电针气海、中极、关元穴改善压力性尿失禁尿道括约肌线粒体损伤机制研究

目的:观察电针对压力性尿失禁(SUI)环境下尿控的影响,并基于线粒体动力学探讨相关作用机制。方法:对SD大鼠进行随机分组,空白组未采取任何处理,假手术组完成手术解剖未干预,模型组行双侧卵巢切除+阴道扩张,假针组予非穴位电针,电针组进行穴位电针。尿动力学仪测量各组大鼠的最大膀胱容量(MBC)和腹腔漏尿点压力(ALPP)和漏尿点压力(LPP);HE染色观察尿道括约肌肌纤维形态改变;ELISA试剂盒检测线粒体膜电位、ATP和氧化应激相关指标;电镜观察尿道括约肌线粒体形态;Western blot检测尿道括约肌线粒体动力学相关因子线粒体融合素1(Mfn1)、Mfn2、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂因子(MFF)、沉默信息调节因子1(SIRT1)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠尿控指标MBC、ALPP和LPP显著降低(均P<0.05),尿道括约肌纤维断裂、排列紊乱,线粒体明显肿胀,嵴增宽;线粒体膜电位、ATP、琥珀酸脱氢酶(SDH)和超氧化物歧化酶(SOD)水平显著降低(均P<0.05),丙二醛(M...     

基于倾向性评分法探讨金水相生方对晚期前列腺癌临床结局的影响

目的 探讨金水相生方对晚期前列腺癌患者5年生存率临床结局的影响及相关影响因素分析。方法 采集2014年5月1日至2016年5月1日上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院和江苏省第二中医院泌尿外科门诊和病房收治的符合晚期前列腺癌并使用金水相生方辅助治疗的患者（观察组，155例），并根据患者年龄及Gleason评分同期采用倾向性评分法按1∶1的比例匹配未使用金水相生方的患者（对照组，155例）。观察各组患者1、3、5年雄激素抵抗率、生存率和中位生存期及中位无进展生存期，并通过卡方检验、t检验、Kaplan-Meier和Cox生存分析，分析筛选晚期前列腺癌预后因素。结果 观察组1、3、5年雄激素抵抗率分别为9.0%（14/155）、72.3%（112/155）、92.9%（144/155），对照组1、3、5年雄激素抵抗率分别为20.6%（32/155）、87.7%（136/155）、97.4%（151/155），观察组1年（χ²=8.271，P<0.01）、3年（χ²=11.613，P<0.01）雄激素抵抗率显著低于对照组；观察组中位生存期和中位无进展生存期分别为（26.35±9.01）个月和（11.02±4.40）个月，对照组中位生存期和中位无进展生存期分别为（22.31±9.21）个月和（9.87±5.12）个月，与对照组比较，观察组中位生存期和中位无进展生存期显著延长，差异均具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）；观察组1、3、5年累计生存率分别为96.1%（149/155）、80.6%（125/155）、39.4%（61/155）；对照组1、3、5年累计生存率分别为94.2%（146/155）、60.0%（93/155）、22.6%（35/155），观察组3年（χ²=15.828，P<0.01）、5年（χ²=10.201，P<0.01）累计生存率显著高于对照组。单因素分析结果显示，Gleason评分、初始前列腺特异性抗原（PSA）、肿瘤发生部位、肿瘤分期、去势方案、放疗、化疗、全雄阻断治疗、金水相生方为预后相关因素（P<0.05，P<0.01）；多因素分析结果显示，初始PSA、肿瘤部位、肿瘤分期为影响晚期前列腺癌患者生存时间的独立危险因素，而金水相生方、去势方案、化疗、放疗与全雄阻断是影响晚期前列腺癌预后的独立保护因素。结论 金水相生方对晚期前列腺癌患者的生存有保护作用，可降低晚期前列腺癌雄激素抵抗率和死亡风险，使患者生存获益，值得进一步推广。     

MYBL2在前列腺癌患者组织中高表达并与不良预后相关

目的 探索骨髓母细胞增生症病毒癌基因同源物样2(MYBL2)基因对前列腺癌（PCa）患者临床预后和生物学行为的影响。方法 采用qRT-PCR检测MYBL2在45例PCa与癌旁前列腺组织的表达水平,根据MYBL2表达中位数,分为高（23例）低（22例）表达,采用非参数检验、Kaplan-Meier、单因素和多因素Cox法,并分析MYBL2高低表达与PCa的临床病理特征及预后相关性,利用癌症基因组图谱（TCGA）基因芯片数据库PCa数据集进行验证。基因集富集分析（GSEA）MYBL2高低表达可能参与调控的分子通路,CIBERSORT算法研究MYBL2与肿瘤免疫微环境的相关性。最后,体内实验中,通过建立阴性对照组（shCtrl）、敲减MYBL2组（sh-MYBL2）用细胞增殖毒性检测试剂盒（CCK8）和Transwell法检测各组细胞增殖和侵袭能力。qRT-PCR和Western blotting检测肿瘤细胞中MYBL2基因和蛋白的表达。在体内实验中,检测2组荷瘤小鼠瘤重和免疫组织化学方法观察荷瘤组织Ki-67的表达水平。结果 两组数据均显示：MYBL2在PCa组织中高表达,与Gleason...     

彭培初分段论治晚期前列腺癌经验撷英

介绍彭培初教授分段论治晚期前列腺癌的临床经验。认为针对本病雄激素依赖阶段"金水不足"及雄激素抵抗阶段"阴损及阳"的主要病机,须相应予以"金水相生,虚则补其母"及"温补肾阳,通调三焦"治法,并附相应基本方与加减用药。另举验案2则。     

龙附颗粒对慢性前列腺炎模型大鼠前列腺组织细胞因子IL-10和TNF-α表达的影响

目的:通过观察龙附颗粒对慢性前列腺炎(chronic abacterial prostatitis,CAP)模型大鼠前列腺组织细胞因子白细胞介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将48只wistar大鼠随机分为正常对照组、CAP模型组、舍尼通组(0.125 g·kg-1)、龙附颗粒低剂量组(0.37 g·kg-1)、龙附颗粒中剂量组(0.74 g·kg-1)、龙附颗粒高剂量组(1.48 g·kg-1),每组8只。通过HE染色法观察各组大鼠前列腺组织形态学的差异,运用Elisa法检测各组前列腺组织中IL-10及TNF-α的差异。结果:(1)CAP模型组前列腺组织中IL-10和TNF-α的表达高于正常对照组(P0.05),经药物治疗后,舍尼通组、龙附颗粒中高剂量组IL-10表达升高、TNF-α表达降低(P0.05),而龙附颗粒低剂量组与CAP模型组比较,无显著性差异。(2)舍尼通组、龙附颗粒中高剂量组与CAP模型组比较,腺泡内上皮细胞增生程度改善,腺泡内炎性细胞减少,间质内纤维组织增生程度改善,炎性细胞减少。龙附颗粒低剂量组:与CAP模型组的病理形态表现接近。结论:龙附颗粒能够调节慢性前列腺炎模型大鼠前列腺组织中细胞因子IL-10和TNF-α的表达,进一步影响前列腺病理形态学变化,其作用机制与调节机体免疫炎症反应有关。     

重楼皂苷Ⅶ调控ROS诱导膀胱癌细胞凋亡和自噬

<正>膀胱癌(bladder cancer,BC)是世界上最常见的一种泌尿生殖系统恶性肿瘤^[1]。目前,BC的治疗包括根治性膀胱切除术、放疗和化疗。然而,约有5%的患者在诊断时有远处转移。晚期或转移性BC的治愈效果差、预后差,接受一线铂类化疗的患者1年总生存率仅为36%^[2]。因此,迫切需要有效抑制BC而又有较低毒副作用的药物。重楼皂苷Ⅶ(paris saponinⅦ,PSII)是一种从传统中草药延龄草中分离出来的甾体皂苷,已经成为了一种潜在的抗癌剂。PSII通过抑制小鼠肺腺癌的基质金属酶来抑制肺癌转移,激活caspase-2和线粒体的功能障碍诱导HT-29细胞的凋亡^[3-4]。然而,目前PSII对BC发生的影响及其内在机制仍不清楚。在这项研究中,我们的目的为探究PSII在体     

王不留行黄酮苷通过NLRP3/Caspase-1 信号通路抑制ox-LDL诱导的细胞焦亡

[目的] 探讨王不留行黄酮苷对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)损伤的保护作用及作用机制。[方法] 以ox-LDL(100 μg·mL-1)刺激HUVECs建立模型。采用细胞增殖活性检测(cell counting kit-8，CCK-8)法检测1～10 μmol·L-1王不留行黄酮苷对ox-LDL诱导的HUVECs的保护作用；采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)法检测LDH的释放；采用Annexin Ⅴ-FITC/碘化丙啶(propidium iodide，PI)凋亡试剂盒检测细胞凋亡；使用2’，7’-二氯荧光素二乙酸酯(2’，7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate，DCFD-A)荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平；采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction，Real-time PCR)检测白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattracctant protein-1，MCP-1)、人血管内皮细胞黏附分子-1(human vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1)的mRNA表达；采用免疫印迹法检测B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bcl-2 associated X protein，Bax)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3，NLRP3)、胱天蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1，caspase-1)、裂解的胱天蛋白酶-1(cleaved caspase-1)、IL-1β和IL-18的蛋白表达。[结果] 1～10 μg·mL -1王不留行黄酮苷减轻100 μg·mL-1的ox-LDL诱导的HUVECs损伤(P<0.05，P<0.01)。王不留行黄酮苷减轻ox-LDL诱导的LDH释放，减少细胞凋亡，同时促进Bcl-2蛋白表达，抑制Bax蛋白表达(P<0.01)。王不留行黄酮苷显著减少了ox-LDL诱导的ROS生成，抑制ox-LDL诱导的炎症因子IL-6、MCP-1和VCAM-1的水平(P<0.01)。王不留行黄酮苷抑制了ox-LDL诱导的NLRP3炎症小体介导的焦亡相关蛋白表达(P<0.05，P<0.01)。[结论] 王不留行黄酮苷能够减轻ox-LDL诱导的HUVECs凋亡，缓解炎症反应，其机制可能与NLRP3介导的焦亡有关。     

白花丹素调控Nrf-2/Keap1信号通路诱导膀胱癌细胞铁死亡

目的：探讨白花丹素作为一种新型的铁死亡诱导剂在膀胱癌抑制中的作用机制。方法：本研究中使用了膀胱癌细胞T24。采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测白花丹素(0.1、1、2、3、6、12、24、48μmol·L^-1)对T24细胞活力的影响。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V FITC/PI)凋亡试剂盒检测白花丹素(1.5、3、6μmol·L^-1)对T24细胞凋亡的影响。采用不同的抑制剂(铁死亡抑制剂Fer-1，凋亡抑制剂VAD，坏死性凋亡抑制剂Nec-1)与白花丹素(6μmol·L^-1)联合使用。采用活性氧荧光探针(DCFH-DA)，丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)试剂盒分别检测不同浓度的白花丹素(1.5、3、6μmol·L^-1)对T24细胞内活性氧水平，MDA和GSH的含量，脂质过氧化荧光探针(C11-BODIPY)荧光探针检测白花丹素(1.5、3、6μmol·L^-1)对T24细胞中过氧化物水平的影响。蛋白免疫印迹法(Western blo...