转化生长因子-β研究进展

<正> 转化生长因子-β(Transforming GrowthFactor-β,TGF-β)最初是由于这种因子能使大鼠肾脏的成纤维细胞发生表型转化而被定     

骨膜蛋白通过诱导Smad3磷酸化以激活转化生长因子-β1发挥促心肌纤维化的研究现状

转化生长因子-β1(TGF-β1)是重要的促纤维化细胞因子,发挥作用前为无活性的潜活形式。骨膜蛋白作为由肌成纤维细胞所产生的基质蛋白,可以独立于TGF-β1引发与细胞表面的整联蛋白结合引发细胞内Smad3磷酸化,从而促进肌成纤维细胞表面整联蛋白的表达、成纤维细胞的趋化与激活及增加心肌间质硬度以诱导潜活形式的TGF-β1活化,TGF-β1的过度分泌与激活可以维持肌成纤维细胞的活性,从而促进心肌梗死后心肌纤维化。本文从骨膜蛋白诱导Smad3磷酸化的角度出发,探讨对潜活形式的TGF-β1的激活以促进心肌梗死后心肌纤维化的机制。     

胰岛素对心脏细胞增殖的影响及其在心肌肥厚中的作用

目的　研究胰岛素对心肌细胞和心肌成纤维细胞增殖的影响 ,探讨其在心肌肥厚中的作用。方法　①乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞的培养及光镜、电镜和免疫细胞化学染色的鉴定。②两种细胞在不同浓度胰岛素作用下细胞数量、代谢活性与DNA合成 (WST 1、BrdUELISA法 )的测定及细胞周期分析 (流式细胞仪 )。结果　①培养的心脏细胞分别为心肌细胞和成纤维细胞。②胰岛素作用下 ,心肌细胞的数量、WST 1与BrdU的OD值及S +G2 +M期细胞百分比无变化 (P >0 0 5 ) ;而心肌成纤维细胞的数量、WST 1与BrdU的OD值及S +G2 +M期细胞百分比均升高 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。结论　胰岛素可促进培养的心肌成纤维细胞增殖 ,可能在心肌肥厚中起重要作用     

胰岛素在培养的乳鼠心肌成纤维细胞对纤维连接蛋白、层粘连蛋白和转化生长因子β1表达的影响

目的 :研究胰岛素对心肌成纤维细胞胞外基质纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)、层粘连蛋白 (lami nin ,LN)及细胞因子转化生长因子 β1(TGFβ1)表达的影响 ,探讨其在心肌肥厚中的作用。方法 :乳鼠心肌成纤维细胞的培养并鉴定 ;用Streptavidin Peroxi dase (SP)染色方法 ,比较胰岛素实验组和对照组乳鼠心肌成纤维细胞FN、LN及TGFβ1的表达。结果 :培养的细胞经形态学观察和波形蛋白 (vimentin)SP染色 ,证实为心肌成纤维细胞 ;10 -8mol·L-1胰岛素实验组细胞膜上FN和细胞浆内TGFβ1的表达明显强于对照组 (P <0 .0 1) ;LN在培养的心肌成纤维细胞上基本不表达。结论 :在体外 ,胰岛素具有促进心肌成纤维细胞胞外基质FN堆积的作用 ,可能参与了心肌肥厚的发生和发展 ,其机制可能与胰岛素促进心肌成纤维细胞TGFβ1的合成与分泌有关。     

多西环素对大鼠急性心肌梗死后转化生长因子-β1表达及心肌细胞凋亡的影响

目的：探讨多西环素对大鼠急性心肌梗死(MI)后转化生长因子-β1(TGF-β1)表达及心肌细胞凋亡的影响。方法将30只成年Wistar大鼠随机分为假手术组、MI组及多西环素组。通过结扎冠状动脉左前降支建立大鼠MI模型。采用ELISA检测血清心肌肌钙蛋白I(c-TnI)水平,Western blot检测心肌组织TGF-β1及caspase-3蛋白表达,末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡。结果与假手术组比较,MI组及多西环素组c-TnI水平升高,TGF-β1及caspase-3蛋白表达水平升高,心肌细胞凋亡指数明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。多西环素可降低c-TnI水平,下调心肌组织TGF-β1及caspase-3蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MI后TGF-β1表达明显上调,心肌细胞凋亡增加,是心室重塑发生的重要机制。多西环素可通过下调TGF-β1表达,抑制心肌细胞凋亡,进而延缓心室重塑进程。     

内皮间质转分化在心肌纤维化中的研究进展

内皮间质转分化是内皮细胞在多种因素作用下紧密连接丢失,逐步丧失内皮特异性标记物表达,并获得间质细胞或肌成纤维细胞表型表达及其运动和收缩特性的一种生物过程。不仅在心脏和血管生长发育中发挥重要作用,也参与了心、肺、肾等重要器官纤维化变性过程,可能成为慢性心力衰竭心肌纤维化防治的关键病理环节。该文将对内皮间质转分化在心肌纤维化中的作用及研究进展进行综述。     

银杏叶提取物对自发性高血压大鼠血管外膜成纤维细胞表型转化的影响

目的观察银杏叶提取物(GBE)对自发性高血压大鼠(SHR)血管外膜成纤维细胞表型转化的影响。方法体外组织块法培养SHR胸主动脉外膜成纤维细胞,先给予血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)10-6mol/L刺激30 min,再分别加入终浓度为0(对照组),25,50,100 mg/L的GBE共培养24 h,采用RT-PCR检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达,流式细胞术检测各组细胞α-SMA蛋白表达。结果与对照组比较,25,50,100 mg/L GBE组成纤维细胞表达α-SMA mRNA和α-SMA均明显减少,且与浓度成反比,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GBE能抑制SHR血管外膜成纤维细胞的表型转化。     

缺氧/复氧诱导心肌细胞分泌高表达miR-208b的外泌体而调控心肌成纤维细胞活化、迁移和铁死亡

目的　探讨缺氧/复氧诱导心肌细胞所分泌的外泌体能否通过miR-208b调控心肌成纤维细胞的生物学功能。方法　心肌细胞进行缺氧/复氧处理后,收集所分泌外泌体与心肌成纤维细胞进行共培养,然后用荧光定量PCR、Western blot或酶联免疫吸附试验（ELISA）检测miR-208b、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的表达,细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测细胞存活力,Transwell检测细胞迁移,商用试剂盒检测活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）和Fe²⁺的累积。采用单因素方差分析（ANOVA）。结果　缺氧/复氧诱导心肌细胞和其分泌的外泌体高表达miR-208b,将此类外泌体加入到心肌成纤维细胞进行共培养时发现,心肌成纤维细胞可以摄入外泌体,从而上调自身miR-208b的表达,进而促进心肌成纤维细胞的存活力和迁移,增强α-SMA、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ的表达,不过miR-208b的抑制物能显著减弱上述外泌体对心肌成纤维细胞生物学功能的调控作用。同时,缺氧/复氧心肌细胞源性外泌体能进一步增强铁死亡主要指标ROS、MDA和Fe²⁺的累积,抑制铁死亡关键调控因子GPX4的表达,不过miR-208b的抑制物能明显减弱Erastin和缺氧/复氧心肌细胞源性外泌体对铁死亡的影响作用。结论　缺氧/复氧心肌细胞源性外泌体能通过高表达的miR-208b而调控心肌成纤维细胞的生物学功能,表明miR-208b是介导心肌细胞和心肌成纤维细胞间通讯的关键分子。     

黄芪对尾加压素Ⅱ诱导的心脏成纤维细胞胶原合成及分泌转化生长因子-β_1的影响

目的观察黄芪注射液对尾加压素Ⅱ（UⅡ）诱导的心脏成纤维细胞合成胶原及分泌转化生长因子（TGF-β1）的影响。方法体外培养乳鼠心脏成纤维细胞,分成3组：对照组、UⅡ组、UⅡ＋黄芪组。作用一定时间后,Real-time RT-PCR法测定各组细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1基因表达情况,3H-脯氨酸掺入测定胶原合成情况,双抗体夹心ELISA法测定培养上清TGF-β1分泌情况。结果UⅡ可以促进乳鼠心脏成纤维细胞胶原合成,刺激TGF-β1的分泌,黄芪注射液可明显抑制UⅡ的上述作用。结论黄芪可以通过抑制UⅡ诱导的心脏成纤维细胞胶原合成及TGF-β1分泌,延缓心肌纤维化及心脏重构的进展。     

TGF-β/Smads信号通路在心力衰竭心肌纤维化中的作用及中医药干预研究现状

在心力衰竭(HF)进展过程中,转化生长因子-β(TGF-β)/Smads信号通路的异常转导是HF心肌纤维化(MF)的重要机制。TGF-β是MF的关键因子,在HF MF过程中处于过度表达状态。Smads是TGF-β下游的主要效应因子,TGF-β/Smads通路诱导肌成纤维细胞异常增殖,加重心肌细胞外基质沉积,使心脏组织抗纤维化能力减弱,在HF MF的发病机制中发挥复杂作用。中医药在防治HF MF方面具有明确抑制心肌胶原沉积、抗心肌纤维化、保护心肌和改善心脏功能等功效。TGF-β/Smads通路是中药单体、中药复方、中成药发挥HF心肌保护作用的关键通路之一。本文对近10年来中医药干预TGF-β/Smads通路治疗HF MF现有的实验研究成果进行综述,以期为HF MF的防治及新药开发提供理论依据。     

肝内肌成纤维细胞的来源及其在肝纤维化中作用的研究

肝脏慢性损伤,包括病毒性肝炎、酗酒、药物作用、代谢性疾病等各种致病因子导致肝内结缔组织异常增生,肝内细胞外基质过度沉淀形成肝纤维化,在此过程中分泌胶原能力更强且具有收缩能力的肌成纤维细胞的大量生成被认为是肝纤维化发生与发展的关键环节。目前对于肝纤维化时肌成纤维细胞来源的认识尚没有完全明了,在肝纤维化发生时肝星状细胞活化为肌成纤维细胞的主要来源;而骨髓间充质干细胞、上皮细胞经上皮间质转化及一些仍具有分化能力的外周血细胞在一定条件下也可转变为肌成纤维细胞并发挥作用。该文就近年来此方面的研究作一综述。     

非编码RNAs与心脏纤维化的研究进展

心肌纤维化是多种心血管疾病晚期的共同病理性改变,进行性的纤维化是导致多种心律失常和心力衰竭发生和进展的病理性基础。目前,针对心肌纤维化并无有效的逆转药物,这与人们对分子机制认识不够深入相关。非编码RNAs是一类不具有编码蛋白功能的RNAs。人们已经发现,非编码RNAs密切参与了心肌细胞的分化、转录和凋亡等生命周期,是心血管疾病的重要调节因子。越来越多的研究显示,非编码RNAs通过相关的信号通路调节心脏成纤维细胞的增殖与转化,可作为心脏纤维化的潜在的生物标记物及新型治疗靶点,该文就非编码RNAs与心脏纤维之间的关系做一综述。     

丹酚酸B对转化生长因子β_1诱导心肌成纤维细胞增殖的影响

目的:探讨丹酚酸B对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导心肌成纤维细胞增殖的影响。方法:培养原代心肌成纤维细胞;采用波形蛋白、肌动蛋白及纤维连接蛋白免疫组化染色鉴定心肌成纤维细胞,计算阳性细胞率;加入TGF-β1,使其终质量浓度为5、10、20、40 ng/ml,以MTT法测定细胞增殖活性;加入丹酚酸B 100μl,使其终浓度为10、30、100μmol/L,1 h后加100μl TGF-β1,使其终质量浓度为20 ng/ml,以MTT法测定细胞增殖活性。结果:倒置显微镜下观察细胞呈梭形,排列较紧密,有的重叠交叉生长;免疫组化染色鉴定该细胞为心肌成纤维细胞,纯度>99%;10⁴0 ng/ml的TGF-β1均可显著诱导心肌成纤维细胞增殖,1040 ng/ml的TGF-β1均可显著诱导心肌成纤维细胞增殖,10¹00μmol/L的丹酚酸B均可显著抑制TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞增殖。结论:丹酚酸B对TGF-β1诱导心肌成纤维细胞增殖具有抑制作用。     

紫杉醇对血管外膜成纤维细胞表型转化的影响

目的 观察紫杉醇(抗癌药)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠降主动脉外膜成纤维细胞(AF)表型转化的影响.方法 选取雄性SD大鼠,贴壁法培养降主动脉外膜AF,分别以0,10,30,90 nmol·L-1的紫杉醇干预12 h,确定对AF生存活力无影响的紫杉醇浓度.取AF分成2组:AngⅡ组及AngⅡ+9 nmol·L-1紫杉醇组,分别采用RT-PER法和Western印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)mRNA及α-SM-actin蛋白表达.结果 低于10 nmol.L-1时,紫杉醇对成纤维细胞的杀伤作用较弱,与未加紫杉醇组无明显差异;低浓度紫杉醇在mRNA水平和蛋白水平均有效降低AngⅡ诱导的AF α-SM-actin表达(P<0.05).结论 微量紫杉醇可抑制大鼠AF的表型转化,可能为紫杉醇支架减缓血管再狭窄的机制之一.     

聚合胶原对小鼠成纤维细胞表型转化的影响及其机制探讨

目的 探讨聚合胶原对肌成纤维细胞表型转化的促进作用及其可能机制.方法 用聚合胶原培养小鼠成纤维细胞,观察聚合胶原对成纤维细胞形态学及生长曲线影响.蛋白印迹法分析PTEN及Akt Ser473及p42/44磷酸化水平的情况.结果 在聚合胶原中培养的成纤维细胞可以向肌成纤维细胞转化.在聚合胶原的诱导下,成纤维细胞内PTEN含量减少,磷酸化Akt增多,同时细胞内磷酸化p42/44MAPK含量增多.结论 聚合胶原可以诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞转化.其机制可能与PTEN和p42/44MAPK信号通路相关.     

转化生长因子β1在大鼠心肌细胞肥大中的作用

目的探讨转化生长因子β1(transforminggrowth factorβ1，TGF-β1)在诱导大鼠心肌细胞肥大中的作用。方法培养新生大鼠的心肌细胞，检测[^3H]-Leu的掺入量和胚胎抗原心房利钠因子(atrial natriuretic factor，ANF)的表达。结果不同浓度的转化生长因子β1均能明显增加心肌细胞[^2H]-Leu的掺入量和ANF的表达。结论转化生长因子β1能诱导大鼠的心肌细胞肥大。     

苦参素对成纤维细胞增殖、形态学及转化生长因子β_1的影响

目的 :研究苦参素对成纤维细胞增殖、形态学及转化生长因子β1(TGF β1)表达的影响 ,阐明其抗肝纤维化的作用机制。方法 :用甲基噻唑基四唑MTT(methylthiazolyltetrazolium)比色法、HE染色及免疫细胞化学技术分别检测小鼠皮肤成纤维细胞(NIH3T3)增殖、形态学及TGF β1的表达。结果 :苦参素能明显抑制成纤维细胞增殖及TGF β1的表达 ,并呈剂量依赖性。结论 :苦参素可通过抑制成纤维细胞增殖及TGF β1的表达而起到抗肝纤维化作用。     

心肌成纤维细胞对心肌损伤后的修复和再生作用及中药调节北大核心CSCD

心肌细胞是一种高度分化的终末细胞,自我更新能力差,因而心梗发生后,坏死的心肌细胞不能得到有效的补充,梗死区域很快被纤维组织所取代,严重影响心功能。心肌细胞数量的减少和心脏结构完整性的破坏,造成了心肌梗死及心力衰竭等心血管疾病,持续性的危害人类生命健康。目前,冠心病的治疗已取得较大进步,针对心梗后的心肌修复常用治疗方案主要为干细胞移植、外泌体介导和微环境构建等3方面,但是均有不同程度的问题难以解决。心肌成纤维细胞在心脏细胞中占据大部分数量,成纤维细胞的分布特性及其在心肌梗死过程中的作用,使它成为心肌梗死后的重要效应细胞。因此,该文从心肌成纤维细胞的来源、分布、梗死后状态和成纤维细胞对心肌细胞的作用等方面作一综述,以期为成纤维细胞在心肌梗死后心肌细胞的修复和再生治疗方面提供新的治疗思路和方案。     

心肌营养素1与心肌梗死

心肌营养素I(CT-1)是白介素6(IL-6)家族细胞因子,它与糖蛋白130/白血病抑制因子受体异二聚体相结合,诱导心肌细胞肥大,促进心脏成纤维细胞增生,抑制心肌细胞凋亡,与许多心脏疾病密切相关.本文就CT-1与心肌梗死之间的关系作一综述.     

转化生长因子β_1在糖尿病心肌病变中作用的研究

目的:观察链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病(T1DM)大鼠体内血清和心肌局部转化生长因子β1(TGFβ1)在糖尿病心肌病变发生发展病程中含量的变化和心肌结构的改变,探讨TGFβ1在糖尿病心肌病变中的作用。方法:采用双抗体夹心ELISA法进行血清TGFβ1测定,用免疫组织化学测定心肌TGFβ1的变化,光镜下观察心肌细胞形态学改变,电镜下观察心肌线粒体的超微结构变化及毛细血管基底膜的改变。结果:糖尿病大鼠较正常大鼠血清和心肌组织中TGFβ1含量增加(P<0.01),且随着病程的进展而升高;光镜下可见心肌细胞肿胀,排列紊乱;电镜下可见心肌细胞线粒体肿胀,毛细血管内皮细胞基底膜增厚。结论:糖尿病大鼠TGFβ1浓度变化趋势与心肌病变程度相一致,其浓度变化可反映T1DM心肌病的病变程度,在T1DM心肌病变中起促进作用。