抗生素敏感试验方法学的研究进展

随着科学技术的发展与应用,抗生素敏感试验在传统的琼脂扩散法和稀释法的基础上得到了长足的发展。本文按试验测试所用的基本方法和原理,对琼脂扩散法、稀释法、E试验法、放射性核素法、荧光法、气体压力法和流式细胞术法的抗生素敏感试验作一综述。     

抗生素敏感试验方法学的研究进展

随着科学技术的发展与应用,抗生素敏感试验在传统的琼脂扩散法和稀释法的基础上得到了长足的发展.本文按试验测试所用的基本方法和原理,对琼脂扩散法、稀释法、E试验法、放射性核素法、荧光法、气体压力法和流式细胞术法的抗生素敏感试验作一综述.     

三种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的评估

目的 评价PBP2a乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林纸片扩散法对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床应用价值.方法 以PCR法扩增mecA基因为金标准,用三种方法对临床分离的105株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较.结果 105株细菌中有82株mecA基因阳性,头孢西丁纸片扩散法、乳胶凝集法与PCR法结果一致,苯唑西林纸片扩散法与PCR法结果相符合均为98.8%.结论 头孢西丁纸片扩散法与PBP2a乳胶凝集法一样比苯唑西林纸片扩散法能更准确检测MRSA,值得推广应用.     

Rosco真菌药敏试验与其他方法的比较研究

目的对3种酵母菌药物敏感试验[E试验法、美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)认可的纸片扩散法、丹麦Rosco纸片扩散法]进行比较,探讨Rosco的纸片扩散法与其他2种方法的一致性.方法对临床分离的52株酵母菌用Rosco纸片扩散法做药敏试验,并与E试验及纸片扩散法(NCCLS认可)进行对照,同时用标准菌株做质控.结果氟康唑Rosco纸片扩散法与E试验法相符率为98.08%(51/52),与NCCLS认可的纸片扩散法相符率为96.15%(50/52).其他抗真菌药Rosco纸片扩散法与E试验法相符率分别为伊曲康唑98.08%(51/52);酮康唑98.08%(51/52);两性霉素B98.08%(51/52);氟胞嘧啶96.15%(50/52).经配对χ2检验,差异无显著性(P>0.05).结论 Rosco纸片扩散法与E试验法、NCCLS认可的纸片扩散法结果基本一致,其方法操作简便、结果直观、价廉、药物选择种类多、准确性好,适用于临床实验室常规抗真菌药敏试验.     

纸片扩散法抗生素敏感性试验的局限性及其补充方法

对纸片扩散法抗生素敏感性试验的局限性进行剖析性学术论证，受试菌的代表性和规范的技术操作应是移植和建立扩散法敏感度解释标准的重要前提。报告了本科的常规药敏试验模式并对各种方法作述评性讨论。认为系统地评价抗生素敏感性应包括：β－内酰胺酶、扩散法定性试验、稀释法定量ＭＩＣ和ＭＢＣ、以及抗生素后效应测定。提示准确地评价抗生素敏感性与有效地分离鉴定病原菌具有同样重要的临床和流行病学意义。     

三种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的评估

目的评价PBP2a乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林纸片扩散法对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床应用价值。方法以PCR法扩增mecA基因为金标准,用三种方法对临床分离的105株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果105株细菌中有82株mecA基因阳性,头孢西丁纸片扩散法、乳胶凝集法与PCR法结果一致,苯唑西林纸片扩散法与PCR法结果相符合均为98.8%。结论头孢西丁纸片扩散法与PBP2a乳胶凝集法一样比苯唑西林纸片扩散法能更准确检测MRSA,值得推广应用。     

哪些药敏试验要用MIC测定

药敏试验是指导临床正确使用抗生素的重要措施.目前大多数医院使用的扩散法是NCCLS推荐的重要方法.但由于某些药物对部分细菌没有可靠的纸片扩散法试验,或MIC更为准确,而推荐使用MIC方法.NCCLS1999年1月版M100-S9文件对此作了详尽的规定,现介绍如下.     

Rosco真菌药敏试验与其他方法的比较研究

目的　对 3种酵母菌药物敏感试验 [E试验法、美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)认可的纸片扩散法、丹麦Rosco纸片扩散法 ]进行比较 ,探讨Rosco的纸片扩散法与其他 2种方法的一致性。方法　对临床分离的 5 2株酵母菌用Rosco纸片扩散法做药敏试验 ,并与E试验及纸片扩散法 (NCCLS认可 )进行对照 ,同时用标准菌株做质控。结果　氟康唑Rosco纸片扩散法与E试验法相符率为 98.0 8% (5 1 / 5 2 ) ,与NCCLS认可的纸片扩散法相符率为 96 .1 5 % (5 0 / 5 2 )。其他抗真菌药Rosco纸片扩散法与E试验法相符率分别为 :伊曲康唑98.0 8% (5 1 / 5 2 ) ;酮康唑 98.0 8% (5 1 / 5 2 ) ;两性霉素B 98.0 8% (5 1 / 5 2 ) ;氟胞嘧啶 96 .1 5 % (5 0 / 5 2 )。经配对 χ2检验 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　Rosco纸片扩散法与E试验法、NCCLS认可的纸片扩散法结果基本一致 ,其方法操作简便、结果直观、价廉、药物选择种类多、准确性好 ,适用于临床实验室常规抗真菌药敏试验     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的　评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)在临床的应用价值。方法　用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的 94株金黄色葡萄球菌 ,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果　mecA基因阳性的 77株金黄色葡萄球菌 ,头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论　头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致 ,是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRsA)在临床的应用价值。方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的94株金黄色葡萄球菌，并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果mecA基因阳性的77株金黄色葡萄球菌，头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致，是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的可靠性和临床实用性进行评估。方法 用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的124株金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂稀释法和胶乳凝集法、mecA基因的检测结果进行比较。结果 mecA基因阳性的90株金黄色葡萄球菌头孢西丁纸片扩散法和胶乳凝集法的敏感性分别为100％和98．9％,特异性均为100％,苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法和琼脂稀释法的敏感性分别为97．8％、98．9％和97．8％,特异性均为100％。结论 头孢西丁纸片扩散法与mecA基因的检测结果高度一致,是筛选和确认MRSA的一种简便可靠的方法。     

两种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的K-B法应用评价

目的评价两种分别使用MH琼脂(头孢西丁)和高盐琼脂(苯唑西林)纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床应用价值。方法用头孢西丁纸片在MH琼脂平板上进行纸片扩散法(K-B法)检测临床分离的89株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法(K-B法)、mecA基因检测进行比较。结果在MH琼脂使用头孢西丁纸片检测MRSA优于高盐琼脂苯唑西林纸片扩散法,并与PCR检测mecA基因的方法高度一致。结论头孢西丁纸片扩散法是筛选和确认耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)一种简单、可靠的实验方法。     

对流免疫电泳法检测乙型肝炎“e”抗原/抗体系统方法的探讨

1972年Magalus和Espark用琼脂扩散法在慢性HBsAg阳性血清中发现新的“e”抗原/抗体系统。目前国内外“e”抗原/抗体系统的检测主要仍采用琼脂扩散法,也有人改用对流免疫电泳法。但由于掌握条件不一,使用价值尚未一致。为了力求简便、快速、敏感度高的方法以适应大量的流行病学词查,我们就对流免疫电泳法检测“e”抗原/抗体系统的一些条件作了以下实验。现将结果报告如下。     

评价3种方法检测酵母样真菌对氟康唑敏感性

目的评价3种抗真菌药敏试验检测酵母样真菌对氟康唑敏感性的临床应用研究。方法采用3种方法，即NC—CLS推荐的纸片扩散法、ROSCO纸片扩散法和微量肉汤稀释法（ATBFUNGUS2，法国生物梅里埃），检测107株酵母样真菌对氟康唑的敏感性。结果NCCLS推荐的纸片扩散法与丹麦ROSCO纸片扩散法、ATB FUNGUS2符合程度分别为94．4％、91．6％，均无一种方法敏感或耐药而其他2种方法为耐药或敏感的严重误差。结论ROSCO纸片扩散法和ATBFUN—GUS2对氟康唑的检测结果与NCCLS推荐的纸片扩散法相比符合率好，准确率高，监测的抗真菌药物种类多，更适合在临床中推广应用。     

药敏纸片扩散法与仪器法在阴道加德纳菌鉴定中的比较

目的比较药敏纸片扩散法与仪器法在阴道加德纳菌鉴定中的应用效果。方法收集100例宫颈分泌物标本进行研究,分别利用药敏纸片扩散法与仪器法进行鉴定。观察记录两种方法的最终检测结果,并进行比较。结果 100例标本均分别经药敏纸片扩散法与仪器法鉴定,最后的鉴定结果显示,药敏纸片扩散法一共鉴定出阴道加德纳菌36例,药敏纸片周围均出现明显的抑菌环。利用仪器法进行鉴定,同样鉴定出阴道加德纳菌36例。对2组的阴道加德纳菌鉴定结果进行比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论在对阴道加德纳菌进行鉴定,利用药敏纸片扩散法与仪器法的最终鉴定结果一致。但药敏纸片扩散法较之仪器法更加简单经济,实用性更强。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌五种表型检测法的评价

目的比较并评价检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的五种表型法(头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁琼脂筛选法、苯唑西林琼脂筛选法、自动细菌分析仪法),寻求适合临床微生物实验室应用的检测方法。方法收集109株金黄色葡萄球菌分别用头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁琼脂筛选法、苯唑西林琼脂筛选法、自动细菌分析仪法五种表型法和荧光实时PCR法进行检测;以PCR法为“金标准”,分别计算其他方法的敏感性、特异性、ROC曲线下面积并进行比较。结果五种表型法的敏感性以头孢西丁琼脂筛选法为最高(97.3%),随后依次为头孢西丁纸片扩散法(91.9%)、VITEK仪器法(91.9%)、苯唑西林琼脂筛选法(73.0%)、苯唑西林纸片扩散法(73.0%);特异性以头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林琼脂筛选法为最高(均为100%),随后依次为VITEK仪器法(93.4%)、头孢西丁琼脂筛选法(93.1%);五种表型法ROC曲线下面积按大小依次为:头孢西丁纸片扩散法0.959、头孢西丁琼脂筛选法0.952、VITEK仪器法0.925、苯唑西林琼脂筛选法0.865、苯唑西林纸片扩散法0.865。结论纸片扩散法中头孢西丁法比苯唑西林法与mecA基因的表达具有更好的相关性;头孢西丁琼脂筛选法可替代苯唑西林琼脂筛选法检测MRSA,是成批量筛选MRSA的理想方法;纸片扩散法和琼脂筛选法由于不需要特殊设备,可在基层实验室普遍开展;VITEK仪器法自动化程度高、简便快速,可在有条件的实验室应用。     

Rosco纸片扩散法检测酵母样真菌对氟康唑药敏试验的评价

目的　Rosco纸片扩散法在酵母样真菌药敏试验中的临床应用评价。方法　应用Rosco纸片扩散法和美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)M 2 7 A大量肉汤稀释法测定临床分离的 76株不同酵母样真菌菌株对氟康唑的药敏状况 ,并以 3株标准菌株作质量控制。结果　两种方法完全符合率是 90 8%未出现一种方法测得的敏感或耐药菌株 ,在用另一种方法检测中为耐药或敏感的严重错误。结论　Rosco纸片扩散法可以代替NCCLSM 2 7 A大量肉汤稀释法在临床推广使用。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌五种表型检测法的评价

目的 比较并评价检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的五种表型法(头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁琼脂筛选法、苯唑西林琼脂筛选法、自动细菌分析仪法),寻求适合临床微生物实验室应用的检测方法.方法 收集109株金黄色葡萄球菌分别用头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁琼脂筛选法、苯唑西林琼脂筛选法、自动细菌分析仪法五种表型法和荧光实时PCR法进行检测;以PCR法为"金标准".分别计算其他方法的敏感性、特异性、ROC曲线下面积并进行比较.结果 五种表型法的敏感性以头孢西丁琼脂筛选法为最高(97.3%),随后依次为头孢西丁纸片扩散法(91.9%)、VITEK仪器法(91.9%)、苯唑西林琼脂筛选法(73.0%)、苯唑西林纸片扩散法(73.0%);特异性以头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林琼脂筛选法为最高(均为100%),随后依次为VITEK仪器法(93.4%)、头孢西丁琼脂筛选法(93.1%);五种表型法ROC曲线下面积按大小依次为:头孢西丁纸片扩散法0.959、头孢西丁琼脂筛选法0.952、VITEK仪器法0.925、苯唑西林琼脂筛选法0.865、苯唑西林纸片扩散法0.865.结论 纸片扩散法中头孢西丁法比苯唑西林法与mecA基因的表达具有更好的相关性;头孢西丁琼脂筛选法可替代苯唑西林琼脂筛选法检测MRSA,是成批量筛选MRSA的理想方法;纸片扩散法和琼脂筛选法由于不需要特殊设备,可在基层实验室普遍开展;VITEK仪器法自动化程度高、简便快速,可在有条件的实验室应用.     

淋病奈瑟菌药敏试验方法及药敏纸片质量的初步评价

目的 评价淋病奈瑟菌（淋球菌）药物敏感性试验方法及了解药敏纸片的质量,为性病实验室选用药敏方法及药敏纸片提供参考依据。 方法 以琼脂稀释法作金标准,用纸片扩散法对5种常用国产及进口药敏纸片进行药敏试验,并将结果与金标准比对,同时比较药敏纸片的质量。 结果 纸片扩散法与琼脂稀释法的符合率：环丙沙星、大观霉素及质粒介导高度耐四环素淋球菌（TRNG）符合率均为100%,而头孢曲松符合率为 96.67%。国产药敏纸片及进口药敏纸片中环丙沙星、大观霉素、头孢曲松及四环素的符合率均为100%;而青霉素符合率为73.33%。 结论 CLSI推荐的淋球菌抗生素敏感试验琼脂稀释法和纸片扩散法检测头孢曲松药物结果存在差异,应引起重视。国产药敏纸片环丙沙星、大观霉素、头孢曲松、四环素可代替进口抗生素,而青霉素药敏纸片质量有待进一步探讨。     

乳胶凝集试验检测耐甲氧西林葡萄球菌的分析研究

耐甲氧西林葡萄球菌(methecillin resistant Staphylocaccus,MRS)是目前抗生素难以控制的医院感染菌,为此我们对检测MRS的乳胶血清凝集法、K-B纸片扩散法、聚合酶链反应(PCR)mecA基因法以及β-内酰胺酶法作了平行比较分析。