人类疮疹病毒6,7型体外感染淋巴细胞对四种细胞因 …

目的 研究人类疮疹病毒６、７型（ｈｕｍａｎ ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ ６ ａｎｄ ７,ＨＨＶ－６、ＨＨＶ－７）体外感染对免疫功能的影响。方法 采用生物活性法或ＥＬＩＳＡ法分别检测了ＨＨＶ－７ Ｇｌａｓｇｏｗ、ＹＹ５２株病毒及ＨＨＶ－６ ＧＳ株感染脐血单个核细胞（ＣＢＭＣｓ）,培养上清中细胞因子ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２ Ｐ７０水平的动态变化。结果 ３株病毒感染ＣＰＭＣｓ后前２在均     

乌鲁木齐地区HIV感染人群中人类疱疹病毒8型IgG抗体调查

1994年美国科学家常远等〔1〕从卡波西肉瘤 (Ｋａｐｏｓｉ’ｓＳａｒ ｃｏｍａ ,ＫＳ)患者瘤组织中发现了一种新的疱疹病毒样序列 ,许多学者称之为ＫＳ相关疱疹病毒。经鉴定后被命名为人类疱疹病毒 8型 (ＨＨＶ 8)。近年国外已对普通人群及人ＨＩＶ感染人群中ＨＨＶ 8血清流行病学作了大量调查。为了解乌鲁木齐地区ＨＩＶ感染人群ＨＨＶ 8ＩｇＧ抗体情况 ,我们对 56例ＨＩＶ阳性者作了ＨＨＶ 8ＩｇＧ的检测。1　材料和方法1 1　标本采集　 1 998年 1月～ 2 0 0 0年 6月新疆维吾尔自治区人民医院检验科从门诊和住院患者中筛查出ＨＩＶ抗体阳…     

致瘤性人类疱疹病毒(HHV)的研究进展

ＤＮＡ肿瘤病毒疱疹病毒科中包括多种病毒 ,除已知的ＨＳＶ - 1、ＨＳＶ - 2、ＨＣＭＶ、ＶＺＶ、和ＥＢＶ等外 ,近年来还发现和分离了ＨＨＶ - 6、ＨＨＶ - 7和ＨＨＶ - 8等疱疹病毒。研究表明 ,上述病毒中除外ＶＺＶ和ＨＨＶ- 7,均与人类肿瘤发生有病因学联系。Ｓａｌａｈｕｄｄｉｎ等 ( 1 984)从艾滋病合并淋巴细胞增生症患者分离出一种新的病毒 ,称为人类嗜Ｂ淋巴细胞病毒 (ＨＢＬＶ) ,后经研究证明其颗粒大小、基因组结构与疱疹病毒相似 ,但其抗原性与其它疱疹病毒不同 ,而改称为ＨＨＶ - 6型病毒 ,属于β疱疹病毒亚科内 ,为双链ＤＮＡ…     

血小板源生长因子对培养内皮细胞移行的影响及其与血管内皮细 …

一、材料与方法1 材料与试剂 :人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)株(ＥＣＶ30 4)由武汉大学菌种保存中心提供。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＤＭＥＭ/Ｆ12 、胎牛血清 (ＦＢＳ)及青霉素 链霉素均为美国Ｇｉｂｃｏ公司产品。血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)抗血清为ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＳＡＢＣ试剂盒抗血清及二氨基联苯胺(ＤＡＢ)由博士德公司提供。2 血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)对培养ＨＵＶＥＣ移行的影响 :参照Ｇａｊｄｕｓｅｋ等[1] 介绍的方法 ,并加以改进。选用生长良好的ＨＵＶＥＣ悬液 ,调整细胞密度为 2× 10 4 个 /…     

急性白血病患儿人类疱疹病毒-6型感染的初步研究

人类疱疹病毒 6型 (ＨｕｍａｎＨｅｒ ｐｅｓｖｉｒｕｓ 6 ,ＨＨＶ 6 )是近年来发现的一组新病毒 ,新近发现在白血病、淋巴瘤中具有较高的感染率。为了探讨ＨＨＶ 6在急性白血病中的感染情况及与疾病的关系 ,对 30例小儿急性白血病进行了ＨＨＶ 6病毒及其抗体的检测。其中急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 2 0例 ,急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ) 10例 ,均为初发病例。年龄 :2～ 14岁。男 17例 ,女13例。对照组为健康儿童 30例。方法 :①ＨＨＶ 6病毒分离 :在化疗前抽取静脉抗凝血 2ｍｌ(常规分离出单个核细胞 )和骨髓液 0 5ｍｌ接种于新生儿…     

人类疱疹病毒6型（HHV－6）分离株DNA限制性核酸内切酶酶切图谱分析研究

人类疱疹病毒６型（ＨＨＶ—６）是１９８６年新发现的疱疹病毒。限制性核酸内切酶切图谱分析表明：ＨＨＶ－６不同株之间ＤＮＡ酶切图谱呈多态性。根据酶切图谱的不同，将ＨＨＶ－６分离株分为Ａ、Ｂ二组，Ｂ组又分为Ⅰ、Ⅱ两个亚组。此方法为ＨＨＶ－６感染临床诊断和分子流行病学调查提供了条件     

人类疱疹病毒6型（HHV—6）分离株DNA限制性核酸内切酶酶切图谱分析研究

人类疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）是１９８６年新发现的疱疹病毒，限制性核酸内切酶切图谱分析表明，ＨＨＶ－６不同株之间ＤＮＡ酶切图谱呈多态性，根据酶切图谱的不同，将ＨＨＶ－６分离株分为Ａ，Ｂ二组，Ｂ组又分为Ｉ，Ⅱ两个亚组，此方法对ＨＨＶ－６感染临床诊断和分子流行病学调查提供了条件。     

北京地区妊娠妇女中单纯疱疹病毒感染的研究

近年来 ,由单纯疱疹病毒 (ＨＳＶ)引起的人类生殖道感染有明显升高的趋势[1] ,孕妇感染ＨＳＶ后可引起胎儿宫内感染 ,导致流产、死产及新生儿感染等一系列不良后果[2 ] 。按照血清学分型 ,ＨＳＶ可分为ＨＳＶ Ⅰ型和ＨＳＶ Ⅱ型两大类[3] 。一般认为ＨＳＶ Ⅱ与生殖道感染的关系比较密切 ,而ＨＳＶ Ⅰ型则与其他感染有关。但一些调查也发现了ＨＳＶ Ⅰ引起的孕妇感染和宫内感染[4 ,5] 。为了研究ＨＳＶ可能引起的宫内感染问题 ,我们利用酶联免疫吸附实验 (ＥＬＩＳＡ)技术对 2 82例北京地区孕妇血中的ＨＳＶ Ⅰ型和ＨＳＶ Ⅱ型的ＩｇＭ抗体…     

抗人红细胞血型B抗原单链抗体基因的构建表达

我室曾建立分泌抗Ｂ血型抗原ＩｇＭ类单克隆抗体的5Ｄ12杂交瘤细胞株[1] ,本文应用基因工程技术 ,分离和克隆了 5Ｄ12株单抗的ＶＨ 和ＶＬ 基因 ,采用重叠延伸拼接ＰＣＲ(ＳＯＥＰＣＲ )技术[2 ] 体外成功构建 5Ｄ12单链抗体基因 ,获得较高水平的表达。1　材料和方法1 1　细胞和载体　Ｅ ｃｏｌｉＴＧ1为英国Ｗｉｎｔｅｒ教授惠赠 ;质粒ｐＧＥＸ 4Ｔ 2购自Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司 ;含十五肽接头质粒ｐＳＴＥ 2 15由德国Ｄｕｂｅｌ教授惠赠。1 2　引物和试剂　用于扩增重链可变区的一对引物为ＶＨＢａｃｋ (5 ＡＧＧＴ (Ｃ/Ｇ )ＣＡＧＣＴＧ…     

经血传播肝炎患者卡波氏肉瘤相关的疱疹病毒感染的血清学研究

卡波氏肉瘤相关的疱疹病毒(ＫＳＨＶ) ,为近来发现的一种新的疱疹病毒 ,又称人类疱疹病毒 8型 (ＨＨＶ 8)。国外研究发现该病毒主要经性途径传播 ,作者最近报道了我国静脉吸毒者中有较高的ＫＳＨＶ感染 ,ＫＳＨＶ可经静脉吸毒传播。为进一步摸清我国ＫＳＨＶ的感染情况和感染途径 ,我们用抗原性、特异性强的ＫＳＨＶＯＲＦ6 5基因重组蛋白作抗作者单位 :3 10 0 0 9杭州 ,浙江大学医学院附属第二医院通信作者 :王炜琴 (Ｅ ｍａｉｌ:8497@ｓｉｎａ .ｃｏｍ)原 ,用ＥＬＩＳＡ法对 1999年 3月～ 12月间浙江省部分经血传播肝炎患者 144例(乙型肝…     

心脏移植并发疱疹病毒6型感染

从１３例心脏移植病人的外周血淋巴细胞中分离出２株疱疹病毒６型（ＨＨＶ６），并检测了手术前后病人血清特异性抗－ＨＨＶ６ＩｇＧ抗体。这２株ＨＨＶ６可引起典型的细胞病变。分离的毒株在电镜下可见疱疹类病毒样颗粒。经特异性抗体和ＤＮＡ杂交试验证明，这两株病毒均属于ＨＨＶ６Ｂ组。病人血清中特异性抗－ＨＨＶ６ＩｇＧ抗体出现４倍或４倍以上增长的有５例（３９％），其中包括２例病毒分离阳性的病人血清。由于病人在术前血清已是阳性和术后出现有意义效价的增长，因此试验结果提示心脏移植前后免疫抑制剂的应用可能是造成ＨＨＶ６复发感染的重要原因。     

从器官移植受者PBMC中分离鉴定HHV┐

从器官移植受者ＰＢＭＣ中分离鉴定ＨＨＶ┐６罗敏华施凯肖扬名人类疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）是１９８６年由Ｓａ－ｉａｈｕｄｄｉｎ首先从淋巴增生及ＡＩＤＳ病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中分离到的新型疱疹病毒。该病毒在正常人群中感染率很高，在免疫功能受抑制...     

人类疱疹病毒7型DNA断裂包装位点序列分析

目的测定分析人类疱疹病毒７型（ＨＨＶ７）ＤＮＡ末端、断裂位点及包装信号的基因序列。方法ＨＨＶ７感染Ｓｕｐ－Ｔ１细胞后提取ＤＮＡ，ＰＣＲ扩增待测ＤＮＡ片断，与质粒载体连接后筛选目的基因克隆，双脱氧末端终止法测定目的基因序列。结果经测序后得到了ＨＨＶ７ＤＮＡ末端及其断裂位点和包装信号的基因序列。分析比较后发现在靠近ＨＨＶ７ＤＮＡ末端的基因序列中存在与人类端粒重复序列相同的基元序列ＧＧＧＴＴＡ。ＨＨＶ７断裂位点具有ｐａｃ２·Ｘ·ｐａｃｌ的排列，ＨＨＶ７的断裂位点位于包装信号ｐａｃ１及ｐａｃ２之间，只有当三者同时存在时才能构成一个完整的断裂包装位点。并且只有当复制型ＨＨＶ７ＤＮＡ环化时才能形成完整的断裂包装位点。结论ＨＨＶ７ｐａｃ１的基因序列与ＨＨＶ６ｐａｃ１的基因序列具有较高同源性。ＨＨＶ７与ＨＨＶ６具有相似的ＤＮＡ末端基因结构。     

人类疱疹病毒7型（HHV—7）研究进展

人类疱疹病毒７型（ＨＨＶ－７）是１９９０年从一健康成人外周血的单核细胞（ＰＢＭＣｓ）中首次发现的。研究发现，ＨＨＶ－７很可能是幼儿急疹（ＥＳ）的又一病原。本文就ＨＨＶ－７的基因组结构、生物学特性、流行病学及其与疾病的关系等方面作一综述。     

单纯疱疹病毒I型胸苷激酶基因治疗肿瘤机制研究进展

1　ＨＳＶ1 -ＴＫ基因定义、分子结构ＨＳＶ1 -ＴＫ基因即单纯疱疹病毒Ｉ型胸腺嘧啶核苷激酶基因 (ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓ -Ｉｔｙｐｅｔｈｙｍｉｄｉｎｅｋｉｎａｓｅｇｅｎｅ,ＨＳＶ1 -ＴＫ ) ,早在 1 979年就有人克隆了ＨＳＶ1 -ＴＫ基因序列[1] ,基因转录部分约 1 30 0个核苷酸 ,蛋白质编码区长为 1 1 2 8个核苷酸 ,编码 376个密码子 ,基因中没有内含子 ,其转录起始部(ｍＲＮＡ5’端 )有 1 0 7个核苷酸的非翻译区。2　ＴＫ基因治疗肿瘤机制2 1　ＴＫ酶作用　ＴＫ基因是一个药敏基因 (ｄｒｕｇｓｅｎ ｓｉｔｉｖｉｔｙｇ…     

心脏移植与疮疹病毒6型感染

从加拿大渥太华市民医院的１３例心脏移植病人收集移植前后静脉肝素血３０份，将按常规方法分离出的淋巴细胞加入经ＰＨＡ活化的脐带血淋巴细胞中共同培养，结果分离出２株疱疹病毒６型（ＨＨＶ－ｅ），这２株ＨＨＶ－６引起典型的细胞病变，而且毒株在多次传代后仍可保持感染性，分离的毒株在电镜下可见疮疹类病毒样颗粒。经特异性抗体和ＤＮＡ杂交试验证明这两殊病毒均属于ＨＨＶ－６Ｂ，同时收集此１３例病人移植前后连续血清５２份，用间接免疫荧光方法测定血清中特异性抗ＨＨＶ－６ＩｅｇＧ抗体，５例（３９％）病人抗体出现４倍或４倍…     

外源HSV-TK和B7双基因在大鼠乳腺癌细胞中的共表达

单纯疱疹病毒胸苷激酶 (ＨＳＶ -ＴＫ) ,能将无毒或低毒的前药羟甲基无环鸟苷 (ｇａｎｃｉｃｌｏｕｖｉｒ,ＧＣＶ)磷酸化 ,并进一步在胞内代谢生成三磷酸ＧＣＶ。后者可抑制细胞内的ＤＮＡ聚合酶 ,通过阻断ＤＮＡ的合成而杀伤肿瘤细胞 ,并具有“旁观者效应”[1] 。共刺激分子Ｂ7可为Ｔ细胞的活化提供辅助信号 ,参与机体的抗肿瘤免疫应答。本研究构建了含ＴＫ和Ｂ7双基因的重组逆转录病毒载体 ,并以其转染大鼠乳腺癌细胞 ,观察重组基因的共表达。1　材料和方法1.1　材料　质粒ｐＳＲＩ/ｍＢ7 1、ｐＬＸＮ、ｐＬＮ ＴＫ、宿主菌ＤＨ5α及钙化…     

CYP1A1、NAT2基因多态性与帕金森病的关系

为探讨代谢酶基因多态与帕金森病 (ＰＤ)易患性的关系 ,我们应用ＰＣＲ ＲＦＬＰ、ＡＳＡ和自动实时荧光Ｌｉｇｈｔ Ｃｙｃｌｅｒ技术对 90例ＰＤ患者的ＣＹＰ1Ａ1ＭｓｐＩ基因型和第 7外显子4 889位异亮氨酸 (Ｉｌｅ) 缬氨酸 (Ｖａｌ)基因型及Ｎ 乙酰基转移酶 2(ＮＡＴ 2 )基因 4个多态 :第 4 81位点的 (Ｃ→Ｔ) [ＮＡＴ 2 5Ａ];第5 90位点的 (Ｇ→Ａ) [ＮＡＴ2 6Ａ];第 85 7位点的 (Ｇ→Ａ)[ＮＡＴ2 7Ａ/Ｂ]和第 191位点的 (Ｇ→Ａ) [ＮＡＴ2 14Ａ]进行检测和分析1　对象和方法1.1　对象　ＰＤ患者 90例 (早发ＰＤ患者 4 2例 ,男 2 2…     

树突状细胞表面的一种受体与Ⅰ型艾滋病毒(HIV-1)感染淋巴细胞有关

美国和荷兰的科学家报道 ,他们在树突状细胞表面发现一个ＨＩＶ 1受体—ＤＣ ＳＩＧＮ ,这一发现使人们对ＨＩＶ 1感染淋巴细胞之前的一些问题有了更新的认识。ＨＩＶ 1首先侵入人体的粘膜 ,然后由ＤＣ ＳＩＧＮ引向淋巴细胞 ,达到该病毒的靶位。荷兰科学家首先分离出了ＤＣ ＳＩＧＮ ,它是一种分子量为44ＫＤ的蛋白质 ,能够与Ｔ细胞表面的ＩＣＡＭ 3结合 ,ＤＣ ＳＩＧＮ具有树突状细胞特异性 ,能够介导树突状细胞与幼稚Ｔ细胞之间的结合。荷兰科学家与美国科学家联合证明ＤＣ ＳＩＧＮ的氨基酸序列与Ｃ型植物血凝素相同 ,后者能与ＨＩＶ 1…     

HSV-1扩增子病毒载体介导rGDNF的体外表达

Ⅰ型单纯疱疹病毒 (ＨｅｒｐｅｓＳｉｍｐｌｅｘＶｉｒｕｓ 1,ＨＳＶ 1)载体有嗜神经性 ,是神经系统基因治疗中最有前途的载体之一。ＨＳＶ 1扩增子载体质粒只含有ＨＳＶ 1病毒的复制和包装所必需的顺式元件和要转移的目的基因以及细菌质粒骨架。扩增子病毒包装所需的反式元件由辅助病毒 (如ＨＳＶ 1温度敏感突变株ｔｓＫ)或含病毒基因组的质粒ＤＮＡ提供。扩增子质粒ＤＮＡ滚环复制形成首尾串联的、长度高达 15 0ｋｂ的线状ＤＮＡ ,而被包装入病毒毒粒中 ,成为一种含有多拷贝串联质粒的、有感染性的假病毒[1] 。本研究在我们以前的工作基础…