高迁移率蛋白1的小干扰RNA对高糖环境下视网膜血管内皮细胞凋亡的影响

目的　探讨高迁移率蛋白1（high-mobility group box-1,HMGB1）的小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）对视网膜血管内皮细胞的影响。方法　采用siRNA对HMGB1的表达进行抑制,采用CCK8检测试剂盒、Hochest33342染色、流式细胞仪检测,观察高糖环境下HMGB1 siRNA对视网膜血管内皮细胞的影响,同时通过Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果　HMGB1转染后,siRNA组的蛋白表达与正常对照组相比减少了73%（P<0.05）,siRNA组的蛋白表达与非特异性siRNA（scr-siRNA）组相比减少了75%（P<0.05）,而正常对照组和scr-siRNA组之间差异无统计学意义（P>0.05）。流式细胞仪检测结果显示,正常对照组、高糖组、scr-siRNA组和siRNA组细胞的总凋亡率分别为（0.40±0.03）%、（49.80±3.50）%、（47.60±1.98）%和（23.60±2.40）%。与正常对照组相比,高糖组、scr-siRNA组、siRNA组的细胞凋亡率均明显升高（均为P<0.05）;与scr-siRNA组相比,siRNA组的细胞凋亡率明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;而scr-siRNA组和高糖组的细胞凋亡率差异无统计学意义（P>0.05）。与正常对照组相比,高糖组和scr-siRNA组的cleaved-caspase 3蛋白（半胱天冬酶3）表达分别增加了（233±10）%、（266±22）%（均为P<0.05）;与scr-siRNA组相比,siRNA组的cleaved-caspase 3蛋白表达减少了（43±3）%（P<0.05）;而高糖组和scr-siRNA组的蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。与正常对照组相比,高糖组和scr-siRNA组的B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）蛋白表达分别减少了（32±2）%、（29±3）%（均为P<0.05）;与scr-siRNA组相比,siRNA组的Bcl-2蛋白表达增加了（42±2）%（P<0.05）;而高糖组和scr-siRNA组的蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论　HMGB1 siRNA可以通过抑制cleaved-caspase 3的活化和增加Bcl-2蛋白的表达减轻高糖环境下视网膜血管内皮细胞的凋亡。