视黄酸和硷性成纤维细胞生长因子对神经干细胞增殖和分化的影响

目的:研究视黄酸(RA)、硷性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养的神经干细胞(NSCs)分裂增殖和分化的作用。方法:分离培养新生SD大鼠大脑皮层NSCs,采用不同组合配方的培养液培养细胞,利用MTT法检测其对NSCs存活和增殖的影响;利用免疫荧光鉴定和分化细胞的分类计数法,判定bFGF、RA等对NSCs分化的影响。结果:MTT实验表明,bFGF组、bFGF+RA组以及RA组均能促进NSCs增殖,其中bFGF作用最明显,bFGF+RA次之,RA最弱。RA处理组经诱导分化后产生的神经元是bFGF组及对照组的2～3倍。结论:bFGF对NSCs增殖及较长期存活具有重要的作用,同时抑制其分化;RA可以部分抵消bFGF的促有丝分裂和分化抑制作用,并促进NSCs向神经元方向分化。     

人胚神经干细胞向神经元样细胞诱导分化的研究

目的探讨通过一定的培养条件,使神经干细胞在体外向神经元方向分化。方法在贴壁培养的情况下以含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和肝素的培养基诱导神经干细胞分化,观察分化的细胞形态并用免疫细胞化学技术检测分化细胞的神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。结果诱导7d后免疫细胞化学检测显示NSE阳性细胞占细胞总数的(47.3±1.7)%,明显高于对照组(P<0.01)。分化后细胞的胞体直径、表面积和突起长度也明显高于对照组(P<0.01)。结论在体外应用bFGF和肝素诱导神经干细胞向神经元分化是可行的,bFGF和肝素既能促进神经干细胞分化成更多的神经元,也可促进分化后神经元的成熟。     

人胎脑神经干细胞增殖分化的形态学观察

【目的】从32周人胎脑纹状体中分离培养神经干细胞并观察其增殖分化潜能,旨在为中枢神经系统的移植治疗寻找更广阔的材料。【方法】采用无血清培养和单细胞克隆技术,从32周自愿水囊引产人胎脑纹状体中分离出神经干细胞,并进行培养、传代、分化观察。【结果】从32周人胎脑纹状体中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞,在无血清培养时细胞呈悬浮状态生长,形成神经球,该细胞具有连续克隆能力,可传代培养;在含血清培养时诱导神经干细胞分化,分化后的细胞具有神经元细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞的形态。【结论】32周人胎脑纹状体能培养出具有自我复制和分化潜能的神经干细胞。     

硒化合物对大鼠神经干细胞球分化成熟蛋白表达的影响

[目的]观察微量元素硒对神经干细胞分化成熟的影响。[方法]利用新生大鼠神经干细胞体外培养技术、小盖玻片培养法和免疫细胞化学方法，观察了无机硒(亚硒酸钠)和有机硒(硒甲基半胱氨酸)对神经干细胞向神经元分化标记蛋白NSE、星形胶质细胞分化标记蛋白GFAP、少突胶质细胞分化标记蛋白CNPase的表达状况，同时用Westem-blot免疫印迹技术对神经元特异性烯醇化酶(neuron speeific enolase，NSE)、β-微管蛋白(β-tubulin)、星形胶质细胞-醋酸纤维蛋白(glial fibrillary acidhc protein，GFAP)、环核苷酸-3’磷酸水解酶(2’，3’-cyclic nucleotide 3’phosphohydrolase，CNPase)进行了半定量分析。[结果]适量浓度的硒对神经干细胞球的分化发育有良好的促进作用。在含硒的营养液中神经干细胞分化好、形态正常。神经干细胞向神经元、神经胶质细胞方向分化比例较高。其中胶质细胞分化方向GFAP 和CNPase 细胞计数，平均每高倍视野分别为5～6个和7～12个；并且分支多、细长，网络复杂。免疫印记结果发现有机硒能明显促进神经干细胞分化成熟蛋白NSE、β-tubulin、GFAP、CNPase的表达，化学发光显影明显高于对照组。[结论]适量的硒能促进神经干细胞的分化成熟。特别是硒甲基半胱氨酸是一个低毒和高生物效应的硒营养制剂．在神经干细胞球体外分化发育中有着重要的作用。     

新生大鼠海马神经干细胞的培养与传代

目的：探讨新生大鼠海马神经干细胞（Neural Stem Cells,NSCs）体外分离培养的条件和传代的新方法。方法：从新生大鼠海马中分离神经干细胞,采用无血清培养技术,在表皮生长因子（epidermalgrowthfactor,EGF）、碱性成纤维生长因子（basic fibroblastgrowth factor,bFGF）和B27联合作用下使其不断增殖克隆,采用神经小球分离试剂盒进行传代,利用免疫荧光染色的方法对培养的细胞进行鉴定。结果：从新生大鼠海马分离的细胞群可不断增殖形成细胞克隆球,并能稳定传代,呈nestin阳性表达,且具有多向分化能力。采用神经小球分离试剂盒传代的细胞球生长快,数量多,体积大,折光性好。结论：利用无血清技术和特定生长因子,可以使来源于新生大鼠海马的NSCs在体外扩增,利用大鼠神经小球分离试剂盒可以有效地进行传代,稳定高效地培养出NSCs。     

神经干细胞分化的调控机制

神经干细胞具有高度的自我更新能力、多向分化潜能、迁移能力以及良好的组织融合性等特性,在一定条件下可分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞.因此,神经干细胞分化调控机制的研究对中枢神经系统退行性疾病的治疗及损伤后功能的修复具有重要意义.该文综述了基因及外界环境因素对神经干细胞分化的调控机制.     

新生鼠体外神经干细胞培养、分化及鉴定

目的 探索新生SD大鼠神经干细胞体外分离培养基鉴定的方法。方法 分离新生SD大鼠海马组织, 无血清培养技术培养神经干细胞, 免疫组织化学技术检测其巢蛋白的表达;并用溴脱氧尿嘧啶核苷掺入试验, 免疫荧光双标技术观测神经干细胞的增殖状况;诱导神经干细胞分化, 分别用神经元特异性烯醇化酶抗体和胶质纤维酸性蛋白抗体进行免疫组织化学技术鉴定分化细胞。结果 获得大量悬浮生长的单克隆神经球, 并可以分化为神经元和星形胶质细胞。结论 成功培养的新生SD大鼠神经干细胞具有增殖、自我更新和多分化潜能, 为体外基础和临床研究奠定基础。     

神经干细胞的体外培养及增强型绿色荧光蛋白基因转染研究

目的探索大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)的体外培养,探讨NSCs作为基因靶细胞,以及逆转录病毒介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记NSCs的可行性.方法胚胎大鼠脑组织分离神经干细胞,无血清培养,免疫组织化学技术鉴定.用Lipofectin将pLEGFP-N1逆转录病毒载体导入PA317包装细胞,用G418筛选获得抗性细胞克隆,扩增抗性细胞并收集病毒上清;病毒上清感染神经干细胞,用G418筛选,荧光显微镜下观察并挑选EGFP表达最强的克隆,并做免疫组化鉴定;进一步培养扩增,做传代细胞的分化鉴定.结果培养出大鼠胚胎神经干细胞.荧光显微镜下检测感染逆转录病毒的神经干细胞,以及免疫组化鉴定,均显示EGFP获得良好表达;而且感染细胞能够被诱导分化为神经元和神经胶质细胞.结论大鼠胚胎神经干细胞能够在体外适宜的条件下进行长期培养;神经干细胞可直接作为基因靶细胞;利用逆转录病毒载体,建立稳定表达EGFP的神经干细胞系具有可行性,为进一步做标记细胞移植研究奠定基础.     

硒和B-27添加剂在神经干细胞存活与分化中的作用

目的 观察微量元素硒和神经细胞培养添加剂B-27对神经干细胞存活与分化的影响。方法 采用新生Wistar大鼠神经干细胞体外分离培养技术,应用盖玻片培养法和免疫细胞化学法来观察在无血清培养液中加入添加剂B-27和不含B-27时,硒对神经干细胞存活以及神经元分化标记蛋白β-微管蛋白、星形胶质细胞标记蛋白抗胶质细胞醋酸纤维蛋白（GFAP）和少突胶质细胞标记蛋白抗环核苷酸磷酸二酯酶（CNP酶）表达的影响。结果 在培养液中加入B-27添加剂同时加入硒时,神经干细胞能够存活并且分化成熟良好。在不含B-27添加剂同时也不含硒的培养液中神经干细胞不能够存活。在不含B-27添加剂而含有硒时,神经干细胞则能够存活并且能分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,各种细胞的形态典型。显微镜下计数发现神经干细胞在含硒的培养液中向神经胶质细胞方向分化比例较高。其中神经元分化β-微管蛋白阳性细胞每高倍视野为11．2个。胶质细胞分化方向GFAP阳性和CNP酶阳性细胞计数平均每高倍视野分别为16．1个和9．3个。结论 硒对于神经干细胞体外存活和分化是必需的营养成分。在不含B-27,但有硒存在时,神经干细胞能够存活并分化成熟。     

碱性成纤维细胞生长因子研究进展

<正>碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是成纤维生长因子家族中的一员,它广泛存在于来源于中胚层及神经外胚层的细胞及多种肿瘤细胞中,对这些细胞有促增殖分化功能,并参与了胚胎发育、血管生成、损伤修复、神经再生、肿瘤生长等多项生理及病理过程。80年代初期发现bFGF与肝素有特异性亲和力,据此特性引入     

基于脑-机接口技术的新型医疗器械

介绍脑-机接口技术的研发背景及其应用前景，讨论了基于脑-机接口技术的新型医疗器械开发中所面临的一些问题。     

Neural correlates of pediatric obesity

Australia commenced an ongoing school based government funded human papillomaviruses (HPV) (cervical cancer prevention) vaccination program in April 2007 for adolescent females aged 12-13 years. In addition, up to December 31, 2009, a catch-up program for young females 13-26 years of age was offered: a school-based vaccination program was used to offer HPV vaccine to girls enrolled in school (14-17 years), and general practitioners or other community health provider offered vaccine to young women aged 18-26 years. To date, only the quadrivalent vaccine (HPV 6/11/16/18) has been utilized in the funded program. Acceptance of the vaccine is high with coverage of 3 doses of the HPV vaccine in the school age cohort around 70%, and just over 30% in the older age cohort. Since the vaccination program was initiated, a reduction in new cases of genital warts of 73% among vaccine eligible age females has been evidenced in STI clinics across Australia. A reduction of 44% of new cases in young males (not a part of the free program) was also documented during this same time period, suggesting significant herd immunity. Similarly, in the state of Victoria, a small but significant decrease in high grade abnormalities in Pap screening findings has been reported in young women<18 years for the period 2007-9, as compared to pre-vaccination. Challenges for the future include how we can sustain and improve HPV vaccination coverage in young Australian women, while maintaining cervical cancer screening participation and reviewing cervical cancer screening methods.     

Neural correlates of pediatric obesity

ObjectiveChildhood obesity rates have increased over the last 40 years and have a detrimental impact on public health. While the causes of the obesity epidemic are complex, obesity ultimately arises from chronic imbalances between energy intake and expenditure. An emerging area of research in obesity has focused on the role of the brain in evaluating the rewarding properties of food and making decisions about what and how much to eat.MethodThis article reviews recent scientific literature regarding the brain's role in pediatric food motivation and childhood obesity.ResultsThe article will begin by reviewing some of the recent literature discussing challenges associated with neuroimaging in children and the relevant developmental brain changes that occur in childhood and adolescence. The article will then review studies regarding neural mechanisms of food motivation and the ability to delay gratification in children and how these responses differ in obese compared to healthy weight children.ConclusionIncreasing our understanding about how brain function and behavior may differ in children will inform future research, obesity prevention, and interventions targeting childhood obesity.