重组CYP2D26主要B细胞表位在II型自身免疫性肝炎小鼠模型构建中的效应研究

目的 研究在大肠杆菌中以重组病毒样颗粒形式表达的人Ⅱ型自身免疫性肝炎标志蛋白 CYP2D6主要抗原表位aa262-270免疫小鼠后对构建小鼠自身免疫性肝炎模型的效应.方法 设计人Ⅱ型自身免疫性肝炎标志蛋白主要抗原表位aa262-270 (WDPAQPPRD)的下负链寡核苷酸片段,经退火后插入表达乙肝核心蛋白 HBcAg的质粒pNP中(pNP质粒由pThioHisA质粒插入HBcAg基因片段构建而成).构建成质粒pNP-AIH2;转染大肠杆菌DH5α感受态细胞;以IPTG诱导重组蛋白表达,经硫酸铵沉淀、洗涤,密度梯度离心纯化和脱盐后,肌肉注射免疫小鼠3次,以ELISA和western blot检测免疫后小鼠特异性抗体的产生和水平,通过转氨酶检测和肝脏石蜡切片HE染色观察炎症反应.结果 SDS-PAGE结果显示重组菌诱导表达的目的蛋白分子量为19kD,与预期相符;电镜证实其以可溶性的病毒样颗粒形式存在;ELISA显示,免疫小鼠血.清与包被的肝脏匀浆蛋白特异反应,检测到持续存在的特异抗体,滴度至少为1∶2000; western blot检测表明,抗血清在分子量约为55 kD的地方产生了一个特异的条带,与小鼠CYP2D6蛋白大小一致.与正常对照相比,实验组小鼠转氨酶水平未明显升高,肝切片HE染色没有观测到明显的病理特征.结论 携带人Ⅱ型自身免疫性肝炎标志蛋白 CYP2D26主要表位的病毒样颗粒免疫小鼠后,可刺激产生较强的特异抗体水平,但在观测时间内,未见诱导小鼠产生明显的肝脏炎症反应.     

香砂六君子丸治疗抗精神病药物流涎副作用70例

2004年1月～2007年1月,我院采用香砂六君子丸治疗抗精神病药物流涎副作用,取得满意疗效,现报道如下。一般资料人组标准：135例为我院住院患者,均符合《中国精神障碍分类与诊断标准（CCMD-3）》,其中诊断为精神分裂症（包括分裂样精神病）106例,情感性精神障碍（躁狂发作）26例,其他精神病3例。使用抗精神病药物有氯氮平、利醅酮、奋乃静、氟哌啶醇等,     

戊型肝炎病毒ORF2 C端抗原片段的表达及其免疫 …

目的 表达戊型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｅ ｖｉｒｕｓ,ＨＥＶ）ＯＲＦ２ Ｃ端１２８个氨基酸残基的抗原片段ＯＲＦ２．３,并进行其免疫学特性的研究。方法 用ｐＢＶ２２０载体进行抗原的非融合表达,包涵体经变性凝胶过滤层析及离子交换层析纯化后透析复性,以Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ、ＥＬＩＳＡ、动物免疫与抗原籍捕获ＲＴ－ｍＰＣＲ等方法研究其免疫学特性。结果 获得了ＯＲＦ２．３的高效表达,表达量占菌体总蛋白     

联合丙戊酸镁缓释片和丙戊酸钠治疗伴焦虑抑郁症的临床观察

目的评价帕罗西汀联合丙戊酸镁缓释片和丙戊酸钠治疗伴焦虑抑郁症的疗效、安全性及用药依从性。方法 60例伴焦虑抑郁症患者,随机分治疗组和对照组,每组30例。治疗组给予帕罗西汀联合丙戊酸镁缓释片治疗;对照组给予帕罗西汀联合丙戊酸钠治疗,疗程均为6周。根据汉密尔顿抑郁量表(HAMD)减分率评定疗效,副反应量表(TESS)评定药物的安全性,从用药开始随访(门诊或电话随访)3个月观察对用药的依从性。在治疗前后1、2、4、6周末分别对两组进行评定。结果经6周治疗,两组HAMD评分均明显下降(P<0.05);治疗前后两组患者比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组总有效率为86.7%,对照组为83.3%,比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组不良反应发生率为30.0%,对照组为43.3%;治疗后1、2、4周末TESS评分两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);第6周末TESS评分两组比较差异有统计学意义(t=2.07,P<0.05)。结论丙戊酸镁缓释片治疗疗效和丙戊酸钠相当,长期使用不良反应发生率较丙戊酸钠低、且服药依从性好于丙戊酸钠,值得在临床上推广。     

基于聚类分析的精神分裂症中医证候要素特征研究

目的探讨精神分裂症中医证候要素分布特征,为中医辨证论治精神分裂症提供依据。方法采用流行病学调查的方法,收集302例精神分裂症患者的基本信息和中医四诊信息,采用SPSS 20. 0统计软件对获得的中医四诊信息先进性频数分析,保留出现频率 10的四诊信息条目,然后对保留条目进行系统聚类分析,根据聚类结果进行中医证候要素提取。结果精神分裂症中医四诊信息可聚为10类,根据判别结果分为病性类的证候要素7项,分别为:气虚、气滞、阴虚、阳虚、火热、痰、血瘀,病位类的证候要素5项,分别为:心、肝、脾、肾。结论精神分裂症中医证候以痰、火、气、虚、瘀为其主要病机,系统聚类方法能反映精神分裂症的中医证候要素特征。     

rhbFGF基因及其蛋白促兔缺血心肌血管新生的对比研究

目的 探讨通过心肌内注射重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)基因及其蛋白促兔缺血心肌血管新生的“基因血管搭桥”的效果。方法 无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支(LAD)，建立急性心肌梗死动物模型。将成功构建的真核表达质粒pcDNA3-bFGF、rhbFGF蛋白、生理盐水，直接四点注射人兔缺血心肌内。实验兔饲养6周、12周以后，通过病理切片光镜观察、图像分析对比研究三组间血管新生情况。结果 1)成功构建pcDNA3-bFGF真核表达质粒并制备rhbFGF蛋白；(2)pcDNA3-bFCF真核表达质粒在心肌中成功表达为rhbFGF蛋白；(3)血管新生的观察：通过对心肌内注射基因及其蛋白进行对比研究，发现心肌内注射蛋白和基因均有促兔缺血心肌血管新生的作用，而基因的促血管新生作用更强。结论 rhbFGF蛋白及基因心肌内注射均有促兔缺血心肌血管新生的作用，而基因的促血管新生效果显著。“基因治疗促血管新生”法是另一种有效的冠心病治疗方法，rhbFGF基因有重要的推广应用价值。     

huIL-6-GM-CSF(9-127)融合蛋白的表达及活性测定

目的　构建及表达具有huIL 6和huGM CSF双重生物学活性的huIL 6 GM CSF(9- 12 7)融合蛋白分子。方法　应用PCR技术对huIL 6和huGM CSF的基因分别加以改造 ,同时在二者之间加上连接肽序列 (G G S G S) 3 ,克隆PCR产物 ,并构建成pBV2 2 0 IL 6 GM CSF(9- 12 7)表达质粒 ,将表达质粒导入E .coliDH5α中 ,诱导表达融合蛋白。通过QSepharoseH .P .离子交换柱和SephacrylS 2 0 0分子筛柱二步柱纯化以获取目的蛋白。使用MTT法测量其huIL 6和huGM CSF生物学活性。结果　pUC18 IL 6 GM CSF(9- 12 7)的序列与理论设计完全一致 ,表达质粒在E .coliDH5α中得到高效表达 ,表达的融合蛋白占总蛋白含量的 30 %以上 ,表达产物以包涵体的形式存在。通过QSepharoseH .P .离子交换柱和SephacrylS 2 0 0分子筛柱二步柱纯化及复性后获得目的蛋白 ,其纯度达到 96 %以上。融合蛋白具有huIL 6和huGM CSF的双重生物学活性 ,其促进huIL 6依赖细胞株B9和huGM CSF依赖细胞株TF 1增殖的比活性分别为 2 .86× 10 7U/mg和 3.33× 10 8U/mg。结论　获得了具有较高纯度和双重生物学活性的huIL 6 GM CSF(9- 12 7)融合蛋白     

静脉应用bFGF对兔缺血心肌血管新生的影响

目的探讨静脉给予碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对兔缺血心肌血管新生的影响。方法开胸结扎兔的冠状动脉左前降支 (LAD) ,制成急性心肌梗塞模型 ,动物被随机分为两组 :一为bFGF组 ,连续2周静脉内给予bFGF(100ug/kg) ;一为对照组 ,连续2周静脉内给予生理盐水2ml。12周时 ,处死动物 ,通过组织学观察两组兔子缺血心肌的血管新生情况。结果bFGF组缺血心肌处的血管密度与对照组比较差异无显著性 (P>0.05)。结论静脉内连续2周给予bFGF(100ug/kg)无明显促进缺血心肌血管新生的作用。     

心肌内注射碱性成纤维细脑生长因子基因缩小兔缺血心肌面积的实验研究

目的：探讨心肌内注射碱性成纤维细胞生长因子基因(bFGF基因)缩小兔急性心肌缺血面积的作用。方法：碱裂解法大量制备质粒，采用开胸扎兔冠状动脉左前降支(LAD)法，建立兔急性前壁心肌梗死模型，模型制备成功后将动物分为治疗组(n＝19)和对照组(n＝18)，并于心肌内分别注射pcDNA3—bFGF100μg，和pcNA3 100μg，饲养至2、6、12周处死，行病理切片观察心肌梗死面积的变化和缺血心肌内血管新生的情况。结果：（1）术前术后描记的心电图证实兔急性心肌梗死模型制作成功。(2)病理切片行图象分析计算血管密度发现，治疗组毛细血管密度和小动脉密度显著高于对照组。(3)治疗组2周和6周缺血心肌面积显著小于对照组。结论：心肌内注射bFGF基因能促进缺血心肌内血管新生、减少心肌缺血面积，基因治疗有望成为一种新的冠心病治疗方法。     

Persephin基因克隆及在大肠杆菌中的表达

目的 :获取Persephin(PSP)基因并实现其高效表达。 方法 :利用PCR方法以染色体DNA为模板 ,扩增编码人PSP成熟蛋白的基因片段 ,将其克隆于 pUC19质粒 ,进行序列分析 ,将基因重组于硫氧还蛋白融合表达载体pThioHisA并进行表达。结果 :序列分析结果与文献报道一致 ,表达的hPSP占菌体总蛋白质 15 %左右。结论 :人PSP基因在大肠杆菌Top10中获得了高效、稳定表达 ,为进一步的基础研究与临床应用奠定了基础。