鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶检测及耐药性分析

目的:了解鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶的产生情况及耐药特点.方法:用酶提取物三维试验分别检测98株鲍曼不动杆菌ESBLs、AmpC酶产生情况,并用VITEK60型全自动微生物分析系统和K-B纸片扩散法检测其对多种抗生素的耐药性.结果:98株鲍曼不动杆菌中,共检测到ESBLs阳性株7株,阳性率为7.1%(7/98);AmpC酶阳性株17株,阳性率为17.3%(17/98).AmpC酶阳性株均呈多重耐药,其对多种抗生素的耐药性明显高于AmpC酶阴性株.结论:产AmpC酶是我院鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因,应加强对AmpC酶的检测及其感染者的治疗.     

西安地区鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶基因研究

目的 明确西安地区临床分离的鲍曼不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型,研究多重耐药菌株的耐药机制.方法 采用K-B法测定鲍曼不动杆菌对15种抗菌药物的敏感性,利用改良三维试验进行表型确认,对表型检测阳性及阴性菌株采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析β-内酰胺酶基因型.结果 共有84株产ESBLs,其中有45株产PER-1型ESBLs,58株产TEM-1型ESBLs,19株同时产PER和TEM两型ESBLs,未扩增出SHV型ESBLs.改良三维试验阳性菌株有4株未扩增出ESBLs,改良三维试验阴性菌株有13株扩增出ESBLs.结论 西安地区临床分离的鲍曼不动杆菌至少存在2种不同类型的ESBLs,基因型分别为PER-1、TEM-1,且同一质粒携带2种或2种以上ESBLs编码基因在西安地区有流行的趋势.     

革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药相关性

目的了解革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况及其耐药性，指导临床合理用药。方法K—B法检测184株革兰阴性杆菌对11种抗生素的耐药性；采用头孢西丁（FOX）药敏纸片进行AmpC酶的初筛，通过酶提取物三维试验方法确证产AmpC酶细菌；采用NCCLS推荐的纸片扩散确证试验检测184株革兰阴性杆菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的情况。结果184株革兰阴性杆菌中，AmpC酶阳性率为23．3％主要产生菌为鲍曼不动杆菌57．7％，铜绿假单胞菌37．5％，AmpC酶阳性菌对头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）、复方新诺明（SXT）、左旋氧氟沙星（LEV）、哌拉西林（PRL）、氨曲南（ATM）、头孢他啶（CAZ）、阿米卡星（AK）、头孢吡肟（FEP）、美洛培南（MEM）的耐药率分男11为94．7％、86．8％、84．2％、81．6％、71．0％、68．4％、68．4％、55．3％、50．O％、5．3％；38株大肠埃希菌和26株肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率分别为42．1％、23．1％，ESBLs阳性菌对头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）、哌拉西林（PRL）、氨曲南（ATM）、复方新诺明（SXT）、头孢他啶（CAZ）的耐药率较高。对头孢吡肟（FEP）、阿米卡星（AK）、头孢西丁（FOX）、美洛培南（MEM）的耐药率较低，对左旋氧氟沙星（LEV）的耐药率大肠埃希菌则远高于肺炎克雷伯菌。结论在革兰阴性杆菌中，AmpC酶和ESBLs产生情况已相当严重，应重视对其的检测；产酶菌与非产酶菌对抗生素的耐药性有明显区别；临床用药以碳青霉烯类如美洛培南（MEM）为首选。     

革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的检测与分析

目的：了解革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶的产生情况，为临床用药提供参考依据。方法：用纸片扩散确证试验检测345株革兰阴性杆菌的ESBLs产生情况，同时用酶提取物三维试验检测其中194株菌的AmpC酶产生情况。结果：革兰阴性杆菌中，ESBLs阳性率为30．4％，主要产生菌为阴沟肠杆菌68．2％，大肠埃希菌45．9％，肺炎克雷伯菌31．0％；AmpC酶阳性率为11．9％，主要产生菌为阴沟肠杆菌29．5％，鲍曼不动杆菌18．2％。结论：在革兰阴性杆菌中ESBLs、AmpC酶产生情况已相当严重和普遍，应重视对这两类酶的检测。     

亚胺培南耐药鲍氏不动杆菌AmpC酶、ESBLs及金属酶检测和耐药分析

目的 分析我院亚胺培南耐药鲍氏不动杆菌(IRABA)临床分离株头孢菌素酶(AmpC酶)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和金属β-内酰胺酶(MBLs)的产生情况及其耐药特点.方法 应用VITEK-2全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,采用改良三维试验方法同时检测2008年1月-2009年9月我院临床分离的63株IRABA的ESBLs和AmpC酶,2-巯基丙酸协同试验检测MBLs.结果 63株IRABA中,45株(71.4 %)AmpC酶阳性,13株(20.6 %)ESBLs阳性,其中8株(12.7 %)同时产AmpC酶和ESBLs,未检出产MBLs 菌株.AmpC酶阳性菌对12种抗生素的耐药率明显高于AmpC酶阴性菌,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 本组IRABA主要产AmpC酶,且多重耐药现象严重.     

超广谱β-内酰胺酶基因型分析

目的 了解同济医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌基因型分布状况.方法 采用纸片扩散法检测产ESBLs细菌,通过基因扩增、序列分析技术研究ESBLs基因型.结果 49株产ESBLs细菌中,以CTX-M-14(n=33)亚型最常见,其它亚型包括CTX-M-3(n=3)、CTX-M-9(n=1)、CTX-M-12(n=1)、CTX-M-15(n=1)、CTX-M-24(n=1)、SHV-5a(n=1),1株细菌同时产CTX-M-3、CTX-M-14两种CTX-M型ESBLs;4株表型确证试验阳性细菌未能分型.结论 同济医院ESBLs基因型以CTX-M酶为主,CTX-M-14亚型最常见,亦存在SHV-5a,CTX-M-12、15中国少见亚型.     

产超广谱β-内酰胺酶和质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌耐药性检测

目的探讨泰安市产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌的耐药性。方法2005年1月至2006年7月我院临床分离的肺炎克雷伯菌251株,用Kirby-Bauer法进行药敏试验,根据NC-CLS2002年判断标准分析结果。结果251株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs和高产AmpC酶154株,检出率61.4%,其中单产ESBLs143株,单产AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs3株,总检出率分别为57.0%,3.19%和1.20%。其中3株同时产AmpC酶和ESBLs的肺炎克雷伯菌对头孢菌素、酶抑制剂、氨曲南、头孢西丁都耐药,1株对亚胺培南耐药。单产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢曲松、头孢噻肟、左氧氟沙星耐药率在70%以上,对美罗培南、亚胺培南敏感性好。单产AmpC酶的肺炎克雷伯菌对头孢菌素,酶抑制剂的抗菌药物都耐药,对亚胺培南,头孢吡肟敏感。结论产ESBLs和高产AmpC酶是导致肺炎克雷伯菌耐药的两类主要酶,产酶株对多种抗菌药物耐药,对美罗培南、亚胺培南敏感性好.     

鲍曼不动杆菌SHV-12型超广谱β内酰胺酶基因研究

目的：分析自临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌SHV型β-内酰胺酶耐药基因序列，并确定其所产ESBLs亚型。方法：从住院病人的送检标本中分离的60株鲍曼不动杆菌中，经药敏试验、ESBLs表型确证试验和SHV型β内酰胺酶耐药基因的聚合酶链反应(PCR)检测，筛选出1株具有多重耐药特性、ESBLs表型和SHV基因型均阳性的分离株(HZ02株)，对其耐药基因进行序列分析。结果：HZ02株基因片段长825个核苷酸，与Nuesch-Inderbinen等从肠杆菌中发现的SHV—12型ESBLs编码基因序列(GenBank注册号：X98105)完全相同。结论：HZ02株鲍曼不动杆菌可产生SHV—12型ESBLs，从而证实了我国临床分离的鲍曼不动杆菌中存在产SHV—12亚型ESBLs菌株。其序列已在美国核酸数据库(GenBank)登录(注册号：AY29163)。     

革兰阴性杆菌β-内酰胺酶表型和基因型研究

目的了解铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)和金属β-内酰胺酶(MBL)的分布情况,并检测产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型鉴定。方法采用三维试验检测革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶,纸片协同法检测MBL,用聚合酶链反应(PCR)对ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行TEM型、SHV型、CTX-M型三种耐药基因检测并克隆测序。结果356株革兰阴性杆菌检出产酶株90株,检出率25.3%。单产ESBLs革兰阴性杆菌57株,检出率16.0%,以肺炎克雷伯(31.6%)、大肠埃希菌(31.0%)检出率高;单产AmpC酶4株,检出率1.1%,其中阴沟肠杆菌3株;同时产ESBLs和AmpC酶16株,检出率4.5%,以鲍曼不动杆菌(12.5%)检出率最高;产MBL细菌13株,均为非发酵菌,以嗜麦芽窄食单胞菌检出率最高,为71.4%。17株ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌有16株检出ESBLs耐药基因,其中CTX-M型15株(88.2%),TME型13株(76.1%),SHV型2株(11.8%),有11株细菌同时带有两种ESBLs基因,1株带有3种ESBLs基因。结论革兰阴性杆菌产生ESBLs、AmpC酶和MBL多种β内酰胺酶,铜陵地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX-M型为主。     

下呼吸道感染细菌超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶的检测

2000年1月至2003年1月我院呼吸科下呼吸道标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶细菌检出率分别为16.7%和9.8%,产酶株组均不同程度表现为多重耐药,给临床抗感染治疗带来困难.     

肺炎克雷伯菌超超广谱β-内酰胺酶的检测分析

目的分析肺炎克雷伯菌超超广谱β-内酰胺酶(SSBLs)的检测结果,指导临床合理使用抗菌药物,控制感染传播。方法对2011年4月-2013年4月门诊分离的89株肺炎克雷伯菌,应用纸片增强法检测其产生的SSBLs。结果 89株肺炎克雷伯菌中检出ESBLs阳性42株,占47.2%;AmpC酶阳性19株,占21.3%;SSBLs阳性7株,占7.9%。结论加强肺炎克雷伯菌SSBLs检测,为临床合理使用抗菌药物提供依据,减少医院内感染的发生。     

超广谱β-内酰胺酶的分子生物学研究进展

超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)由质粒介导,能水解青霉素、广谱头孢菌素及单环类抗生素并产生耐药。大部分超广谱β-内酰胺酶是由广谱β-内酰胺酶TEM-1和SHV-1突变而来,此外还有CTX-M族、OXA族以及不属于上述任何一个家族的类型,本文主要对近年来有关β-内酰胺酶的分类、ESBLs的特性等分子生物学研究进展进行综述。     

产AmpC酶及或产超广谱β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌的检测及耐药性研究

目的 了解阴沟肠杆菌产AmpC酶或同时产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的临床现状,检测阴沟肠杆菌对常用13种抗生素的耐药性,以指导临床合理选择抗生素.方法 采用三维实验确证产AmpC酶和产ESBLs菌株;用纸片扩散法进行耐药性检测.结果 分离出阴沟肠杆菌120株,AmpC酶菌株检出率为20.0%(24/120),ESBLs菌株检出率为25.0%(30/120),同时产AmpC酶和ESBLs即SSBL检出率为12.5%(15/120).阴沟肠杆菌SSBL菌株对左氧氟沙星、头孢吡肟和氨曲南的耐药率高于单产AmpC酶的菌株,差异具有统计学意义(P<0.05);SSBL菌株对亚胺培南、头孢西丁、环丙沙星的耐药率高于ESBLs菌株,差异有统计学意义(P<0.05);SSBL菌株对亚胺培南、头孢吡肟、头孢曲松、环丙沙星的耐药率高于不产AmpC酶及ESBLs即SSBL阴性的菌株,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 AmpC酶和ESBLs是导致阴沟肠杆菌对第3代头孢菌素耐药的重要原因,SSBL菌株的流行增强了此类菌株的耐药性,治疗阴沟肠杆菌感染时应以耐药检测结果为依据,可根据药敏结果考虑选用碳青酶烯类、喹诺酮类抗生素.     

174株革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶检测分析

目的了解革兰氏阴性杆茵产超广谱β-内酰胺酶(ESBL).方法采用法国生物梅里埃VITEK32细菌分析系统对174株临床标本分离出的革兰氏阴性杆菌进行生化鉴定及药敏分析.结果检出产ESBL菌21株,为12.1%;其中大肠埃希氏菌13株;肺炎克雷伯菌5株;铜绿假单胞菌2株;阴沟肠杆菌1株;ESBL菌对β-内酰胺类、青霉素类、氨基糖甙类、喹诺酮类、磺胺类几乎全部耐药.但亚胺培南对ESBL菌有很强的抑菌作用.结论ESBL菌株产生来源于抗生素的滥用,从而导致交叉耐药菌及多重耐药茵的产生,所以合理选择抗生素,控制ESBL传播和流行具有深刻意义.     

β-内酰胺酶及超广谱β-内酰胺酶的研究进展

β-内酰胺抗生素制剂是目前世界上最普通的细菌感染的治疗方法,但近年来,细菌对抗生素的耐药性的发生率越来越高[1],而细菌耐药性最常见的机制是β-内酰胺酶的产生[2],这些酶的种类非常多,并且在抗生素使用过程中的选择压力下经常发生变异,导致了超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)类的发展[3]。其TEM及SHV基因发生变异的例子,主要发生在E.coli和K.peneumoniae中,特别是在医院偶发或爆发感染的产ESBLs菌株,结果造成了治疗费用的增加及住院时间的延长。为弄清细菌耐药机制,并选择适当的抗生素,给医院的治疗提供更好指导,本文就近年来β-内酰胺…     

南京地区产超广谱β-内酰胺酶菌的流行病学调查

目的:了解南京地区产ESBLs菌基因型的流行情况。方法:用TEM型、SHV型、CTX-M型、OXA型ESBLs的特定引物进行扩增并对扩增产物进行测序分析确定基因型。结果:30株产ESBLs大肠埃希菌和30株产ESBLs肺炎克雷伯菌未发现TEM型、SHV型、OXA型ESBLs,51株产CTX-M型ESBLs,主要为CTX-M-3、CTX-M-14。9株未扩增到ESBLs基因型。结论:南京地区产ESBLs菌基因型主要以CTX-M型为主。     

铜绿假单胞菌生物被膜中AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测

目的检测铜绿假单胞菌生物被膜(Biofilm,BF)中AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases,ESBLs)的产生率,并观察其对耐药性的影响.方法用改良平板培养法在硅胶膜上建立铜绿假单胞菌BF的体外模型.用银染法及扫描电镜对BF进行鉴定.应用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC).应用三维试验检测AmpC酶和ESBLs,等电聚焦电泳测定β-内酰胺酶的等电点.结果50株铜绿假单胞菌BF中AmpC酶的产生率为82.o%(41/50),ESBL的产生率为16.0%(8/50),AmpC酶和ESBLs均阳性的占10.0%(5/50),AmpC酶和ESBL均阴性的占12.0%(6/50).浮游组中AmpC酶的产生率为60.0%(30/50),ESBLs的产生率为14.0%(7/50),AmpC酶和ESBL均阳性的占8.0%(4/50),AmpC酶和ESBLs均阴性的占34.0%(17/50).结论生物被膜铜绿假单胞菌的耐药性与其中β-内酰胺酶的产生,尤其是AmpC酶的产生有关.     

多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因型研究

目的:了解我院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因分布情况。方法:用三维试验检测15株多重耐药鲍曼不动杆菌ESBLs、AmpC、MBL(金属β-内酰胺酶)产酶情况;用PCR方法检测各种β-内酰胺酶基因。结果:三维试验检出2株菌产ESBLs;9株菌产AmpC;3株菌合产ESBLs和AmpC酶;3株菌产MBL(均同时产AmpC)。PCR检出15株菌均携带blaTEM基因;2株菌携带blaPER-1基因;14株菌携带AmpC基因;未检出产金属β-内酰胺酶基因。结论:我院多重耐药的鲍曼不动杆菌多含有blaTEM基因和AmpC基因,也首次发现部分产PER型ES-BLs鲍曼不动杆菌。     

革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶检测的探讨

临床发现，越来越多的革兰阴性杆菌对三代头孢类抗生素耐药，其主要原因是细菌质粒介导产生的超广谱β－内酰胺酶（Extended Spectrum β－Ｌ；ESBLs）所致。研究发现。产ESBL细菌主要集中在肠杆菌科细菌，以肺炎在雷伯杆菌和大肠埃希氏菌为主，另外有阴沟肠杆菌、沙雷氏菌、产碱杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等其它革兰阴性杆菌也有报道。由于产ESBL的菌株往往携带多重耐药基因，表现在不仅β－内酰类抗生素耐药。而且对氨基甙类、喹诺酮类抗生素也耐药，给临床治疗带来极大困难。目前产ESBL菌株有增多趋势并可引起医院感染的暴发流行。所以，ESBL的检测在临床上具有重要意义。目前，尽管检测ESBL的方法众多，但仍无令人满意的统一方法。本文对目前实验室较常采用的单纸片琼脂扩散试验（SD）法、双纸片协同试验（CD法）和Etest三种方法检测ESBL作一初步探讨。