23例小儿先天性胆总管囊肿的围手术期护理体会

先天性胆总管囊肿是小儿外科常见的胆道畸形，囊肿切除胆道重建术作为先天性胆总管囊肿的标准术式已无争议。我院小儿外科1999年6月至2003年6月收治此类患儿23例，全部行手术治疗，疗效满意。现将护理配合及体会报道如下。     

IP-10基因在感染性肺疾病研究进展

干扰素诱导蛋白10(interferon inducible protein 10,IP-10)是CXC类趋化因子,其受体为CXCR3.IP-10在单核巨噬细胞、活化的成纤维细胞、内皮细胞、淋巴细胞等多种细胞表达.IP-10具有多种生物学功能,例如趋化炎症细胞,促进多种细胞释放炎症因子,抑制新血管生成,诱导细胞凋亡,抗病毒、抗肿瘤等作用.研究发现多种感染性肺疾病,如肺结核、严重急性呼吸综合征和高致病性禽流感等都会带来机体血清中IP-10含量的升高.近年研究表明IP-10基因转录调控在疾病的发生、发展中起关键作用,同时还可作为早期发现重症疾病的生物标记.本文围绕IP-10的基因结构、转录调控机制、生物学功能、与感染性肺疾病关系以及临床应用前景等几个方面作一简要介绍.     

基于细胞穿透肽Tat的Cre-Loxp重组酶系统的改造

目的：构建基于Tat细胞穿透肽和核定位信号NLS的重组酶Cre蛋白表达载体,引导Cre内化并人核实现细胞水平的基因敲除。方法：在带His标记的细胞穿透肽Tat和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）表达载体pET14b—SBP-Tat—EGFP基础上,利用酶切连接的方法将NLS—Cre片段插入带上述表达载体中,构建新的融合蛋白表达载体pET14b—SBP-Tat—NLS-cre-EGFP;经酶切、测序鉴定载体构建正确后,将重组质粒转化BL21（DE3）宿主菌,经异丙基硫代一争I）I半乳糖苷（IPTG）诱导表达后,用Ni^2＋亲和层析纯化得到融合蛋白;将融合蛋白透析、过滤除菌后加入到培养的cdc42基因两端带Loxp位点的C57小鼠腹腔巨噬细胞中,在Zeiss荧光显微镜下观察蛋白转导效率,并用Westernblot方法在蛋白水平检测并验证细胞水平目的基因敲除效果。结果：经酶切、基因测序证实重组载体构建成功,融合蛋白在大肠杆菌中可有效表达;Zeiss荧光显微镜下观察融合蛋白穿透细胞膜并进入细胞,细胞在经融合蛋白内化处理后目的基因蛋白的表达量与对照组没加Tat融合蛋白比较有明显降低。结论：利用Tat细胞穿透肽成功构建了基于细胞穿透肽的带有NLS-Cre的Tat蛋白表达运输载体,建立了可携带Cre进入细胞核进行基因敲除的系统,说明利用该系统可以实现细胞水平的基因敲除。     

脂多糖对人牙髓细胞增殖的影响

目的 研究脂多糖(LPS)对人牙髓细胞增殖的影响。方法 收集18～30岁因正畸减数而新鲜拔除的健康完整的第三磨牙，采用改良组织块培养法获得人牙髓干细胞(hDPSCs),流式细胞术鉴定hDPSCs表面标记，不同浓度LPS (0、20、40、80μg/mL)分别刺激hDPSCs 1～7 d, CCK-8法检测不同浓度LPS作用不同时间的hDPSCs的增殖能力。结果 流式细胞鉴定结果表明hDPSCs表面标记物CD29和CD90阳性率分别为99.9%和99.5%;而CD34与CD45仅为1.1%和0.03%,证实本实验提取培养的细胞符合hDPSCs的间充质来源。相较对照组而言，20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL LPS均可抑制牙髓干细胞增殖(P<0.05),且以80μg/mL LPS的抑制作用最强(P<0.05)。结论 长时间高浓度的LPS刺激可以抑制牙髓干细胞的增殖，LPS浓度越高，抑制作用越显著。