芦笋多糖提取、单糖组分分析及定量测定

目的提取芦笋多糖,纯化后分析其单糖组分并测定总糖,为今后芦笋多糖研究提供参考。方法水提醇沉法提取粗多糖,Sevage法除蛋白,H2O2脱色,高效毛细管电泳(HPCE)测定单糖组成,苯酚-硫酸法测定多糖。结果芦笋粗多糖主要单糖组成为木糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖,其质量分数分别为3.44%、7.92%、10.52%、17.15%、41.85%。以单糖混合物为对照品测得粗多糖中总糖的质量分数为79.14%。结论高效毛细管电泳分离度高,可用于单糖组分分析;苯酚-硫酸法实验操作简便,准确可靠,可用于芦笋多糖的测定。     

无梗五加果实提取物总多糖测定及单糖组成分析

目的测定无梗五加Acanthopanax sessiliflorus(Rupr.et Maxim)Seem.果实提取物总多糖含有量,并分析其单糖组成。方法水提醇沉法与Sevage法得到提取物,苯酚-硫酸比色法测定其中总多糖含有量,三氟乙酸水解,HPLC法分析单糖组成。结果总多糖含有量为50.5%,收率为4.39%,由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、半乳糖组成,比例为7.70∶8.30∶10.0∶1.60∶9.70∶20.2。结论苯酚-硫酸比色法操作简便,显色稳定,重复性良好,可用于无梗五加果实总多糖含有量的测定,而HPLC法也适合分析其单糖组成。     

微晶纤维素薄层色谱法分析荨麻多糖中的单糖组成

目的分析荨麻多糖的单糖组成.方法采用微晶纤维素薄层板,展开剂系统为正丁醇.乙酸乙酯-吡啶-水(6154)下二次展开,苯胺-邻苯二甲酸为显色剂.结果在正丁醇-乙酸乙酯-吡啶-水(6154)展开剂系统下,实现了各单糖组分的分离,荨麻粗多糖主要由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸和一个未知单糖组成.结论该法能有效分析单糖组成,方法简单易行.     

麻黄根多糖中单糖组成的 GC-MS 分析

目的：研究麻黄根多糖中单糖的种类和组成比例。方法：样品经三甲基硅醚化衍生,采用气相色谱法测定麻黄根多糖的单糖组成。采用 DB -17毛细管柱（60m ×0．25mm ×0．25 mm）,程序升温,柱温50℃,以40℃/min 至190℃,以0．5℃/min 至200℃,以1 C/min 至210℃,以20℃/min 至280℃,氦气作载气,进样口温度250℃,分流比1∶20,柱流速1．2mL/min。 EI（70 eV）,接口温度250℃,离子源温度250℃,扫描范围：m/z 43-500,扫描速率：2．5 scan /s。结果：麻黄根多糖中主要含阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖醛酸,其摩尔比为7．59∶5．93∶9．94,还有少量的半乳糖、葡萄糖、甘露糖。结论：该方法简便、灵敏、可以准确测定出麻黄根多糖中单糖的种类和组成比例。     

女贞子多糖的提取工艺及单糖组成

目的: 优选女贞子多糖的最佳提取工艺并测定其单糖组成及摩尔比。方法: 采用正交试验法,以多糖提取率为评价指标,对女贞子多糖的提取因素进行研究,用苯酚-硫酸比色法对女贞子多糖进行含量测定。多糖经硫酸水解后,水解产物利用高效液相色谱(HPLC)分析其单糖组成及摩尔比。结果: 女贞子多糖的最佳提取工艺为10倍量水,回流提取3次,3 h/次;该多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖4种单糖组成,其摩尔比为3.71∶3.21∶1.00∶16.06。结论: 该方法简便、准确,可用于女贞子多糖的单糖组成测定及质量控制。     

枸杞多糖提取工艺优化及其单糖组成测定

目的:以甘肃省靖远县枸杞为原料,研究枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)的提取工艺,并对其单糖组成进行分析.方法:采用响应面法,考察时间、液料比和温度对LBP提取产率的影响,从而优化提取工艺.利用柱前衍生化高效液相色谱(high performance liquid chr...     

薄层色谱法联合气相色谱法分析金银花多糖的单糖组分研究

目的:用薄层色谱法(TLC)联合气相色谱法(GC)分析金银花多糖的单糖组分与比例。方法:热水法提取金银花多糖,酸水解后用TLC联合GC分析其单糖组成。结果:组成金银花多糖的单糖包括葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、木糖及阿拉伯糖,其比例为23.6∶3.3∶1.8∶2.3∶1.0∶4.2。结论:实验确定了金银花多糖中单糖的组成及比例,为金银花多糖的进一步研究奠定了基础。     

高效液相法测定黄芪中性多糖的单糖组成

目的:采用高效液相法测定黄芪中性多糖的单糖组成。方法:正交设计优选三氟乙酸水解黄芪中性多糖的条件;水解产物直接采用高效液相-视差检测器(HPLC-RID)检测或经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化后高效液相-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)检测两种方法,以6种单糖为对照,测定水解产物中单糖的组成。结果:黄芪中性多糖的三氟乙酸完全酸水解最佳条件为采用1M TFA,水解温度100℃,水解时间5 h;两种高效液相色谱法测得水解产物中的单糖均为葡萄糖。结论:采用三氟乙酸完全酸水解条件和高效液相色谱法测定单糖的方法简便易行,可用于黄芪中性多糖的单糖组成研究。     

五倍子多糖相对分子质量和单糖组成的测定

目的:研究五倍子多糖精细组分的相对分子质量、单糖组成。方法:五倍子多糖经提取纯化后得到GCP-1,GCP-2和GCP-3 3种精细组分。用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析其相对分子质量;采用三氟乙酸(TFA)水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化的高效液相色谱(HPLC)分析其单糖组成。结果:HPGPC试验结果显示,GCP-1,GCP-2,GCP-3的相对分子质量分别为182,2.1×10~4,6×10~4;单糖组成试验表明,GCP-2和GCP-3的单糖组成类型基本一致,主要为半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等。结论:用HPGPC和PMP柱前衍生法测得五倍子多糖精细组分的相对分子质量和单糖组成,方法简便可行,可用于五倍子多糖的研究。     

泡核桃壳多糖中单糖的组成及测定

目的建立泡核桃壳多糖中单糖的组成和定量的检测方法。方法以三氟乙酸水解核桃壳多糖,所获得的多糖水解物加入衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)柱前衍生化,利用高效液相色谱法分析单糖的PMP衍生物。Agilent Venusil XBP-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-醋酸铵缓冲液(pH 5.5)19∶81,体积流量为1.0 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为30℃。结果泡核桃壳多糖由D-甘露糖、鼠李糖、半乳糖、D-半乳糖醛酸、葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、D-阿拉伯糖等11种单糖(有4种未鉴定出的单糖)组成。D-甘露糖、鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿拉伯糖的线性分别为0.041 8～2.09μg,0.045 9～2.295μg,0.043 5～2.175μg,0.042 7～2.135μg,0.040 5～2.026μg,0.043 9～2.195μg,0.047 5～2.375μg;平均加样回收率分别为95.9%、103.1%、104.6%、97.5%、95.8%、87.5%、98.1%,RSD均小于3.0%。在泡核桃壳提取物中D-阿拉伯糖的相对平均含有量最高。结论该方法可以准确地测定出泡核桃壳多糖中含有的单糖及其含有量。     

火木层孔菌液体培养物的化学成分研究

目的:研究针层孔属火木层孔菌Phellinus igniarius液体培养物的化学成分并对其在多种体外药理模型上进行随机活性筛选.方法:分别对发酵液及菌丝体的化学成分进行研究,采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱以及反相HPLC柱色谱等分离方法进行分离纯化;运用光谱数据解析鉴定化合物结构;在细胞水平模型上,筛选化合物在肿瘤细胞毒、神经保护、肝保护、抗炎和抗HIV等方面的活性.结果:从发酵液和菌丝体2部分共分离鉴定了29个化合物,分别为3个倍半萜:3S,9R,10S-3-羟基-11,12-O-异丙基血苋烷烯(1),3S,9R,10S-3,11,12-三羟基血苋烷烯(2)和3S,4S,9R,10-11,12,14-三羟基血苋烷烯(3);3个甾体:24R-麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(4),豆甾-7,22-二烯-3β,5α,6α-三醇(5)和麦角甾5α,8α-过氧-6,22-二烯-3β-醇(6);14个环二肽:环(L-脯氨酸-L-缬氨酸)(7),环(L-亮氨酸-D-脯氨酸)(8),环(L-亮氨酸-L-脯氨酸)(9),环(异亮氨酸-脯氨酸)(10),环(甘氨酸-亮氨酸)(11),环(苯丙氨酸-丝氨酸)(12),环(丙氨酸-脯氨酸)(13),环(丙氨酸-苯丙氨酸)(14),环(4-羟基-脯氨酸-苯丙氨酸)(15),环(L-苯丙氨酸-D-脯氨酸)(16),环(D-苯丙氨酸-D-脯氨酸)(17),环(6-羟基-脯氨酸-苯丙氨酸)(18),环(谷氨酸氨-脯氨酸)(19)和环(天冬氨酸-亮氨酸)(20);9个其他类化合物:乙酰氨基苯丙氨酸(21)、腺苷(22)、苯乙二醇(23)、邻-羟基苯乙醇(24)、苯甲酸(25)、对-甲氧基苯甲酸(26)、间-甲氧基苯甲酸(27)、十六烷酸(28)和3-吡啶羧酸(29).化合物5和8在1×10-5mol·L-1时能够有效地抑制MPP+诱导的PC12-syn细胞损伤,相对保护率分别为90.3%和87.5%,与模型组比较有显著性差异(P<0.05).在1×10-5mol·L-1浓度下,化合物12和18可较好地保护DL-半乳糖胺诱导的WB-F344细胞损伤,细胞成活率分别为25%和24%(双环醇作为对照,细胞成活率为24%).结论:化合物1-29均为首次从针层孔属火木层孔菌液体培养物中分离鉴定;化合物5和S有神经细胞保护活性,化合物12和18具有肝细胞损伤保护活性,其他化合物在测试浓度下在以上筛选模型中未显示明确活性.     

桑黄总三萜的提取及其体外抗脑胶质瘤U251活性

目的:优化药用真菌桑黄总三萜的超声提取工艺并测定其对脑胶质瘤U251生长的抑制作用.方法:采用正交设计试验对超声辅助提取过程中影响桑黄总三萜得率的乙醇体积分数、超声时间、超声温度和料液比等因素进行优化;采用MTT比色法测定桑黄总三萜对U251细胞株增殖的抑制率,应用倒置相差显微镜观察桑黄总三萜对肿瘤细胞形态结构的影响.结果:超声辅助提取桑黄总三萜的最佳工艺条件为70％乙醇,超声提取20 min,温度60℃,料液比1∶25.在此条件下,桑黄总三萜提取率可达9.40 mg·g-1.桑黄总三萜对脑胶质瘤U251细胞株有抑制增殖作用,且表现出浓度依赖关系,倒置相差显微镜下可见部分细胞形成凋亡小体.结论:采用超声辅助提取桑黄总三萜时间短、得率高,是一种高效、快捷的方法,桑黄总三萜可抑制脑胶质瘤U251细胞株的增殖,诱导肿瘤细胞凋亡.     

民族药金耳环总多糖的提取工艺优选

目的:优选金耳环中总多糖的提取工艺.方法:选取固液比、提取温度、提取时间、醇沉浓度为考察因素,以金耳环总多糖得率为评价指标,采用正交试验对其提取工艺进行优选.结果:金耳环总多糖最优提取工艺参数为液固比6∶1,80℃提取2次,每次90 min,90％乙醇沉淀.此条件下,总多糖平均得率1.82％,RSD 1.93％.结论:该优选方法简单快速,稳定可行.     

柱前衍生化高效液相色谱法测定地稔多糖中单糖组成

目的:从地稔中提取分离地稔多糖,并对单糖组成进行研究。方法:采用水提醇沉法提取地稔粗多糖,再用DEAE纤维素柱色谱进行分离纯化,获得一种水溶性较好的中性多糖和一种酸性多糖,然后采用高效液相柱前衍生法对其单糖组成进行测定。结果:地稔中性多糖主要是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、鼠李糖等5种单糖组成,摩尔比为123∶84∶27∶19∶5,另有极少量木糖。地稔酸性多糖单糖组成主要是半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖7种单糖组成,摩尔比为14∶10∶7∶6∶4∶1∶1,另外还有少量的木糖。结论:本研究建立了分离及测定地稔多糖组成成分的分析方法,该方法操作简单,方便可行。     

桑黄化学成分及体外抗肿瘤活性研究

综合运用硅胶,Sephedax LH-20,RP-8,MCI等柱色谱及硅胶薄层制备色谱,从桑黄子实体的95%乙醇提取物中分离纯化得到11个化合物,通过NMR和MS解析技术鉴定为3α-羟基木栓烷-2-酮(1),3-羟基木栓烷-3-烯-2-酮(2),麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(3),麦角甾醇过氧化物(4),尿嘧啶(5),尿嘧啶核苷(6),4-(3,4-二羟苯基)-3-丁烯-2-酮(7),原儿茶醛(8),inotilone(9),inoseavin A(10),phellibaumin E(11),其中化合物1,2,5,6为首次从该属真菌中分离得到。采用Cell TiterGLo ATP荧光活性检测法,11个化合物对41株离体肿瘤细胞和2株正常仓鼠细胞高通量筛选,结果显示化合物2~4对髓性白血病细胞系NOMO-1和SKM-1效果较好,其中化合物2,3体现出较好的选择性(对NOMO-1的IC_(50)分别为0.795 5,1.828μmol·L~(-1);对SKM-1的IC_(50)10μmol·L~(-1));化合物7对肺癌细胞系H526、前列腺癌细胞系DU145、白血病细胞系HEL效果较为明显(IC_(50)分别为0.533 4,1.885,1.057μmol·L~(-1)),并显示出较好的选择性;其他化合物体外抗肿瘤作用不显著或没有活性。此外,所有化合物对正常仓鼠细胞系CHL和CHO均无明显作用(IC_(50)10μmol·L~(-1)),显示所有化合物对正常细胞无毒副作用。     

毛樱桃总黄酮超声提取工艺优选

目的:优选毛樱桃总黄酮的超声提取工艺。方法:以总黄酮得率为评价指标,紫外分光光度法测定总黄酮含量,采用正交试验法考察提取时间、料液比、乙醇体积分数、超声功率等对毛樱桃总黄酮超声提取工艺的影响,响应曲面法优选提取条件。结果:最佳提取工艺为20倍量95%乙醇于400 W功率下提取45 min。此工艺条件下,总黄酮平均得率1.135%。结论:乙醇超声提取法经济实用、方便快捷,可在中药材提取领域推广使用。     

掌叶大黄多糖超滤工艺优选

目的:探讨超滤膜技术分离纯化掌叶大黄多糖的可行性工艺.方法:采用正交设计法优选超滤前离心条件;以超滤压力、料液温度及料液浓度为考察因素,以粗多糖得率和含量为考核指标,均匀设计优选超滤工艺参数.结果:最佳超滤条件为药液以3 000 r-min -1离心处理12 min,用分子截留量10万的膜,超滤压力为0.05 ～0.09 MPa,药液温度40℃,药材与提取液质量比1∶10 ～1∶30,pH 6.0,超滤膜先用tween-80(5 g·L-1)处理10 min.结论:优化所得超滤工艺与未超滤相比有较高的多糖得率和含量.超滤技术可用于纯化、富集掌叶大黄多糖,具有产业化开发前景.