人壳三糖酶基因在巴氏毕赤酵母中的真核表达和纯化

目的用巴斯德毕赤酵母系统表达人壳三糖酶,并进行亲和层析纯化,获得具有天然构象的人壳三糖酶。方法从pUC19-Chit融合载体中扩增编码人壳三糖酶基因,并将其克隆入真核表达载体pPIC9K,以电穿孔法转化酵母GS115。用MD平板筛选重组子,G418筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,几丁质亲和层析法对表达上清进行纯化,并进行SDS-PAGE分析。结果构建了人壳三糖酶融合真核表达载体pPIC9K-Chit。SDS-PAGE显示人壳三糖酶分子量约为50000Da,表达量约为24mg/L,纯度为97%。结论人壳三糖酶在毕赤酵母中的成功表达和具有天然构象的人壳三糖酶获得为进一步研究其抗真菌作用提供了物质基础。     

解痉合剂对脑卒中肌痉挛病人运动功能和日常生活能力的影响

目的观察解痉合剂对脑卒中肌痉挛病人运动功能和日常生活能力的影响。方法60例脑卒中肌痉挛病人随机分为康复组和解痉合剂组,每组30例,康复组予以常规康复训练,解痉合剂组加用口服、外用解痉合剂。采用简式Fugl-Meyer运动功能评定（FMA）和Barthel指数（BI）进行疗效评定。结果治疗1个月后解痉合剂组病人运动功能和日常生活能力较康复组均有明显改善（P〈0.01）。结论解痉合剂结合康复治疗对脑卒中肌痉挛病人的运动功能和日常生活能力有显著的改善。     

远中截冠法在拔除下颌部分萌出垂直阻生牙中的应用体会

目的 探讨远中截冠法在下颌部分萌出垂直阻生牙拔除中的临床疗效.方法 选择临床需要拔除部分萌出的垂直阻生牙156例,随机平分成两组.组1采用远中截冠法,组2采用常规法拔除.结果 采用远中截冠法在手术创伤和手术后反应方面与常规法组存在显著差别.结论 采用远中截冠法拔除下颌部分萌出的垂直阻生牙方法简单,创伤小,术后副反应也少,值得临床参考.     

视网膜色素上皮细胞氧化应激相关microRNA的鉴定

目的：应用miRNA表达谱芯片筛选视网膜色素上皮细胞与氧化应激相关的miRNA,为更加全面深入地研究年龄相关性黄斑病变(age-related macular degeneration,AMD)发生的分子机制提供新的思路。

方法：培养D407细胞,分别使用100、200、400μmol/L H₂O₂处理细胞24h后,Trizol试剂抽提细胞总RNA,使用Exiqon miRCURY LNA^TM microRNA表达谱芯片(miRBase 16.0数据库)检测不同浓度处理后D407细胞miRNA的表达差异,并将不同浓度处理后的变化进行聚类分析。使用Stem loop realtime PCR对芯片结果进行验证,并运用生物信息学方法预测差异miRNA调控的靶基因。

结果：芯片所包含的1 425个已知miRNA中,共有367个在不同浓度H₂O₂处理后表达发生变化。通过Treeview软件进行聚类分析发现miR-31等17个miRNA随H₂O₂浓度的升高呈现逐渐降低的趋势,miR-206等7个则逐渐升高。PCR验证显示芯片结果准确性较好。

结论：H₂O₂作用前后RPE的miRNA表达存在明显差异,miRNA作为转录后水平的调节分子,参与了细胞氧化应激反应,可能在AMD的发生发展中起有重要作用。     

柴胡疏肝散与针刺联合认知行为疗法治疗亚健康失眠临床研究

目的:观察在认知行为疗法基础上加用柴胡疏肝散加减联合针刺治疗肝郁气滞型亚健康失眠的效果。方法:将70例肝郁气滞型亚健康失眠患者随机分为对照组及试验组各35例,2组均采用认知行为疗法治疗,试验组加用柴胡疏肝散加减联合针刺疗法治疗,2组疗程均为4周。治疗前、治疗4周后应用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)量表评价2组患者的睡眠质量,用世界卫生组织生存质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)评价生活质量,评估中医证候积分,比较2组的临床疗效。结果:治疗4周,试验组临床疗效优于对照组(P0.05)。2组PSQI评分均较治疗前减少,WHOQOL-BREF评分均较治疗前增加,差异均有统计学意义(P0.05)。试验组PSQI评分低于对照组,WHOQOL-BREF评分高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。2组WHOQOL-BREF生理、心理、社会、环境4个领域的评分均较治疗前增加(P0.05),试验组生理领域、心理领域评分均高于对照组(P0.05)。2组中医证候积分均较治疗前减少(P0.05),试验组中医证候积分低于对照组(P0.05)。结论:在认知行为疗法基础上加用柴胡疏肝散加减联合针刺疗法能有效改善肝郁气滞型亚健康失眠患者的生活质量,缓解临床症状,提高睡眠质量,疗效显著。     

家庭医生责任制管理高血压患者225例效果分析

目的：分析家庭医生责任制管理高血压患者的效果。方法：比较225例高血压患者一年管理效果。结果：2013年高血压控制率为95．11％,2012年为90．22％（P〈0．05）。患者收缩压、舒张压、总胆固醇、高密度脂蛋白指标2013年较2012年有明显好转（P〈0．05）;甘油三酯、低密度脂蛋白和空腹血糖指标略有下降（P〉0．05）。结论：家庭医生责任制服务可显著提高高血压患者血压控制率,改善心血管危险因素。     

面肌痉挛显微血管减压术中责任血管的解剖分析对手术疗效的影响

目的分析面肌痉挛（hemifacial spasm，HFS）患者颅内责任血管与面神经之间的解剖关系，为HFS显微血管减压术（microsurgical neumvascular decompression，MVD）提供解剖学依据。方法回顾性分析106例经显微血管减压术治疗的面肌痉挛患者的临床资料。术前均行三维时间飞越法磁共振血管造影（3D-TOF-MRA）检查，了解面神经受压迫是否存在责任血管及其来源与走向。采用枕下乙状窦后小脑下外侧入路显露面神经脑干段，仔细观察责任血管及其来源后将其推移，在责任血管与脑干之间放置Teflon减压垫棉。结果3D-TOF-MRA检查显示面神经被微小血管压迫的阳性率达92％。术中发现全部病例均有明确的责任血管，其中小脑前下动脉占66％（70／106）。34例患者中发现面神经根区（root exit zone，REZ）存在明显的压迫切迹。术后104例抽搐症状立即完全消失；2例抽搐症状明显好转，3个月内延迟治愈，总有效率为100％。结论血管压迫可能是面肌痉挛的主要病因。术中REZ的显露、准确判断责任血管、面神经REZ的充分减压，以及垫棉的大小和放置的位置等，是影响手术疗效的重要因素。     

糖尿病患者的肾脏SPECT改变

以＾９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ作示踪剂，应用ＳＰＥＣＴ计算机系统对８７例糖尿病患者进行肾动态显像及肾小球滤过率测定，其异常率为６１％。其中半排泄率≥５０％是较敏感的异常指标。肾小球滤过率改变与传统的肾损害分期法基本一致，但有较大交叉，说明此种检查仍然是糖尿病肾病最可靠的判断方法。