香辛方外敷对肺癌骨癌痛小鼠炎性介质和MCP-1的影响

目的:应用活体荧光成像肺癌骨转移癌模型,探讨香辛方外敷缓解骨转移癌痛的机制。方法:通过股骨内注射表达绿色荧光蛋白的人肺腺癌A549细胞建立肺癌骨转移癌模型,随机分为中药外敷组、扶他林组、模型组,每组10只。中药外敷组香辛方0.5 g/(kg·d)外敷,造模后7～21 d 1次/d;扶他林组0.1g/(kg·d)外涂,造模后7～21 d 1次/d;模型组生理盐水0.5 mL/只外涂,1次/d;另设假手术组生理盐水0.5 mL/只外涂,1次/d。造模21 d后检测小鼠血脊髓单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNFα)以及白介素-6(IL-6)的表达水平。结果:MCP-1表达模型组脊髓MCP-1表达水平[(1.88±0.18) mg/L]比假手术组[(1.21±0.19) mg/L]高,中药外敷组脊髓MCP-1表达水平[(1.51±0.09) mg/L]比模型组和扶他林组[(1.67±0.11) mg/L]降低(均P0.05)。IL-1β水平扶他林组[(99.11±10.52) ng/L]和模型组[(104.46±11.07) ng/L] IL-1β水平比假手术组[(75.69±16.57) ng/L]高,中药外敷组IL-1β水平[(85.97±11.88) ng/L]比模型组和扶他林组低(均P0.05)。TNFα水平中药外敷组[(447.91±44.67) ng/L]、扶他林组[(504.14±44.30) ng/L]和模型组[(534.84±48.89) ng/L] TNFα水平均比假手术组[(357.69±35.96) ng/L]升高,中药外敷组TNFα水平比模型组和扶他林组低(均P0.05)。IL-6水平各组小鼠IL-6水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:香辛方可能通过减少脊髓MCP-1蛋白的表达,抑制中枢敏化;同时降低血IL-1β和TNFα水平。本方可能通过下调炎性介质表达,起到缓解骨转移癌痛的作用。     

表达IκBα突变体的树突状细胞对大鼠移植肾存活时间的影响

目的 观察IκBα突变体基因修饰的供体树突状细胞(IκBαM-Dc)对大鼠移植肾存活时间的影响.方法 利用重组腺病毒载体将IκBαM基因转染WF大鼠骨髓DC,流式细胞仪检测DC共刺激分子CD80、CD86表达.以wF大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,行同种肾移植.术前7 d,受体输注供体IκBαM-DC作为IκBαM组,未输注IκBαM-DC的受体作为对照组,观察移植肾存活时间和术后肾功能变化.术后第14天检测受体T细胞对供体成熟DC及第三方大鼠成熟DC的反应性.结果 IκBαM明显抑制DC共刺激分子CD80、CD86表达.IκBαM组受体鼠移植肾存活时间为(32.5±7.8)d,较对照组移植肾存活时间(8.5±1.7)d明显延长(P<0.01);而其术后7 d血清肌酐为(57.3±8.2)μmol/L,较对照组血清肌酐(498.0±46.3)μmol/L明显减低.肾移植术后,IκBαM组受体T细胞对供体成熟DC反应明显低于对照组,而对第三方大鼠成熟DC的反应性与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 表达IκBα突变体的供体树突状细胞能诱导受体大鼠T细胞对供体抗原的免疫低反应,显著延长大鼠移植肾存活时间.     

肝再生增强因子对缺血再灌注损伤肾脏局部炎性反应的影响

目的 探讨重组人肝再生增强因子( rhALR)对缺血再灌注(IR)肾损伤大鼠模型肾脏局部炎性细胞浸润及炎性因子表达的影响.方法 将SD大鼠按随机数字表法分成假手术组、IR组、rhALR低剂量(100 μg/kg)组及rhALR高剂量(200 μg/kg)组.采用双侧肾蒂夹闭60 min后再灌注建立IR肾损伤动物模型.常规生化法检测血肌酐、尿素氮的水平,HE染色观察肾脏组织学改变,比色法检测肾组织髓过氧化物酶( MPO)的活性,Western印迹法检测肾组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的蛋白表达.结果 rhALR组的血肌酐和尿素氮显著低于IR组(均P＜ 0.05),肾组织病理损害减轻,rhALR高剂量组较rhALR低剂量组肾功能及肾脏病理改善更明显.IR组大鼠肾组织的MPO活性、TNF-α、ICAM-1、MCP-1的蛋白表达在术后12 h较假手术组显著上升,术后24h有所下降,但仍维持在较高水平(均P＜0.05);rhALR组肾组织MPO活性、肾组织TNF-α、ICAM-1、MCP-1的蛋白表达较IR组显著下降(均P＜0.05),且rhALR高剂量组4者较rhALR低剂量组下降更显著(均P＜0.05).结论 rhALR对IR肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与其减少肾脏局部的炎性细胞浸润、抑制炎性因子MCP-1、ICAM-1、TNF-α的表达有关.     

供体年龄对活体肾移植预后的影响

目的 探讨供体年龄对活体肾移植预后的影响.方法 回顾性分析2004年至2011年间在我院实施的活体亲属肾移植217例,按供体年龄或供受体年龄差异分组,随访并比较各组受者的血肌酐水平和术后并发症情况.结果 随着供体年龄的增长,受体移植术后血肌酐水平呈上升趋势.与供受体年龄差＜-5岁组比较,供体年龄差＞5岁组的Scr水平在1个月[(143.5±42.1) μmol/L比(114.4±30.4)μ mol/L]、3个月[(139.9±36.6) μmol/L比(110.6 ±33.3)μmol/L]、1年[(132.1±22.1)μmol/L比(105.5±35.9) μmol/L]及2年(132.0±45.4) μmol/L比(97.2±17.5) μmol/L]均增高,差异有统计学意义(均P＜0.05).与年轻供肾组(＜50岁)相比,老年供肾组(＞50岁)的急性排斥反应发生率(19.4％比9.7％)和慢性排斥反应发生率(9.7％比1.4％)也显著增高(均P＜ 0.05).术后人及肾的存活率比较差异无统计学意义.供受体年龄差异是术后2年Scr水平异常的独立危险因素(OR=5.010,P＜0.05).结论 供体年龄是肾移植预后的重要影响因素,老年供肾的疗效较差.     

创伤性休克兔血浆乳酸、肾损伤分子-1的动态变化及亚甲蓝的干预作用

目的 观察创伤性休克兔血浆乳酸(lactic acid,LA)、肾损伤分子-1(kidney inury molecule-1,KIM-1)的动态变化及鸟苷酸环化酶抑制药亚甲蓝(methylene blue,MB)对创伤性休克兔复苏后肾脏功能的保护作用.方法 大白兔18只,按随机数字表法进行完全随机化分组,分为对照组(n=6),创伤性休克生理盐水复苏组(NS组,n=6),创伤性休克MB处理组(MB处理组,n=6),NS组及MB处理组测定休克前(T1)、休克末(T2)、复苏末(T3),复苏后2(T4)、4(T5)、6(T6)、8 h(T7)时间点血浆LA、KIM-1水平,对照组测定相应时间点LA、KIM-1水平.结果 对照组各时间点血浆LA及KIM-1水平差异无统计学意义.兔创伤性休克后,血浆LA及KIM-1水平比休克前均有显著升高(P＜0.05).兔创伤性休克复苏后2、4、6、8 h NS组的LA水平分别为(82.2±3.5)、(93.6±2.6)、(106.5±5.3)、(122.6±4.8)mmol/L,KIM-1水平分别为(8.48±0.31)、(9.29±0.18)、(9.88±0.17)、(10.74±0.45)ng/L,MB组的LA水平分别为(74.7±3.4)、(84.7±2.4)、(94.8±2.6)、(106.8±5.2)mmol/L,KIM-1水平分别为(7.53±0.32)、(8.60±0.34)、(9.41±0.31)、(10.04±0.09)ng/L,MB组LA、KIM-1水平较NS组明显降低(P＜0.05).结论 创伤性休克可致兔肾功能损害,亚甲蓝能显著改善休克后兔肾功能.     

贝前列腺素钠对梗阻性肾病再通大鼠的疗效及机制研究

目的:研究贝前列腺素钠对梗阻性肾病再通大鼠的保护作用及机制。方法:通过单侧输尿管结扎手术建立梗阻性肾病大鼠模型,将大鼠分为假手术组、模型组和贝前列腺素钠治疗组三组,术后第15天处死大鼠,收集血清检测肌酐、尿素氮、血钠和血钾的水平,苏木精-伊红(HE)染色评价肾组织损伤程度,Western blot检测大鼠肾组织肾损伤分子1(KIM-1)、缺氧诱导因子α(HIF-α)和转化生长因子β(TGF-β)蛋白表达水平。结果:模型组大鼠血清肌酐、尿素氮和血钾的含量显著高于假手术组,血钠的含量显著低于假手术组(P0.05)。贝前列腺素钠治疗组大鼠血清肌酐、尿素氮和血钾的含量显著低于模型组,血钠的含量显著高于模型组(P0.05)。HE染色结果显示,与模型组比较,贝前列腺素钠治疗组的肾组织损伤程度显著降低。Western blot检测结果显示,与模型组比较,贝前列腺素钠治疗组的肾组织KIM-1、HIF-α和TGF-β蛋白表达水平显著降低。结论:贝前列腺素钠能够改善梗阻性肾病梗阻解除后的肾损伤,抑制肾脏中TGF-β、HIF-α和KIM-1的表达。     

重组人红细胞生成素对脓毒症大鼠肾脏的保护作用

目的 探讨重组人红细胞生成素(rHuEPO)对盲肠结扎穿孔术(CLP)所致大鼠脓毒症急性肾损伤(AKI)的保护作用.方法 260只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假CLP组(假手术组)、CLP组(脓毒症组)和rHuEPO大、中、小剂量组.采用CLP复制脓毒症模型,rHuEPO大、中、小剂量组造模后即刻分别静脉推注rHuEPO 5000 U/kg、1000 U/kg、500 U/kg.假CLP组、CLP组、rHuEPO大、中、小剂量组按注药后2h、6h、12 h、24 h、36 h时点分成5个亚组,分别在各时点按随机原则处死大鼠.采用ELISA法测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、肾损伤分子1(KIM-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的水平;免疫组化法检测大鼠肾组织NF-κB蛋白表达;光镜和透射电镜观察肾组织形态学变化.结果 与CLP组相比,rHuEPO大剂量组大鼠各时间点血清Scr、BUN、TNF-α、IL-6、KIM-1、iNOS的含量及肾组织NF-κB蛋白表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);肾脏病理改变好转.rHuEPO中、小剂量组肾脏病理改变未见好转.结论 rHuEPO能够降低脓毒症大鼠血清TNF-α、IL-6、iNOS、KIM-1水平进而调节炎性反应及肾功能,对脓毒症所致AKI具有一定的保护作用.     

尿NGAL、KIM-1联合APACHEⅡ评分预测脓毒症并发急性肾损伤患者预后的价值

目的探讨尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子-1(KIM-1)联合急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分预测脓毒症急性肾损伤(AKI)患者预后的价值。方法选取海南西部中心医院收治的脓毒症并发AKI患者108例,根据其是否死亡分为存活组(n=72)和死亡组(n=36)。采用酶联免疫吸附法测定各组尿NGAL、KIM-1水平,并记录其APACHEⅡ评分。应用受试者工作特征(ROC)曲线评价尿NGAL、KIM-1及APACHEⅡ评分对脓毒症并发AKI患者预后的价值。结果死亡组尿NGAL(970.2±705.2 ng/mLvs 612.5±415.4 ng/mL)、KIM-1[(62.6±12.4) ng/L vs(28.8±7.2) ng/L]及APACHEⅡ评分[(26.8±8.3)分vs(17.90±6.20)分]均明显高于存活组(P0.05)。ROC曲线分析显示,尿NGAL、KIM-1及APACHEⅡ评分预测AKI患者死亡的最佳截取值分别为805.26 ng/mL、50.35 ng/L、23.90分,三者联合预测脓毒症并发AKI患者死亡的曲线下面积(0.937,95%CI 0.885～0.987)、敏感度(96.3%)和特异度(88.0%)较高。结论尿NGAL、KIM-1及APACHEⅡ评分三者联合检测在评估脓毒症并发AKI患者死亡时具有良好的预测价值,可提高脓毒症并发AKI患者预后评估的准确性。     

老年活体亲属供肾移植的安全性分析

目的 探讨老年活体亲属供肾移植供体、受体的围手术期并发症、疗效及安全性.方法 亲属活体供肾移植132例,分为老年供体组(≥55岁,43例)和中青年供体组(＜55岁,89例);对供受体的住院时间、手术前后血肌酐(SCr)、内生肌酐清除率(CCr)、肾小球滤过率(GFR)、并发症以及受体的急性排斥反应率、人/肾存活率等进行比较分析.结果 2组供者术前SCr分别为(77.67±15.21)、(83.09±15.98)μmol/L,术后7 d分别为(109.54±22.32)、(106.56±23.46)μmol/L,均在正常范围内,2组间各时间点比较差异均无统计学意义(P值均＞0.05).术后3个月2组供者SCr分别为(112.57±20.87)、(104.29±19.43)μmol/L,与术前比较分别上升44.93%和25.51%,老年供体组比中青年供体组供者scr升高更明显.差异有统计学意义(P=0.0268).2组术前CCr分别为(1.63±0.34)、(1.56±0.25)ml/s,术后10 d分别为(0.83±0.29)、(1.11±0.27)ml/s.老年供体组术后3个月CCr为(0.97±0.10)ml/s,中青年供体组为(1.16±0.17)ml/s.2组手术前后CCr变化差异无统计学意义(P＞0.05).老年供体组术后10 d的留存肾GFR为(36.58±13.26)ml/min,术后3个月增加至(52.31±12.74)ml/min,达到原双肾GFR[(73.01±20.96)ml/min]的71.65%.中青年供体组术后10 d GFR为(38.32±10.79)ml/min,术后3个月增至(56.31±12.95)m1/min,达到原双肾GFR[(78.34±20.98)ml/min]的71.88%.手术前后GFR变化差异均无统计学意义,P值均＞0.05.供者手术并发症包括术中脾脏包膜下血肿1例、降结肠破裂1例和切口脂肪液化5例.术前和术后各时间点2组受者SCr水平差异无统计学意义(P值均＞0.05).2组供者平均住院时间分别为(13.2±3.4)和(12.8±2.6)d,P=0.4563.2组受者平均住院时间分别为(23.1±11.9)和(22.3士11.4)d,P=0.6991.老年供体组受者6个月内急性排斥反应发生率为4.7%(2/43),中青年供体组为7.9%(7/89).术后1年内2组各死亡1例,中青年供体组因急性排斥反应移植肾失功1例.结论 老年活体亲属供肾可能存在一定危险性,应予以重视,但供体年龄并非独立风险因素.在严格控制老年供者的纳入标准、对供者进行全面系统评估的情况下,老年供体活体肾移植的供体和受体围手术期并发症/疗效及安全性与中青年供体比较无明显差异.     

银杏内酯对急性肾损伤大鼠的保护作用及机制研究

目的探讨银杏内酯对急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)大鼠的保护作用及对肾组织中腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)及沉默信息调节因子(silent information regulator 1,SIRT1)通路的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组(Control组)、AKI组和银杏内酯低(2.5 mg/kg)、中(5 mg/kg)、高(7.5 mg/kg)剂量组,每组10只。除Control组经皮下注射生理盐水外,其余各组大鼠均经皮下注射庆大霉素80 mg/kg,6 d,1次/d,建立AKI模型后,Control组、AKI组经腹腔给予生理盐水,银杏内酯各剂量组经腹腔给予相应剂量药物,1次/d,共给药14 d。末次给药1 h后,收集各组大鼠血液、尿液后处死大鼠,取肾组织标本,用酶联免疫吸附法检测肾功能指标血清肌酐(Scr)、血清尿素氮(BUN)、血清炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及尿液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤因子1(KIM-1)含量;用苏木精-伊红染色(HE)检测各组大鼠肾组织病理变化;以试剂盒检测肾组织氧化应激反应物超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;凝胶电泳迁移率转变分析法检测肾脏组织NF-κB活性;蛋白免疫印迹法检测肾组织pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达情况。结果与Control组相比,AKI组大鼠可见肾小管上皮细胞崩解脱落、空泡变性等病理损伤,Scr、BUN、NGAL、KIM-1含量、肾组织TNF-α、IL-6、MDA含量及NF-κB活性均明显升高(P0.05),肾组织SOD活性、pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达量明显下降(P0.05)。与AKI组相比,银杏内酯高、中、低剂量组肾小管病理损伤减轻,Scr、BUN、NGAL、KIM-1、TNF-α、IL-6、MDA含量及NF-κB活性均明显降低(P0.05),SOD活性、pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达量明显升高(P0.05)。与银杏内酯低剂量组比较,中、高剂量组肾小管病理损伤减轻,Scr、BUN、NGAL、KIM-1、TNF-α、IL-6、MDA含量及NF-κB活性均明显降低(P0.05),SOD活性、pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达量明显升高(P0.05)。结论银杏内酯可能通过激活AMPK/SIRT1通路,减轻肾脏氧化应激和炎性损伤,改善AKI大鼠病理损伤。     

The Source Matters: No Impact of the CCL2/MCP-1-1-2518G Polymorphism of the Donor on Renal Allograft Outcome During the First Year After Transplantation

Chemokines are involved in the recruitment of inflammatory cells to vascularized allografts. The chemokine CCL2/MCP-1 is expressed during allograft dysfunction, which is associated with the recruitment of inflammatory cells. Both intrinsic renal cells (donor origin) as well as infiltrating inflammatory cells (recipient origin) can be a source of CCL2/MCP-1. We previously demonstrated that the recipient MCP-1-2518G polymorphism is associated with increased CCL2/MCP-1 production by inflammatory cells and decreased renal allograft survival. We evaluated the impact of the MCP-1-2518G polymorphism in donor cells on renal allograft outcomes. We enrolled 252 recipients of kidney allografts in this retrospective study who had received grafts from 152 cadaveric donors. The CCL2/MCP-1 genotype was assessed using genomic DNA isolated from cryopreserved donor splenocytes. Outcome parameters studied were acute biopsy proven rejection (Banff criteria), serum creatinine, and glomerular filtration rate (GFR) at 1 year after transplantation, allograft loss, and death. MCP-1-2518 genotypes were in HW equilibrium. A/A was present in 125 (49.6%), A/G in 107 (42.5%), and G/G in 20 (7.9%) donor kidneys. There were no significant differences in the number of rejection episodes, the number of allograft losses, serum creatinine, GFR, or overall survival 1 year after transplantation. In contrast with the detrimental effect of the CCL2/MCP-1 polymorphism of the recipient, the CCL2/MCP-1 polymorphism of the donor has no impact on the allograft outcome during the first year after transplantation. The impact on the long-term outcomes needs further evaluation.     

婴儿双供肾成人肾移植的改良简化术式四例

目的总结婴儿双供肾成人肾移植的改良简化术式的手术方式及临床效果。方法总结山西省第二人民医院肾移植透析中心2017年1月至2019年9月采用改良简化术式进行的4例婴儿双供肾成人肾移植资料。4例均为心死亡供者,男性3例,女性1例,年龄(54±22.69)d,体重为(5.6±0.79)kg。受者中男性1例,女性3例,年龄(41.5±5.97)岁,体重(45±3.56)kg。俢肾过程中将双侧供肾缝合固定,使双肾位置相对固定,行供肾腹主动脉瓣-受者髂外动脉、供肾下腔静脉瓣-受者髂外静脉端侧吻合,以降低手术难度、避免血流动力学紊乱。结果4例手术过程均顺利,供肾修整平均历时20 min,移植手术平均历时68.75 min。未出现血管及泌尿系统并发症,随访12个月移植肾功能恢复良好,受者及移植肾远期存活满意。结论改良简化婴儿双供肾成人整块肾移植优化了手术方式,操作简便且降低血管并发症,提高手术成功率,值得在临床实践中推广应用。     

肾动脉内套法建立大鼠肾移植模型

目的探索一种操作简单、成功率高的建立大鼠肾移植模型的手术方法。方法选择SD大鼠24只作为供体,Wistar大鼠48只作为受体,采用。肾动脉内套法建立大鼠。肾移植模型。所有受体大鼠均接受左侧原位肾移植,自体右肾切除。受体大鼠动脉重建借助自制动脉套管将受体肾动脉内套人供肾动脉,缝线固定及3点外膜加固行肾动脉重建,受体肾静脉与供体后腔静脉借助自制导管行端一端吻合,尿路改建采用供体输尿管膀胱瓣与受体膀胱吻合。结果研究共实施48例大鼠肾移植术。24只供体大鼠平均手术时间（354±6）min,供肾修整时间（3．9±1．2）rain,供肾热缺血时间（5．7±1．5）s,冷缺血时间（52±6）rain。48只受体大鼠手术时间（39±6）min,动脉吻合时间（6．9±2．5）min,静脉吻合时间（14．2±2．3）min,尿路重建时间（6．6±1．1）min。术后3d内,2只大鼠因血管吻合口出血死亡,2只因移植肾动脉内血栓形成死亡,1只因尿瘘致腹膜炎死亡,其余43只大鼠均获手术成功,成功率89．6％。截至术后14d,共7只受体大鼠存活,所有受体大鼠中位存活时间6d10结论肾动脉内套法操作简单,受体大鼠成功率高,初学者掌握快,易于推广。     

Living donor kidney transplantation in catalonia: comparison with cadaveric kidney donors

INTRODUCTION: We studied the renal transplantation results of living donor compared with cadaveric donor kidney transplantations. PATIENTS AND METHODS: One hundred thirty-six living donor transplantations performed during the period of 1990 to 2003 (group 1) were compared with a control group of 4304 cadaveric donor transplantations (group 2), paired 1:1 with group 1 patients, according to the period of transplantation, the primary renal disease, the transplant number, as well as the recipient and donor ages. RESULTS: There were no differences regarding patient or graft survival during a 10-year follow-up. CONCLUSIONS: The benefit of performing living donor kidney transplantations is the possibility of having the donor available even before beginning dialysis treatment.     

夫妻活体供肾移植的相关问题分析

目的 探讨夫妻供肾移植的临床效果及安全性.方法63例活体供肾移植供者分夫妻供肾组(n=12)和亲属供肾组(n=51)2组.总结夫妻活体供肾肾移植的临床资料,并与同期基础条件相近、免疫抑制剂方案相同、基因相关亲属供肾组的临床资料进行对比.观察指标选择平均住院时间、急性肾小管坏死发生率、1年内急性排斥反应发生率和移植后7、30 d和1年血肌酐(SCr)水平.结果 夫妻供肾组和亲属供肾组受者年龄分别为(39±3)和(37±3)岁,P=0.05;透析时间分别为(4.7±3.2)和(4.4±2.9)个月,P=0.78;平均住院时间分别为(20.9±8.3)和(23.0±7.8)d,P=0.41.2组1年内急性排斥反应发生率分别为33.3%4/12),3.9%(2/51),P=0.01.急性肾小管坏死发生率分别为16.7%(2/12),3.9%(2/51)(P=0.31).夫妻供肾组术后7、30 d SCr值分别为(206.47±47.22)和(163.75±25.91)μmol/L,亲属供肾组分别为(142.79±89.42)和(119.99±15.03)μmol/L,P=0.02,P=0.00.术后1年夫妻供肾组获随访9例,亲属供肾组40例;SCr分别为(133.40±6.11)和(121.00±34.12)μmol/L,P=0.25.结论 术前对夫妻供、受者进行全面综合评估是夫妻供肾移植成功的保证.夫妻供肾移植的近期急性排斥反应发生率略高于亲属活体供肾移植,但术后1年夫妻供肾移植受者的移植肾功能与亲属活体供移植受者比较并无区别.     

Effects of KIM-1 on high glucose induced the expression of MCP-1 and FN in rat tubular epithelial cells

Objective To evaluate the effects of KIM-1 on high glucose induced the expression of MCP-1 and FN in rat tubular epithelial cells and to explore the possible mechanisms of KIM-1 involved in renal interstitial fibrosis of DN. Methods The rat renal tubular epithelial cells (NRK52E) were cultured in vitro and divided into five groups: Normal control group (D-glucose 5.6 mmol/L), Hypertonic group (D-glucose 5.6 mmol/L＋D-mannitol 24.4 mmol/L), High glucose group (D-glucose 30 mmol/L), Control siRNA group,KIM-1 siRNA group. ELISA assay was used to assess the levels of MCP-1 and FN in the cells supernatant; Western blotting was used to detect the protein expression of KIM-1; RT-PCR was used to detect mRNA expression of KIM-1, MCP-1 and FN. Results Compared with the control group, the protein and mRNA expression of KIM-1 in the high glucose group were increased at 12 h (P＜0.05), and reached the peak at 48 h (P＜0.05); the protein and mRNA expression of MCP-1 and FN in high glucose group were increased at 24 h significantly (P＜0.05), and peaked at 48 h (P＜0.05). Compared with the high glucose group, the protein and mRNA expressions of MCP-1 and FN in KIM-1 siRNA group were decreased (P＜0.05). Conclusions Down-regulating the expression of KIM-1 can significantly inhibit the expression of MCP-1 and FN, which suggests that KIM-1 may be involved in renal interstitial fibrosis of DN by regulating expression of MCP-1 and FN.     

促红细胞生成素对大鼠移植肾缺血-再灌注损伤的防护作用

目的探讨促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）对大鼠移植肾缺血-再灌注损伤（ischemia—reperfusion injury,IRI）的保护作用。方法采用BN大鼠和Lewis大鼠,分别随机分为实验组和对照组,每组各15只。BN大鼠作为供体,Lewis大鼠为受体,建立单侧原位大鼠肾移植模型。实验组受体大鼠术后立即腹腔注射重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）1000U／kg,对照组大鼠同样予腹腔注射等量生理盐水。两组受体大鼠在术后5d剪尾取血,检测血清肌酐（Scr）水平。同时将移植肾取出,肾组织行病理切片苏木素-伊红（HE）染色、过碘酸-雪夫（periodic acid Schiff,PAS）染色、马松（Masson）染色和过碘酸六胺银（periodic acid—silver methenamine,PASM）染色,观察肾组织病理学改变情况。结果实验组受体大鼠术后Scr水平为（102±3）μmol／L,对照组为（369±7）μmol／L,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。两组受体大鼠移植肾均出现肾小管坏死改变。对照组移植肾组织病理切片主要表现为大片肾组织坏死,提示出现严重的急性排斥反应、肾小管坏死及动脉损伤;实验组肾组织病理切片主要表现为肾被膜下小灶性肾组织凝固性坏死;与对照组相比,实验组肾组织坏死面积较小,提示急性排斥反应程度较轻。结论肾移植术后早期使用EPO进行预处理可抑制肾脏IRI炎症反应,减少细胞凋亡,缓解移植后IRI。     

改良输尿管置入膀胱尿路重建法建立小鼠肾移植模型

目的探讨小鼠肾移植术中输尿管膀胱置入的改良方法。方法30对BALB/c小鼠同品系间行肾移植术,供肾均为左肾,应用双套管法建立供肾血液循环,由传统的先置入后固定包埋的方法,改良为先固定,再置入,最后包埋的方法,记录手术时间、存活率及并发症发生情况。结果供肾血管分离、灌注、切除时间(25±6)min,热缺血时间(10±6)s,冷缺血时间(25±5)min。受体手术:动静脉分离时间(12±5)min,静脉套置时间(7±1)min,动脉套置时间(7±1)min,输尿管膀胱吻合时间(13±2)min,切除右肾时间(5±1)min,关腹(5±1)min。总手术时间(77±3)min。成功建立26例移植模型,手术成功率86.7%(26/30)。结论改良后的输尿管置入膀胱尿路吻合术更简单快捷,小鼠肾移植术后尿路并发症发生率低,更有利于初学者掌握。     

Kidney Injury Molecule-1 is an Early Noninvasive Indicator for Donor Brain Death-Induced Injury Prior to Kidney Transplantation

With more marginal deceased donors affecting graft viability, there is a need for specific parameters to assess kidney graft quality at the time of organ procurement in the deceased donor. Recently, kidney injury molecule-1 (Kim-1) was described as an early biomarker of renal proximal tubular damage. We assessed Kim-1 in a small animal brain death model as an early and noninvasive marker for donor-derived injury related to brain death and its sequelae, with subsequent confirmation in human donors.
In rat kidney, real-time PCR revealed a 46-fold Kim-1 gene upregulation after 4 h of brain death. In situ hybridization showed proximal tubular Kim-1 localization, which was confirmed by immunohistochemistry. Also, Luminex assay showed a 6.6-fold Kim-1 rise in urine after 4 h of brain death. In human donors, 2.5-fold kidney injury molecule-1 (KIM-1) gene upregulation and 2-fold higher urine levels were found in donation after brain death (DBD) donors compared to living kidney donors. Multiple regression analysis showed that urinary KIM-1 at brain death diagnosis was a positive predictor of recipient serum creatinine, 14 days (p < 0.001) and 1 year (p < 0.05) after kidney transplantation.
In conclusion, we think that Kim-1 is a promising novel marker for the early, organ specific and noninvasive detection of brain death-induced donor kidney damage.     

大鼠肾移植模型手术改良技巧探讨

目的探讨大鼠肾移植模型手术的改良方法。方法供体Sprague-Dawley(SD)大鼠21只,受体Wistar大鼠42只。采用双侧供肾。受体左肾切除后借助自制导管,行受体肾动脉与供体肾动脉、受体肾静脉与供体下腔静脉端端吻合,供体输尿管带膀胱瓣与受体膀胱吻合,最后切除右肾,腹腔内注入头孢米诺10 mg,关腹。记录手术时间,动、静脉吻合时间,冷、热缺血时间等手术数据;术后大鼠存活3 d认为模型建立成功,计算建模成功率,分析死亡原因。结果供体手术时间为(32.7±5.6)min,供肾修整时间为(4.2±1.1)min。受体手术时间为(42.3±4.9)min,其中动脉吻合时间为(10.1±3.2)min,静脉吻合时间为(13.9±2.5)min,尿路重建时间为(6.3±1.4)min。热缺血时间为(5.4±1.8)s,冷缺血时间为(56.2±7.3)min。42只受体大鼠中,建模成功40只,成功率为95%。另2只受体大鼠死亡,其中1只死于血管吻合口出血,1只死于尿瘘引致的腹膜炎。结论采用改良的血管端端吻合法建立大鼠肾移植模型具有操作简单、手术时间短、成功率高的特点。