基于氧化应激和NLRP3炎性小体探讨锦鹤养心方总黄酮抗心肌缺血的作用机制

目的:研究锦鹤养心方总黄酮提取物对盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌缺血损伤保护作用,并初步探讨其作用机制。方法:108只SPF级KM小鼠随机分为正常组,模型组,阳性药组(盐酸普萘洛尔,33 mg·kg-1),总黄酮提取物高、中、低剂量组(4.4,2.2,1.1 g·kg-1),给药组连续给药7 d,各组于第5天开始,除正常组外,其余各组小鼠均于给药1 h后皮下注射ISO 20 mg·kg-1,正常组小鼠皮下注射等剂量生理盐水,连续注射3 d,制备心肌缺血模型。造模24 h后取材,记录各组小鼠第1次注射ISO前及最后1次注射24 h后心电图;测定各组小鼠的心脏指数;用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定心肌缺血面积;试剂盒检测血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB),心肌钙蛋白I(c Tn I),乳酸脱氢酶(LDH),丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织病理形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定小鼠心肌组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3),凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠Ⅱ导联心电图ST段位移增加(P0.01),血清CK-MB,c Tn I,ALT,AST,LDH,MDA,IL-6,TNF-α,IL-1β含量及心脏指数水平显著升高,SOD的含量显著降低(P0.01),心肌缺血面积显著增加(P0.01),心肌组织损伤明显,NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,锦鹤养心方总黄酮各剂量组小鼠Ⅱ导联心电图ST段位移降低(P0.05,P0.01),血清CK-MB,c Tn I,ALT,AST,LDH,MDA,IL-6,TNF-α,IL-1β含量及心脏指数水平降低,SOD的含量升高(P0.05,P0.01),心肌缺血面积降低(P0.05,P0.01),心肌缺血损伤明显减轻,NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达降低(P0.05,P0.01)。结论:锦鹤养心方总黄酮对心肌缺血损伤具有保护作用,且呈现一定的量效关系,该作用可能与提高机体抗氧化活性,减少氧化应激损伤,抑制NLRP3炎性小体活化有关。     

中药制剂掩味用包衣材料的研究进展

中药口服制剂多为复杂体系,口感较差,影响着患者服药的依从性,因此对其进行口感改良具有现实意义。矫掩味方法多样,其中包衣法较为常用,包衣层可减少药物与苦味受体的接触,从而达到掩味的目的。采用包衣法掩味时,除需保证良好的掩味效果外还需保证药物的释放,包衣材料的选择至关重要。中药制剂常用的包衣材料主要包括糖类如壳聚糖、环糊精、纤维素衍生物等,树脂类如丙烯酸树脂等,脂类如巴西棕榈蜡、山嵛酸甘油酯等。对常用的掩味用包衣辅料进行了综述,以期能为中药掩味包衣材料的选择提供参考。     

洋金花叶中黄酮类和生物碱类化学成分研究

目的研究洋金花Datura metel叶黄酮类和生物碱类化学成分和生物活性。方法综合运用大孔吸附树脂、硅胶、ODS、HPLC等液相色谱法和MS、NMR等波谱法以及理化性质对化合物进行分离、纯化和鉴定,采用MTT法和Griess法研究其抗炎活性。结果从洋金花叶70%乙醇提取物中分离得到39个化合物,分别鉴定为紫杉叶素(1)、(+)-儿茶素(2)、kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranoside(3)、紫云英苷(4)、异槲皮苷(5)、紫杉叶素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(6)、(2R,3R)-(+)-glucodistylin(7)、(2S,3S)-(-)-glucodistylin(8)、quercetin-3-O-β-xylopyranosyl-(1→2)-β-glucopyranoside(9)、异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(10)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷(12)、木犀草素-7-O-β-D-(6′′-乙酰基)-吡喃葡萄糖苷(13)、plantaginin(14)、木犀草素-7-O-β-D-龙胆二糖苷(15)、7-O-primverosylformononetin(16)、isoetin-7-O-β-D-glucopyranosyl-2′-O-α-D-glucopyranoside(17)、银锻苷(18)、2,3,6,7-tetrahydroxyxanthone(19)、1,2,6,7-tetrahydroxyxanthone(20)、N-反式-对-香豆酰基酪胺(21)、N-反式-对-香豆酰基章鱼胺(22)、eleutherazine B(23)、1,2,3,4-tetrahydro-1-methyl-β-carboline-3-carboxylic acid(24)、naphthisoxazol A(25)、1-甲氧甲酰-β-咔巴啉(26)、1-benzyl-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indole-3-carboxylic acid(27)、(±)-1-phenyl-2-imido-1-propanol(28)、(1S,2R)-N-acetylephedrine (29)、(1R,2S)-N-acetylephedrine(30)、(1S,2R)-N-formylephedrine (31)、(1R,2S)-N-formylephedrine(32)、胸腺嘧啶(33)、脱氧胸腺嘧啶核苷(34)、2-氨基腺苷(35)、3-吲哚甲醛(36)、L-苯丙氨酸(37)、bacilsubteramide A(38)、金色酰胺醇酯(39)。生物活性测定结果表明,化合物3、5、8～11、13～15、17～18、21～27、35～36、39对脂多糖诱导的RAW264.7细胞的一氧化氮释放展现出了不同程度的抑制作用。结论化合物6～10、13～17、19、20、23、24、27～32、35～36、38首次从茄科植物中分离得到,化合物1～3、5、11～12、18、26、33、37首次从曼陀罗属植物中分离得到。其中化合物3、5、8～11、13～15、17、18、21～27、35、36、39具有一定程度的抗炎活性。     

内、外引流方式在输尿管结石合并尿脓毒血症中应用的临床研究

目的比较内、外引流方式在输尿管结石合并尿脓毒血症患者的临床效果。方法选取2014年5月至2017年5月在本院收治的输尿管结石梗阻导致尿脓毒血症患者38例为研究对象,随机分为内引流组(膀胱镜或者经输尿管镜置双J管置入术)和外引流组(在B超的引导下行经皮肾穿刺造瘘术),比较两组患者的引流成功率、尿脓毒血症得到控制的时间、术后尿脓毒血症及感染性休克发生比例。结果两组引流成功率差异无统计学意义;外引流组尿脓毒血症控制时间相对较短,术后无1例患者复发尿脓毒血症。内引流组输尿管镜碎石术后3例复发尿脓毒血症。结论在输尿管结石合并尿脓毒血症患者外引流术更具优势。     

组分配伍四逆汤抑制ERK/cPLA2信号通路改善大鼠膜性肾病

目的 研究组分配伍四逆汤对大鼠膜性肾病的治疗作用及机制。方法 将45只雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组和组分配伍四逆汤组,除对照组外,其余各组尾iv兔抗大鼠Fx1A抗血清制备大鼠膜性肾病模型。造模成功后,组分配伍四逆汤组大鼠ig 9.6 g/kg组分配伍四逆汤,模型组和对照组ig等量蒸馏水,连续给药12周。试剂盒法检测大鼠血清中肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）以及白蛋白（Alb）含量;取肾脏检测肾指数,苏木素-伊红（HE）染色观察肾组织的病理情况;ELISA法检测肾组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）、纤维连接蛋白（FN）以及IV型胶原（Col-IV）含量;采用Western blotting法检测肾脏中ERK1/2和胞浆型磷脂酶（cPLA2）蛋白磷酸化水平。结果 与对照组比较,模型组血清中Scr、BUN水平以及肾指数明显升高（P<0.05、0.01）,血清Alb水平明显降低（P<0.01）,肾组织中TGF-β1、FN和Col-IV含量以及ERK1/2、cPLA2磷酸化蛋白表达均显著升高（P<0.05、0.01）;与模型组比较,组分配伍四逆汤显著降低血清中Scr、BUN水平以及肾指数（P<0.05、0.01）,升高血清中Alb水平（P<0.01）,降低肾组织中TGF-β1、FN、Col-IV含量,减少肾组织中ERK1/2和cPLA2磷酸化蛋白表达（P<0.05、0.01）;HE染色结果显示,组分配伍四逆汤可以改善膜性肾病大鼠肾脏的病理变化。结论 组分配伍四逆汤对膜性肾病大鼠发挥明显治疗作用,其作用机制可能与抑制ERK/cPLA2信号通路激活相关。     

Expression and localization analyses of the cholinergic anti-inflammatory pathway and α7nAchR in different tissues of rats with rheumatoid arthritis

Rheumatoid arthritis (RA) is a complicated chronic multisystem autoimmune disease, wherein the inflammatory cascade leads to vasospasm and osteoclastogenesis, which ultimately results in bone and cartilage destruction. In this study, we investigated the expression and localization of the alpha-7 nicotinic receptor (α7nAchR) gene CHRNA7 in the heart, liver, spleen, lung, kidney, and joints of the collagen-induced arthritis (CIA) rat model. The CHRNA7 mRNA and protein expression levels in these tissues of rats from CIA and normal groups were analyzed via real-time quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) and western blotting, respectively. The cellular localization of CHRNA7 protein was determined via immunohistochemistry (IHC) assays. CHRNA7 was expressed at varying levels in different tissues of rats from the groups, among which joints showed significantly higher CHRNA7 expression levels than other tissues (P < 0.05). CIA rats had significantly higher CHRNA7 expression levels in the spleen and joints than the control group rats (P < 0.05). Positive expression signals for CHRNA7 were detected in various tissues of CIA and control group rats, among which strong positive signals were detected in joint fibroblast-like synoviocytes (FLSs), endothelial cells, stromal cells, and macrophages. Our results further confirmed the involvement of the CAP in the onset and development of inflammatory responses in RA, suggesting that CHRNA7 may be a new therapeutic target for RA. This study is of great clinical and theoretical significance for understanding the differential expression of CHRNA7 in various tissues and cholinergic anti-inflammatory pathway (CAP)-targeted treatment of RA.     

中医药院校生物化学课程构建大思政育人格局教学模式的探索

一直以来,中医药院校的生物化学课程教育与思想政治教育存在着各自为营的问题,不能有效达到大学生德术兼修的培养目标.文章从生物化学知识传授和价值导向的相结合、生物化学知识内化和自觉外化的相结合以及生物化学知识评价和价值评价的相结合等方面阐述构建生物化学课程"大思政"育人格局的教学模式,以达到培养大学生德术兼修的教学目标.     

4-hydroxynonenal levels are enhanced in fetal liver mitochondria by in utero ethanol exposure

Lipid peroxidation has been implicated in ethanol-induced liver injury and observed in fetal liver and brain after maternal ethanol consumption with mitochondria being the target organelles. This process generates a highly reactive and toxic product, 4-hydroxynonenal (HNE). In the present study, HNE levels and metabolism were assessed in mitochondria of fetal and maternal liver after in vivo ethanol exposure. Female Sprague-Dawley rats received five doses of ethanol (4 g/kg orally at 12-hour intervals) and were killed on day 19 of gestation. The results showed that HNE levels were enhanced in hepatic mitochondria of fetal rats exposed to ethanol, far in excess of that in adult liver mitochondria. Measurement of HNE metabolism showed that fetal mitochondria had a lower capacity for HNE catabolism than adult mitochondria. In adult mitochondria, HNE could be metabolized by nicotine adenine dinucleotide-dependent oxidation, reduced glutathione conjugation, and reduced nicotine adenine dinucleotide-dependent reduction, whereas in fetal liver only the former two pathways were active, but to a lesser degree than in adult mitochondria. On the other hand, mitochondria from fetal liver showed a higher production of HNE when oxidative stress was induced with t-butyl hydroperoxide. Prior in vivo ethanol exposure further potentiated HNE formation in t-butyl hydroperoxide-stimulated fetal liver mitochondria, but not in adult mitochondria. These findings indicate that increased levels of HNE in fetal liver mitochondria after maternal ethanol consumption reflect a higher susceptibility to HNE formation in addition to a lesser capacity to metabolize it. The enhanced accumulation of this toxic aldehyde may contribute to oxidative damage observed in fetal tissues after in utero ethanol exposure.(Hepatology 1997 Jan;25(1):142-7)     

分心木中2个新的脂肪酸酯

目的 研究分心木Diaphragma Juglandis Fructus的化学成分.方法 采用正相硅胶、反相ODS、中压制备液相色谱和制备型高效液相色谱等多种色谱技术和手段进行分离和纯化,通过1D和2D-NMR、HR-ESI-MS等谱学数据分析鉴定化合物结构.结果 从分心木中共分离得到5个脂肪酸类成分,分别鉴定为胡桃酸...     

基于黄疸模型大鼠的栀子苷急性肝肾毒性研究

目的:观察栀子苷对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)所致黄疸模型大鼠的肝肾毒性作用,为栀子的临床安全用药提供参考。方法:Wistar大鼠190只,雌雄各半,随机分为空白组,模型不同时间组,栀子苷不同时间组,其中模型组和栀子苷组又分为0.5,1,2,4,8,12,24,48,72 h组,每组10只,模型组及栀子苷组采用ANIT(60 mg·kg-1)ig一次造模,造模后24 h,栀子苷组灌以栀子苷(1.2 g·kg-1),模型组灌以同体积生理盐水。给药后模型组及栀子苷组分别在0.5,1,2,4,8,12,24,48,72 h对大鼠眼眶取血,离心获得血清,全自动生化仪测定丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),总胆红素(TBIL),血尿素氮(BUN),肌酐(CREA),取肝、肾组织进行病理检查。结果:与空白组比较,给予ANIT后,模型组及栀子苷组在8~72 h后ALP,ALT,AST,TBIL肝功能指标不同程度升高(P<0.05,P<0.01);与模型组同时间点比较,栀子苷组在给予栀子苷48,72 h后血清中各项ALP,ALT,AST,TBIL肝功能指标显著升高(P<0.05,P<0.01),在给药24,48,72 h后BUN,CREA显著升高(P<0.01);光镜下观察,栀子苷组及模型组不同时间点均出现不同程度的肝脏病理损伤,其中栀子苷组48,72 h肝脏病理损伤较模型组严重,模型组各时间点肾脏病理检查未见异常,而给药后24~72 h出现不同程度的肾脏病理损伤,其中以48 h最为严重。结论:栀子苷对ANIT黄疸模型大鼠具有明显的急性肝、肾毒性。