PTD-OD-HA融合蛋白对K562细胞中Bcr-Ab1的抑制作用观察

目的 探讨PTD-OD-HA融合蛋白转导K562细胞的动力学、定位及其与Bcr-Ab1定位的关系,以及对Bcr-Ab1寡聚化和Bcr-Ab1酪氨酸激酶活性的影响.方法 采用FITC标记PTD-OD-HA融合蛋白,观察蛋白转导K562细胞的效率与剂量和时间的关系,激光共聚焦显微镜检测融合蛋白在细胞内的定位,免疫共沉淀法检测融合蛋白与Bcr-Ab1的相互作用,Western blotting检测Bcr-Ab1的磷酸化水平.结果 PTD-OD-HA转导K562细胞呈剂量和时间依赖性.PTD-OD-HA定位于K562细胞胞质,与Bcr-Ab1共定位,且能与Bcr-Ab1蛋白相互作用,进而干扰Bcr-Ab1同源寡聚化,并可降低Bcr-Ab1的磷酸化水平.结论 在K562细胞中,PTD-OD-HA融合蛋白能有效抑制Bcr-Ab1同源寡聚化及磷酸化水平.     

PTD-OD-HA融合蛋白对K562细胞中Bcr-Ab1的抑制作用观察

目的探讨PTD-OD-HA融合蛋白转导K562细胞的动力学、定位及其与Bcr-Abl定位的关系,以及对Bcr-Abl寡聚化和Bcr-Abl酪氨酸激酶活性的影响。方法采用FITC标记PTD-OD-HA融合蛋白,观察蛋白转导K562细胞的效率与剂量和时间的关系,激光共聚焦显微镜检测融合蛋白在细胞内的定位,免疫共沉淀法检测融合蛋白与Bcr-Abl的相互作用,Western blotting检测Bcr-Abl的磷酸化水平。结果 PTD-OD-HA转导K562细胞呈剂量和时间依赖性。PTD-OD-HA定位于K562细胞胞质,与Bcr-Abl共定位,且能与Bcr-Abl蛋白相互作用,进而干扰Bcr-Abl同源寡聚化,并可降低Bcr-Abl的磷酸化水平。结论在K562细胞中,PTD-OD-HA融合蛋白能有效抑制Bcr-Abl同源寡聚化及磷酸化水平。     

HA-2FKBP-ABD融合蛋白的原核表达及与BCR-ABL的相互作用

摘要：目的：构建经原核表达和纯化的HA-2FKBP-ABD（HF-2A）融合蛋白,探讨HF-2A对BCR-ABL的靶向作用。 方法：用PCR扩增HF-2A片段,将HF-2A克隆入pET32a（+）原核表达载体,IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化HF-2A蛋白,SDS-PAGE分析诱导和纯化的条件,western blot鉴定HF-2A蛋白的表达,pull down实验检测HF-2A与BCR-ABL的相互作用。 结果：重组原核表达载体经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确;0.1 mmol/L IPTG 25 ℃诱导4 h获得HF-2A蛋白的高表达,其分子量（Mr)约为74 000,纯化后可获得高纯度的HF-2A蛋白;HF-2A与BCR-ABL能相互作用。 结论：成功表达并纯化了HF-2A融合蛋白,HF-2A能够靶向作用BCR-ABL。     

妊娠糖尿病的糖脂代谢改变特征

目的研究不同血糖水平孕妇的血脂情况,探寻妊娠糖尿病(GDM)患者糖脂代谢变化特征。方法收集2009年10月至2010年2月,该院进行产前检查的114例孕妇空腹血清和全血标本,据糖筛试验和口服葡萄糖耐量试验(OGTT)将研究对象分为3组:糖筛阴性组、糖筛阳性而OGTT阴性(NGT)组及GDM组。分别检测各组糖脂代谢改变情况,比较3组数据之间的差异。结果 GDM组游离脂肪酸(FFA)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、糖化血红蛋白(HbAlc)较糖筛阴性组均有升高,且差异有统计学意义(P<0.05);与NGT组比较,FFA、TG和HbAlc均有所升高。结论血脂、hs-CRP、HbAlc在GDM的辅助诊断及病情判断方面有重要的临床价值。     

混合式教学在《临床生物化学检验》中的应用

目的　探讨混合式教学在《临床生物化学检验》本科教学中的作用。方法　以本校2017级医学检验技术本科生（134人）为研究对象。采用问卷调查的形式,结合线上、线下数据,对混合式教学成效及意见进行统计分析。采用SPSS 23.0进行秩和检验。结果　混合式教学应用于《临床生物化学检验》教学可全方位影响学习效果,使课程成绩从70（64,76）分提升至79（71,85）分,差异有统计学意义（Z=6.69,P<0.001）。结论　混合式教学模式、PBL教学和翻转课堂教学手段、形成性评价的联合应用,有利于因材施教和培养学生临床思维能力。