车前子不同炮制品抗大鼠膜性肾病的比较

目的:比较车前子生品和盐炙品水煎液抗大鼠膜性肾病的活性。方法:热回流法提取车前子不同炮制品;选用改良的Border法应用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)建立大鼠膜性肾病模型,在给药的第6周末检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)及血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),总蛋白(TP),尿素氮(BUN),肌酐(SCr)水平;采用电镜和光镜观察肾脏病理形态学变化,免疫组化法检测各组大鼠肾组织肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β,转化生长因子(TGF)-β1,核转录因子-κB(NF-κB)p65的表达情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠的尿蛋白、肾指数、血清生化指标、肾脏免疫调节因子具有极显著差异(P0.01),肾脏病理形态变化明显;与模型组比较,贝那普利组、盐炙品3个剂量组和生品高剂量组均可显著降低模型大鼠尿蛋白、肾指数(P0.05,P0.01),使血清生化指标呈显著差异(P0.05,P0.01),病理形态结果显示,大鼠肾脏病变有明显的改善,4种细胞因子表达显著降低(P0.01,P0.05);与生品高剂量组比较,贝那普利组和盐炙品高、中剂量组尿蛋白量显著降低(P0.05,P0.01),贝那普利组和盐炙品高剂量组肾指数显著降低(P0.05),贝那普利组、盐炙品高、中剂量组血清中BUN,SCr,TC,TG的含量显著低于生品高剂量组(P0.05,P0.01),低剂量组仅BUN显著低于生品高剂量组(P0.05),贝那普利组、盐炙品高、中剂量组血清中TP显著升高(P0.05),贝那普利组对肾脏4种免疫调节因子的表达显著降低(P0.01),盐炙品3个剂量组中TNF-α,IL-1β的积分吸光度(IA)显著降低(P0.01),盐炙品高剂量组TGF-β1,NF-κB p65的IA表达显著低于生品高剂量组(P0.05,P0.01)。结论:车前子盐炙品对膜性肾病大鼠的肾保护作用和对肾脏中免疫调节因子的调节作用均优于生品,可继续深入车前子盐炙品的物质基础和药效机制研究。     

一种车前子多糖的分离纯化及单糖组成分析

目的:分离纯化车前子多糖,分析车前子均一多糖的单糖组成。方法:采用阴阳弱离子串联树脂柱脱蛋白和初步分离,DEAE Cellulose DE-52和Sephacryl S-400柱色谱分离纯化得车前子均一多糖(PP-B10),利用紫外-可见吸收光谱、红外光谱和高效体积排阻色谱(HPSEC)分析PP-B10的结构特性和纯度,柱前衍生-HPLC法确定PP-B10的单糖组成。结果:PPB10纯度较高,含有少量蛋白,由甘露糖、核糖、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖7种单糖组成,其物质的量比为147.2∶3.2∶22.5∶4.8∶1.1∶95.7∶28.8的酸性多糖。结论:PP-B10是一种全新单糖组成的车前子均一多糖。     

车前子多糖治疗大鼠膜性肾病的实验探讨

目的:观察车前子多糖对大鼠膜性肾病的治疗作用。方法:成年雄性SD大鼠40只,随机平均分为模型组,车前子多糖组(800 mg·kg-1),雷公藤多苷组(10 mg·kg-1)以及正常组,除正常组外,其余各组以阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)造成大鼠膜性肾病模型,分别于实验前、实验第3,5,7周末测定24 h尿蛋白;实验结束时测定血清中尿素氮(BUN),血清肌酐(SCr),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平及肾指数,苏木素-伊红(HE)染色观察其肾脏病理改变。结果:与正常组比较,模型组尿蛋白,血清中BUN,SCr,TNF-α,IL-1β的表达水平以及肾指数明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,车前子多糖可降低尿蛋白和血清中BUN,SCr,TNF-α,IL-1β的水平(P0.05,P0.01),对降低肾指数作用不明显;光镜检查结果显示车前子多糖能明显改善大鼠肾脏的病理变化。结论:车前子多糖对膜性肾病大鼠具有一定的治疗作用。     

车前子多糖PSP-B9的结构及抑制RAW264.7产生NO活性研究

目的:从车前子中分离纯化得到均一多糖(PSP-B9),并研究其化学结构特征及抗炎活性。方法:采用水提醇沉法获得车前子粗多糖,通过阴阳离子交换树脂、离子交换琼脂糖凝胶等柱层析对其进行分离纯化,得PSP-B9;采用高效液相色谱法(HPLC)测定纯度和相对分子质量(M),利用单糖组成分析、部分酸水解等化学方法和UV、傅氏转换红外线光谱(FTIR)等光谱方法分析PSP-B9结构特征,扫描式电子显微镜(SEM)和原子力显微镜(AFM)等方法考察形貌及分子形态;通过体外实验法观察PSP-B9对细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264. 7炎症模型的作用,对抗炎活性进行研究。结果:PSP-B9是纯度较好的车前子均一多糖,相对分子量为7. 69×105Da,由葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)、葡萄糖醛酸(GluA)、半乳糖醛酸(GalA)、阿拉伯糖(Ara)和岩藻糖(Fuc)组成,物质的量比为3. 21:9. 15:22. 1:10. 92:7. 5:17. 85:61. 35:35. 06;其主链由1,3,6-Man、1,4-Man、1,6-Gal、1,4-Araf、4-Araf、2,6-Gal等组成,1,6-Glc、1,4-Fuc、1,3,4-Rha等位于支链上,由1-Ribf、1-Glc和1-Fuc构成糖链的非还原性末端,是含有糖醛酸和少量蛋白的酸性多糖,分子形态为非晶态固体。PSP-B9能对LPS诱导的RAW264. 7细胞NO分泌有一定的抑制作用。结论:PSP-B9是一个单糖组成丰富,支链较多的结构复杂酸性多糖,具有一定抗炎活性。     

沙棘多糖的闪式提取工艺条件的优化

目的:确定沙棘中多糖的最佳闪式提取工艺。方法:采用闪式提取法提取和苯酚硫酸法进行含量测定,以沙棘多糖的得率为指标,以提取电压、提取时间、料液比为主要考察因素,采用正交试验法优选闪式提取沙棘多糖的最佳工艺,对比其与传统煎煮法的多糖提取率。结果:当提取电机电压为225 V,提取时间为110 s,固液比1∶30时,沙棘多糖的提取率最高,为9.43 mg/g,提取率高于传统煎煮法的8.84 mg/g。结论:闪式提取法适合于沙棘多糖的提取,该工艺具有方便、快速和高效的优点。