通过血脑屏障释放提供工具。     

SonoVue与脂质体耦联超声微泡复合载体的制备及其效率研究

目的 建立商品化超声造影剂SonoVue与自制脂质体耦联的方法 ,并检测微泡携带脂质体的效率.方法 通过在SonoVue脂质膜中嵌入DSPE-PEG(2000)Amine,使微泡壁带有活性氨基,以戊二醛交联法使其与脂质体耦联形成脂质体-微泡复合载体,并检测影响其耦联效率的两个主要因素.结果 成功构建该新型复合微泡造影剂,每200 μl微泡混悬液内分别加入150 μl DSPE-PEG(2000)Amine和200μl戊二醛-脂质体时,耦联效率最高.结论 商品化造影剂SonoVue微泡可被修饰,并实现与脂质体耦联.     

叶酸靶向超声造影剂的制备及体外寻靶实验研究

目的 制备偶联叶酸的靶向超声微泡造影剂,鉴定其基本性质,并探讨体外寻靶能力.方法 将DSPE-PEG(2000)Folate溶入微泡成膜材料中,制备叶酸靶向超声微泡造影剂.用DFY型超声图像定量分析诊断仪检测微泡粒径和浓度.通过光镜和激光共聚焦显微仪观察该靶向造影剂对SKOV3细胞的体外寻靶情况,以普通超声微泡作对照.结果 靶向超声微泡的大小、粒径及分布与普通超声微泡相似.体外寻靶试验显示,该靶向微泡可以较多并牢固地聚集到SKOV3细胞表面,而普通微泡对照组未见特异性结合.结论 成功制备出偶联叶酸的靶向超声微泡造影剂.该造影剂在体外对高表达叶酸受体的SKOV3细胞具有较强的特异性亲合力,有望成为靶向显像卵巢癌的理想造影剂.     

六氟化硫脂质微泡的制备研究

目的 制备六氟化硫脂质微泡,为靶向微泡的研制奠定基础.方法 以二硬脂酰磷脂酰胆碱、聚乙二醇磷脂酰乙醇胺为膜成分,六氟化硫为气体核心,薄膜一超声法制备微泡.以SonoVue作对照,观测自制微泡的形态、粒径、浓度、pH值、渗透压等各项理化参数.在二次谐波模式下观察微泡显影体外水囊及兔肾实质,测量分析增强图像峰值灰度.结果 自制微泡和SonoVue均大小均匀,圆形,中空透亮,平均直径分别为2.25μm和2.50 μm,粒径分布分别为0.4～10 μm和0.2～10 μm,90%微泡直径分别控制在6 μm和8 μm以内.初始浓度分别为5 x 108～10 X 108/ml和1 x 108～5 x 108/ml,配置后的稳定性均为6 h.显影水囊灰度值分别为121.67±6.76和122.33±4.53(P>0.05),兔肾造影增强峰灰度分别为72.00±7.21和74.65±10.93(P>0.05).结论 脂质微泡制备成功,具有良好的理化特性及显影效果.     

机械振荡法制备负电荷超声造影剂的探讨

目的机械振荡法制备并评价适用于超声空化栓塞肿瘤微循环的负电荷脂膜超声造影剂。方法采用机械振荡法在不改变脂质及辅料总量前提下,通过改变配方中脂质成分比例以及聚乙二醇(PEG)的用量,制备三种配方超声造影剂,分别观察并检测超声造影剂的浓度、表面电位、pH值、粒径及分布。结果三种配方对造影剂的浓度、稳定性几乎无影响,但对其的电荷特性有明显影响。三种配方所制备微泡的粒径均值分别为1066.6nm、1605.4nm、1552.5nm;微泡表面电位均值:在蒸馏水中分别为-33.8mV、-57.6mV、-66.7mV,在生理盐水中分别为0.1mV、-37.5mV、-37.8mV。与配方1比较,配方2、3所制备微泡大小适中、表面带有更多负电荷(P<0.01),配方2、3间比较无明显差异(P>0.05)。结论采用机械振荡法,增加脂质成分中负电荷磷脂的比例,可以制备出表面带有更多负电荷的超声造影剂,为超声空化栓塞肿瘤微循环提供了实验基础。     

阴离子脂膜超声微泡的制备及评价

目的探索制备适用于超声治疗的阴离子脂膜超声微泡,评价其理化性质。方法通过改变配方中脂质成分比例以及聚乙二醇(PEG)的用量,制备出三种配方的脂膜超声微泡,分别检测微泡大小形态、浓度、表面电位、PH值、粒径及分布。结果三种微泡的浓度约(1~2)×1010/ml;粒径均值分别为1 066.6 nm、1 552.5 nm1、605.4 nm;pH值分别为:蒸馏水中2.94,2.63,2.52,生理盐水中3.77,2.60,2.55;微泡表面电位均值分别为:蒸馏水中-33.8 mV、-57.6 mV-、66.7 mV;生理盐水中0.1 mV-、37.5 mV-、37.8 mV。结论通过增加脂质成分中负电荷磷脂的比例,可以制备出表面带有更多负电荷的阴离子超声微泡,为超声介入治疗提供重要的工作平台。     

血小板活化与血液凝固

血小板活化与血液凝固在体内的止血与血栓形成应答过程中彼此依赖 ,相互作用 ,血小板在血液凝固的启始、维持及终止阶段均起重要作用。现介绍血小板活化过程及凝血因子与血小板之间的反应 ,描述血小板活化的条件、表面暴露促凝磷脂的信号途径以及控制不对称磷脂膜转移的酶作用机制。与凝血相关的血小板活化条件血小板在血液凝固过程中起重要作用 ,在研究其特性时发现 ,血小板之所以能极大地促进并扩大凝血反应 ,是由于膜表面存在磷脂酰丝氨酸。静息的血小板血浆膜外层主要由含胆碱磷脂 [(磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine ,PC)和鞘磷脂 (sphingomyelin ,SM ) ]构成 ,内层由氨基磷脂 (PS和磷脂酰乙醇胺PE)构成 ,即磷脂的不对称分布。血小板活化后 ,在膜表面暴露特异的促凝磷脂PS ,产生促凝活性。同时 ,这些血小板还形成膜囊泡释放入血液循环 ,形成血小板来源的促凝血微泡。1 参与囊泡形成和磷脂酰丝氨酸暴露的血小板受体 :血小板PS暴露过程中典型特征是形态发生变化 ,大部分细胞骨架丢失 ,细胞呈球形 ,并形成膜囊泡。与胶原作用的血小板 (即使缺乏凝血酶时 )或在血浆凝固时与纤维蛋白结合的血小板可...     

梅毒病人抗磷脂抗体检测

20世纪初发现的梅毒非特异性抗体可与多种磷脂成分反应。人体内的磷脂主要是含甘油醇的甘油磷脂。应用ELISA法对82名正常人、76例梅毒病人和另外11例病人治疗前后抗心磷脂抗体(aCL)、抗磷脂酸抗体(aPA)、抗磷脂酰丝氨酸抗体(aPS)、抗磷脂酰乙醇胺抗体(aPE)、抗磷脂酰胆碱抗体(aPC)、抗磷脂酰肌醇(aPI)抗体进行检测。