GPC法测定仙人掌多糖相对分子质量以及HPLC-ELSD法测定其单糖组成

多糖类的活性与其相对分子质量大小、聚合度、分支度以及溶液中高级构象等都有关,多糖相对分子质量太大或太小均会引起活性的下降。因此,多糖的结构是其生物活性的基础,多糖的一级结构和高级结构与其生物活性间的构效关系是当前糖化学和糖生物学共同关注的焦点问题。多糖结构研     

HPLC-ELSD法分析破壁灵芝孢子粉的多糖组成

目的建立HPLC-ELSD法对破壁灵芝孢子粉中多糖的单糖组成进行分析。方法采用Shodex Asahipak NH2P-50 4E色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(83∶17);体积流量1.0 m L/min;进样量10μL;柱温30℃;ELSD检测条件为漂移管温度85℃,载气体积流量2.0 m L/min。结果岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、果糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的进样量对数与峰面积对数在一定范围内均呈现出较好的线性关系,回收率均在87.5%~97.4%之间,而且RSD(n=6)均小于2%。结论该方法准确可靠,分离效果好,可用于破壁灵芝孢子粉多糖的单糖组成分析。     

五倍子多糖相对分子质量和单糖组成的测定

目的:研究五倍子多糖精细组分的相对分子质量、单糖组成。方法:五倍子多糖经提取纯化后得到GCP-1,GCP-2和GCP-3 3种精细组分。用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析其相对分子质量;采用三氟乙酸(TFA)水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化的高效液相色谱(HPLC)分析其单糖组成。结果:HPGPC试验结果显示,GCP-1,GCP-2,GCP-3的相对分子质量分别为182,2.1×10~4,6×10~4;单糖组成试验表明,GCP-2和GCP-3的单糖组成类型基本一致,主要为半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等。结论:用HPGPC和PMP柱前衍生法测得五倍子多糖精细组分的相对分子质量和单糖组成,方法简便可行,可用于五倍子多糖的研究。     

铁皮石斛花多糖相对分子质量及其单糖组成的研究

为了明确铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及其单糖组成,该研究采用高效凝胶色谱和柱前衍生UPLC对11个铁皮石斛花样品的多糖进行了相对分子质量及其单糖组成分析,并利用SPSS 19.0软件根据组成的单糖峰面积进行聚类分析,结果表明11个杂交家系铁皮石斛花的粗多糖均分离为三部分(DOP-1,DOP-2和DOP-3),其平均相对分子质量分别为5.53×10~5,3.49×10~5和2.12×10~5。铁皮石斛花多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖5种单糖组成,其中甘露糖组成比例最高,其与葡萄糖比值为0.302~3.335;不同家系样品多糖中各单糖的相对含量存在一定差异,11个家系按单糖组成及相对含量划分为4类,该研究基本明确了铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及单糖构成,为其资源利用打下基础。     

枸杞多糖提取工艺优化及其单糖组成测定

目的:以甘肃省靖远县枸杞为原料,研究枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)的提取工艺,并对其单糖组成进行分析.方法:采用响应面法,考察时间、液料比和温度对LBP提取产率的影响,从而优化提取工艺.利用柱前衍生化高效液相色谱(high performance liquid chr...     

SPE-HPLC-ELSD法测定三七药材中单糖和二糖的含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法,同时测定三七药材中单糖和二糖的含量。方法 HPLC采用Thermo Hypersil GOLDAmino氨基柱(250×4.6 mm),流动相为乙腈-水(75:25),流速0.8mL min-1,ELSD漂移管温度75℃,载气为空气,载气流速2.5 L min-1。结果在该条件下三七药材中的单糖和二糖组分能够得到较好的分离,线性关系良好(相关系数R2>0.99),回收率在98.23%~101.46%之间,且相对标准偏差小于3%。结论该方法简便、准确、灵敏、稳定,适合于三七药材中单糖和二糖的含量测定。     

泡核桃壳多糖中单糖的组成及测定

目的建立泡核桃壳多糖中单糖的组成和定量的检测方法。方法以三氟乙酸水解核桃壳多糖,所获得的多糖水解物加入衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)柱前衍生化,利用高效液相色谱法分析单糖的PMP衍生物。Agilent Venusil XBP-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-醋酸铵缓冲液(pH 5.5)19∶81,体积流量为1.0 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为30℃。结果泡核桃壳多糖由D-甘露糖、鼠李糖、半乳糖、D-半乳糖醛酸、葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、D-阿拉伯糖等11种单糖(有4种未鉴定出的单糖)组成。D-甘露糖、鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿拉伯糖的线性分别为0.041 8～2.09μg,0.045 9～2.295μg,0.043 5～2.175μg,0.042 7～2.135μg,0.040 5～2.026μg,0.043 9～2.195μg,0.047 5～2.375μg;平均加样回收率分别为95.9%、103.1%、104.6%、97.5%、95.8%、87.5%、98.1%,RSD均小于3.0%。在泡核桃壳提取物中D-阿拉伯糖的相对平均含有量最高。结论该方法可以准确地测定出泡核桃壳多糖中含有的单糖及其含有量。     

高效液相法测定黄芪中性多糖的单糖组成

目的:采用高效液相法测定黄芪中性多糖的单糖组成。方法:正交设计优选三氟乙酸水解黄芪中性多糖的条件;水解产物直接采用高效液相-视差检测器(HPLC-RID)检测或经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化后高效液相-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)检测两种方法,以6种单糖为对照,测定水解产物中单糖的组成。结果:黄芪中性多糖的三氟乙酸完全酸水解最佳条件为采用1M TFA,水解温度100℃,水解时间5 h;两种高效液相色谱法测得水解产物中的单糖均为葡萄糖。结论:采用三氟乙酸完全酸水解条件和高效液相色谱法测定单糖的方法简便易行,可用于黄芪中性多糖的单糖组成研究。     

黄精酒制前后多糖单糖组成及抗氧化活性对比研究

目的 探讨黄精酒制前后多糖的单糖组成差异及抗氧化活性的变化。方法 采用L9(34)正交表进行正交试验,确定黄精多糖的最佳水解条件,并对比高效液相色谱-蒸发光散射检测法(High Performance Liquid Chromatography-Evaporative Light Scattering Detection,HPLC-ELSD)、高效液相色谱-示差折光检测法(High Performance Liquid Chromatography-Refractive Index Detector,HPLC-RID)和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱仪-二极管阵列检测法(3-Methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one-High Performance Liquid Chromatography-Diode Array Detector,PMP-HPLC-DAD)3种分析方法的检测效果,确定测定黄精多糖单糖组成的最佳检测方法,考察黄精酒制前后多糖的单糖组成变化,并运用主成分分析法(Principal Components Analysis,...     

柱前衍生HPLC法分析榅桲多糖中单糖组成及PTP1B抑制活性

目的 建立柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定榅桲多糖中单糖的组成及摩尔比,检测榅桲多糖的蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)抑制活性。方法 采用水提醇沉法提取榅桲多糖,并用PTP1B体外模型进行抑制活性测定。榅桲多糖样品经三氟醋酸(TFA)(2 mo1·L-1)和硫酸(2 mo1·L-1)的混合溶液降解为单糖后,经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化,利用RP-HPLC法,检测单糖的PMP衍生物。结果 榅桲多糖中含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等单糖,摩尔比为0.10 ∶ 0.72 ∶ 1.12 ∶ 4.23 ∶ 4.73。榅桲多糖具有良好的PTP1B抑制活性,其IC50为 2.068 μg·mL-1,初步推测榅桲多糖具有抗Ⅱ型糖尿病的潜力。结论 该方法具有简便、快速、重现性好的特点,可用于榅桲多糖的单糖组成分析及质量控制。     

粗茎秦艽多糖GCP-1的分离纯化、结构表征及抗炎活性评价

目的 从粗茎秦艽Gentiana crassicaulis中分离纯化多糖,初步分析其结构特征并研究其体外抗炎活性.方法 采用热水浸提粗茎秦艽粗多糖(Gentiana crassicaulis polysaccharide,GCP),再经Cellulose DE-52纤维素离子交换柱、SephadexG-100柱进行分离...     

柱前衍生HPLC分析酸枣仁汤中多糖的单糖组成

目的:建立1-苯基-3-甲基-5-吡唑琳酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法分离检测4种单糖和2种糖醛酸的方法.方法:采用水提醇沉法提取酸枣仁汤中多糖,中空纤维超滤膜法纯化,然后用硫酸水解,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生后,利用反相高效液相色谱法,分析单糖的PMP衍生物.以单糖PMP衍生物的峰面积大小为指标,分别对衍生化反应中反应时间、PMP与NaOH的用量、中和温度和盐酸用量进行考察,从而得到较佳的样品衍生化制备条件.并将该方法应用于酸枣仁汤中总多糖(SDP)、相对分子量＜10 kDa多糖(SDP-1)、相对分子量为10 ～ 50 kDa多糖(SDP-2)、相对分子量＞ 50 kDa多糖(SDP-3)的单糖组成分析和含量测定.结果:SDP和SDP-1均由Man-GlcUA-GalUA-Glc-Gal-Ara组成,摩尔比分别为1∶0.8∶0.7∶3.4∶3.3∶2.1和1∶0.5∶0.3∶0.6∶0.6∶0.4.SDP-2由Man-Glc-Gal-Ara组成,摩尔比为1∶2.0∶0.2∶0.3;SDP-3由Man-Glc组成,摩尔比为1∶5.4.结论:方法准确、灵敏度高,适用于酸枣仁汤中多糖的单糖组成测定.     

亲水作用色谱-质谱法测定麻黄根多糖单糖的组成

目的:建立一种亲水相互作用色谱-质谱(HILIC-UPLC-MS/MS)检测分析方法,用于直接检测麻黄根多糖的单糖组成。方法:采用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相A为乙腈-水(95∶5),B为乙腈-水(5∶95),柱温60℃,梯度洗脱(0~10 min,92%~70%A;10~10.1 min,70%~92%A;10.1~15 min,92%A),进样量2μL,流速0.2 m L·min~(-1);质谱采用电喷雾离子源,负离子模式下多反应离子检测。Turbo V离子源参数如下:毛细管电压-4.5 k V,源温度550℃;气帘气和碰撞气压力分别设为30 psi和10 psi;雾化气和气化气压力均为55 psi,碰撞电池入口电位和出口电位均为-10 V。结果:该方法在12 min内实现8种未衍生单糖成分的完全基线分离,精密度、稳定性和重复性的RSD均2.1%,各成分的回收率在99.3%~102.5%,RSD在1.5%~2.9%,应用上述建立的方法分别对5批麻黄根多糖进行单糖组成分析,结果显示,麻黄根中检测到5种单糖分别为L-鼠类糖,L-阿拉伯糖,D-甘露糖,D-半乳糖,D-半乳糖醛酸。结论:HILICUPLC-MS/MS方法灵敏度高、重复性好、快速、准确、样品前处理简单、无需衍生化,可用于植物多糖中单糖及寡糖的快速检测。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定地稔多糖中单糖组成

目的:从地稔中提取分离地稔多糖,并对单糖组成进行研究。方法:采用水提醇沉法提取地稔粗多糖,再用DEAE纤维素柱色谱进行分离纯化,获得一种水溶性较好的中性多糖和一种酸性多糖,然后采用高效液相柱前衍生法对其单糖组成进行测定。结果:地稔中性多糖主要是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、鼠李糖等5种单糖组成,摩尔比为123∶84∶27∶19∶5,另有极少量木糖。地稔酸性多糖单糖组成主要是半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖7种单糖组成,摩尔比为14∶10∶7∶6∶4∶1∶1,另外还有少量的木糖。结论:本研究建立了分离及测定地稔多糖组成成分的分析方法,该方法操作简单,方便可行。     

桑黄总多糖的提取及其单糖组成分析

目的:优化桑黄子实体总多糖的提取工艺并初步分析其单糖组成。方法:采用苯酚-硫酸法测定总多糖含量。以总多糖提取率为指标,通过单因素试验和正交试验考察提取时间、提取次数、料液比对桑黄子实体总多糖微波提取工艺的影响,利用TLC初步确定不同产地和树种桑黄总多糖的单糖组成。结果:最佳提取条件为加50倍量水提取5次,每次15 min。东北桑树、东北白桦树、甘肃桑树及湖南桑树桑黄中总多糖提取率分别为5.37%,2.21%,3.04%,3.35%,均含有半乳糖和葡萄糖;山东桑树桑黄总多糖提取率2.77%,含有木糖、半乳糖、葡萄糖和乳糖;未知来源桑树桑黄中总多糖提取率3.58%,含有葡萄糖。结论:微波提取法稳定性好、提取率高。东北桑树桑黄中总多糖含量较高,可初步确定桑黄子实体总多糖中均含有葡萄糖。     

大叶黄精多糖相对分子质量分布及其单糖组成的研究北大核心CSCD

大叶黄精Polygonatum kingianum var.grandifolium春秋两季萌芽、开花,冬季常绿等生物特性与多数黄精属植物存在明显区别,其化学成分随物候发生的积累变化难以借鉴黄精属其他植物的规律,制约了优质药食两用物质的生产。为此,采集重庆秀山大叶黄精样品,采用蒽酮硫酸比色法、高效凝胶色谱和三甲基硅烷(TMS)柱前衍生GC-MS对不同月份、不同龄节的大叶黄精根茎进行了多糖含量、多糖相对分子质量及其单糖组成分析。结果表明:大叶黄精根茎的多糖含量及组成与其生长时期密切相关,新芽萌发促进了多糖的积累,开花结实消耗了多糖,4月份多年生龄节中多糖含量最高,质量分数可达134.04 mg·g^(-1),其多糖按重均相对分子质量(M_(W))大小分为P1(2.02×10^(7))、P2(5.09×10^(6))、P3(1.37×10^(6))、P4(4.73×10^(5))和P5(5.11×10^(3))5个组分,P5含量最高;按组成的单糖分,主要由果糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖和阿拉伯糖组成,6种单糖平均物质的量比1.31∶1.00∶0.90∶0.53∶0.22∶0.21。研究结果为其精准采收和资源利用提供科学依据。     

红毛五加多糖中单糖组成的气相色谱分析

目的:研究红毛五加多糖的单糖组成以及它们的物质的量之比。方法:多糖经三氟醋酸水解后,采用糖腈乙酰酯气相色谱法,利用OV-1毛细管柱分析单糖组成。采用相对校正因子法测定多糖中单糖的物质的量之比。结果:AHP-I含有阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量之比为0.32:0.45:0.20:1.00:0.67;AHP-II含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其物质的量之比为:1.83:5.09:0.79:1.00:5.61;AHP-III含有鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其物质的量之比为:4.63:3.79:1.53:1.05:1.00:3.90。结论:红毛五加的三种多糖AHP-I、AHP-II和AHP-III均由多种单糖构成。OV-1型毛细管柱可用于红毛五加多糖的单糖组成分析。     

枇杷叶多糖分离纯化及其单糖组成研究

目的从枇杷Eriobotrya japonica叶中分离纯化得到枇杷叶多糖,并对其进行相对分子质量和单糖组成分析以及结构的初步鉴定。方法枇杷叶经水提、醇沉、冷冻干燥得到枇杷叶多糖(PEL)组分,经DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱和Sephacryl S 500 High-Resolution凝胶柱色谱进行分离纯化得均一组分(PEL60-A)。采用高效液相色谱、气质联用确定其纯度、相对分子质量和单糖组成。结果枇杷叶多糖PEL60-A相对分子质量为2.69×10~5;单糖组成主要是L-鼠李糖、L-岩藻糖,并含有少量D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖,其物质的量比为0.78∶1.00∶0.15∶0.09∶0.11∶0.19。结论研究枇杷叶多糖分离纯化及其单糖组成,对其结构进行了初步鉴定,为枇杷叶精细加工提供重要的科学理论依据。     

女贞子多糖相对分子质量与组成分析

目的透析进一步纯化女贞子多糖,通过对女贞子多糖相对分子质量及组成分析,为探究多糖生物活性与其组成之间的关系提供理论数据。方法实验以女贞子为研究对象,采用水提醇沉法提取女贞子多糖,通过Sevage法、过氧化氢、透析等方法纯化多糖,凝胶渗透色谱分析多糖相对分子质量,三氟乙酸水解后采用高效液相色谱-示差检测器分析多糖组成。结果女贞子多糖重均相对分子质量为10721,数均相对分子质量为10673,女贞子多糖由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖3种单糖所组成,其物质的量比为9.14∶8.10∶5.18。结论此种方法纯化后的女贞子多糖组成较为均一,纯度较高,采用高效液相色谱-示差检测器无需柱前衍生化即可分析多糖中单糖组成。     

微波辅助提取-柱前衍生高效液相色谱法分析板蓝根多糖的单糖组成

目的 建立了一种微波辅助提取柱前衍生高效液相色谱法测定板蓝根多糖的单糖组成.方法 采用了微波辅助提取,PMP柱前衍生单糖,Dikma -C18色谱柱,流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液,检测波长为250 nm.结果L-鼠李糖,D-葡萄糖和D-半乳糖在0.156 ～62.5 μg/ml浓度范围内线性关系良好(r＞0.9995),板蓝根多糖主要由D-葡萄糖、L-鼠李糖和D-半乳糖组成.结论该方法简便、快速、准确,适用于分析测定板蓝根多糖的单糖组成.