HPLC 法测定尖叶假龙胆中3 个[口山]酮苷的含量

目的：建立HPLC 法同时测定尖叶假龙胆中的1,5-dihydroxy-3-methoxyxanthone 8-O-β-Dglucopyranoside（F1）、1-hydroxy-3,4-dimethoxyxanthon 7-O-β-D-glucopyranoside （F2）、1,8-dihydroxy-3,4-dimethoxyxanthone 5-O-β-D-glucopyranoside（F3）3 个[口山]酮苷的含量。方法：Thermo syncronis C18（4.6 mm× 250 mm,5 μm）色谱柱,乙腈-水（24.5∶75.5,V/V）等度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长为254 nm,柱温为35益。结果：F1、F2、F3 分别在14.06~281.28 μg·mL-1（R2=0.999 7）、0.56~11.16 μg·mL-1（R2=0.999 8）、0.46~9.20 μg·mL-1（R2=0.999 9）范围内线性关系良好;平均回收率（n=9）分别为99.70%（RSD=1.06%）、99.78%（RSD=1.21%）、100.28%（RSD=1.15%）。结论：该方法能快速、简便地测定尖叶假龙胆中3 个主要的[口山]酮苷的含量,为该药材的质量控制研究提供了参考。     

HPLC法测定尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮含量

目的:建立HPLC法同时测定尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮的含量。方法:色谱柱:Thermo Syncronis C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:0.5%磷酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,0~15 min,40%~45%B,15~30 min,45%~60%B;检测波长:254 nm;柱温:30℃;流速:1.0 m L·min-1。结果:雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮分别在1.99~79.52μg·m L-1(R2=0.999 9)、2.28~56.90μg·m L-1(R2=0.999 7)范围内线性关系良好;平均加样回收率(n=9)分别为100.01%(RSD=1.50%)、100.65%(RSD=1.14%)。结论:该方法简便、快速、准确、可靠,为尖叶假龙胆的质量控制提供参考。     

基于HPLC指纹图谱研究和多成分含量测定的尖叶假龙胆药材的质量评价研究

目的：建立尖叶假龙胆高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱并同时测定其中8种成分含量测定方法。方法：本方法采用HPLC,色谱柱为Waters XBridge C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm),乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长为254 nm,同时测定18批尖叶假龙胆组指纹图谱及8种成分含量。结果：18批尖叶假龙胆指纹图谱相似度大于0.990,标定了20个共有峰并测定了8种成分含量。结论：多成分含量测定方法以及指纹图谱方法准确、稳定、重复性好,可为尖叶假龙胆质量控制标准的建立提供依据。     

高速逆流色谱法分离尖叶假龙胆中[口山]酮类活性成分

目的:建立利用高速逆流色谱法分离尖叶假龙胆中两个主要的[口山]酮类活性成分雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮的方法。方法:先后采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(9:10:9:10,v/v/v/v)和正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(6:5:6:5,v/v/v/v)两个溶剂系统,进行梯度洗脱,对尖叶假龙胆乙酸乙酯提取物进行分离,对所得馏分用Sephadex LH-20进行纯化,所得单体利用UV、MS和NMR数据确定其结构。结果:分离得到两个具有显著生理活性的[口山]酮类成分雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮。结论:高速逆流色谱法是一种有效的分离制备尖叶假龙胆中[口山]酮类活性成分雏菊叶龙胆酮和去甲基雏菊叶龙胆酮的方法。     

尖叶假龙胆中酮类成分的分离与鉴定

采用硅胶、ODS柱色谱和制备型HPLC等色谱技术从尖叶假龙胆乙醇提取物中分离得到12个酮类成分,经MS和NMR等波谱技术分别鉴定为1,7-二羟基-3-甲氧基酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1),紫药苷(2),1,3,8-三羟基-4,5-二甲氧基酮-1-O-β-D-吡喃葡萄糖基(6→1)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),1,2,8-三羟基-5,6-二甲氧基酮-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4),1,3,7,8-四羟基酮-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),1,3,5,8-四羟基-5,6,7,8-四羟基酮(6),1,3,5-三羟基酮(7),1,3,5,8-四羟基酮(8),1,2,8-三羟基-5,6-二甲氧基酮(9),雏菊叶龙胆酮(10),芒果苷(11),当药醇苷(12)。化合物1~9均为首次从假龙胆属中分离得到。     

尖叶假龙胆化学成分的研究

目的研究尖叶假龙胆Gentianella acuta(Michx.)Hulten的化学成分。方法尖叶假龙胆70%乙醇提取物的30%、90%乙醇部位采用硅胶、ODS、HPLC制备柱进行分离纯化,根据波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到9个化合物,分别鉴定为小蜡苷Ⅰ(1)、(+)-落叶松脂醇-4-4'-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、(+)-8-羟基-落叶松脂醇-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、(+)-落叶松脂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、(7S,8R)-赤式-7,9,9'-三羟基-3,3'-二甲氧基-8-O-4'-新木脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、(7S,8R)-赤式-4,9,9'-三羟基-3,3'-二甲氧基-8-O-4'-新木脂素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、(7S,8R)-赤式-4,7,9-三羟基-3,3'-二甲氧基-8-O-4'-新木脂素-9'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、蛇菰宁(8)、urolignoside(9)。结论化合物2~9为首次从假龙胆属植物中分离得到。     

尖叶假龙胆中龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量测定

目的:建立HPLC方法同时测定尖叶假龙胆中龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量。方法:采用Cosmosil 5C18-MS-II(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱程序为0~10min,10%→33%(A);10~20min,33%(A),流速1.0mL/min,检测波长247nm,柱温30℃。结果:龙胆苦苷、獐牙菜苷的分别在10.95~438.0μg/m L,7.61~304.4μg/m L浓度范围内线性关系良好,回归方程的相关系数r分别为0.9996、0.9995;龙胆苦苷、獐牙菜苷的平均加样回收率(n=6)为98.8%,100.1%。结论:该方法能够快速、准确的测定尖叶假龙胆中龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量。     

尖叶假龙胆的化学成分和药理作用研究进展

分析尖叶假龙胆的化学成分和药理作用。尖叶假龙胆主要化学成分为口山酮类化合物、环烯醚萜类化合物和木脂素类化合物,除此还有三萜类化合物、黄酮类化合物和甾体类化合物。尖叶假龙胆具有清热解毒、利胆退黄等功效,具有抗心律失常、抗心肌缺血、保护肝脏、抗肿瘤、改善胰岛素抵抗、抗氧化和抗炎等药理作用。     

栽培条叶龙胆各形态类型龙胆苦苷含量的测定

目的 :研究条叶龙胆栽培种群中形态变异与根中龙胆苦苷含量之间的相关性 ,探讨条叶龙胆有效成分高含量育种的可行性。方法 :自条叶龙胆栽培种群中选出 5个形态类型 ,即正常 (野生 )型、白花型、粗根型、宽叶Ⅰ型和宽叶Ⅱ型 ,采用高效液相色谱法测定根中龙胆苦苷含量。结果 :不同类型之间的龙胆苦苷含量差异较大 ,以粗根型为最高 ,其他依次为正常 (野生 )型、宽叶Ⅰ型、白花型、宽叶Ⅱ型 ;而同一类型的根系中龙胆苦苷含量与根龄呈正相关 ,即 3龄根 >2龄根 >1龄根。结论 :栽培条叶龙胆在形态上发生明显变异的同时有效成分含量亦发生显著变化 ,进行高含量育种是可行的 ,可以以某一形态性状作为高含量育种的选择指标。     

新疆假龙胆的化学成分研究与含量测定

目的:对新疆假龙胆全草进行化学成分初步研究,并对分离得到酮类化类物进行定量分析。方法:采用75%乙醇回流法对新疆假龙胆全草进行提取,粗提物经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次梯度萃取制备不同极性部分,将石油醚部分和乙酸乙酯部分浸膏分别用硅胶柱层析和葡聚糖凝胶LH-20柱层析分离纯化,所得单体化合物经EI-MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR等光谱法进行结构鉴定;建立高效液相测定方法测定新疆假龙胆中3个酮类化合物的含量。结果:从新疆假龙胆中分离得到6个化合物,分别为1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮(1)、1-羟基-3,5,8-三甲氧基酮(2)、1-羟基-3,5-二甲氧基酮(3)、木犀草素(4)、胡萝卜素(5)和β-谷甾醇(6);含量测定方法学结果表明1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮、1-羟基-3,5,8-三甲氧基酮和1-羟基-3,5-二甲氧基酮3个酮化合物分离度较好,分别在35.7~713.4、32~1280、34.3~686 ng时与峰面积呈良好的线性关系,精密度试验RSD分别为0.31%、0.27%、0.25%,稳定性实验的RSD分别为1.05%、1.33%、1.58%,重复性实验的RSD分别为2.48%、0.82%、2.63%,加样回收率分别为103.1%(RSD=1.25%)、100.02%(RSD=0.93%),95.10%(RSD=2.62%);1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮等3个化合物的含量范围分别为0.21%~0.28%、0.65%~0.77%、0.19%~0.15%。结论:新疆假龙胆含有黄酮类、酮类和甾醇类化合物;经方法学考察,本研究建立的高效液相测定方法适合新疆假龙胆中1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮等3个化合物的测定;新疆假龙胆中1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮等3个化合物的含量较高。     

Hepatoprotective studies on Sida acuta Burm. f.

Ethnopharmacological relevance

Sida acuta Burm. f. (Malvaceae) is used in Indian traditional medicine to treat liver disorders and is useful in treating nervous and urinary diseases and also disorders of the blood and bile.

Aim of the study

Evaluation of the hepatoprotective properties of the methanolic extract of the root of Sida acuta (SA) and the phytochemical analysis of SA.

Materials and methods

The model of paracetamol-induced hepatotoxicity in Wistar rats, liver histopathological observations, hexobarbitone-induced narcosis and in vitro anti-lipid peroxidation studies were employed to assess the hepatoprotective efficacy of SA. Phytochemical assay of SA was conducted following standard protocols.

Results

Significant hepatoprotective effects were obtained against liver damage induced by paracetamol overdose as evident from decreased serum levels of glutamate pyruvate transaminase, glutamate oxaloacetate transaminase, alkaline phosphatase and bilirubin in the SA treated groups (50, 100, 200 mg/kg) compared to the intoxicated controls. The hepatoprotective effect was further verified by histopathology of the liver. Pretreatment with Sida acuta extract significantly shortened the duration of hexobarbitone-induced narcosis in mice indicating its hepatoprotective potential. Phytochemical studies confirmed the presence of the phenolic compound, ferulic acid in the root of Sida acuta, which accounts for the significant hepatoprotective effects observed in the present study.

Conclusion

The present study thus provides a scientific rationale for the traditional use of this plant in the management of liver disorders.     

HPLC测定长形肉豆蔻中木脂素类成分的含量

目的 :分析长形肉豆蔻中木脂素类成分,为质量评价提供依据。 方法 :采用高效液相色谱法,色谱柱为TC-C₁₈(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相乙腈-磷酸三乙胺(55 ∶45),柱温40 ℃,检测波长270 nm。 结果 :内消旋二氢愈创木酸在0.286 0~1.716 0 μg呈现良好的线性关系( r =0.999 8),长形肉豆蔻中内消旋二氢愈创木酸的平均含量为0.833 7 mg ·g^-1。erythro-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-4-(3,4-methylenedioxy phenyl)-2, 3-dimethy lbutan在0.320~1.920 μg 呈现良好的线性关系( r =0.999 8),长形肉豆蔻中erythro-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-4-(3,4-methylenedioxy phenyl)-2, 3-dimethy lbutan的平均含量为0.572 4 mg ·g^-1。 结论 :高效液相色谱法可以准确的测定长形肉豆蔻中木脂素类成分的含量,方法简单可行。     

HPLC测定海南青牛胆中盐酸巴马汀的含量

目的:建立海南青牛胆药材中盐酸巴马汀的HPLC含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,Agilent TC-C18(4.6 mm ×250 mm,5μm)柱,流动相为乙腈-0.4％三乙胺水溶液(24∶76),用磷酸调pH至4.0,流速1.0mL·min-1,检测波长347 nm,柱温40℃.结果:盐酸巴马汀在线性范围0.006～0.15 mg(r =0.999 9).平均回收率为99.8％,RSD 0.8％.结论:该测定方法精密度高,重复性好,可作为海南青牛胆中盐酸巴马汀的含量测定方法.     

HPLC测定金莲花中金莲花碱的含量

目的:建立金莲花中金莲花碱的含量测定方法,并测定市售金莲花药材中金莲花碱的含量。方法:采用高效液相色谱法,Agilent C18 ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%醋酸溶液(0～30 min,2∶98～100∶0),流速为1.0mL.min-1,检测波长为258 nm。结果:金莲花碱在0.138 0～1.241 0μg呈良好的线性关系,购自全国各地的9批金莲花药材中的金莲花碱为0.05%～0.11%。结论:本方法精密、准确、重现性好,可用于测定金莲花中金莲花碱的含量。     

HPLC测定不同商品水红花子中N-p-香豆酰酪胺的含量

目的:建立活性成分N-p-香豆酰酪胺含量的测定方法.为水红花子质量控制提供新的评价指标.方法:采用HPLC,色谱柱为Agilent C_(18)(4.6 mm ×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水(40:60),检测波长为290 nm,流速为1.0 mL·min~(-1),柱温为25℃.结果:N-p-香豆酰酪胺的进样鼍在0.038～0.190μg线性良好(r=0.999 9),平均回收率98.7%,RSD 2.4%.结论:所建立的方法简单、准确、重复性好,可用于测定水红花子中N-p-香豆酰酪胺的含量.     

HPLC测定不同生长期鸭跖草中异荭草素的含量

目的:研究中药鸭跖草中黄酮类成分异荭草素的含量测定方法,并比较不同生长期鸭跖草中异荭草素的含量,以确定最佳采收期。方法:采用AgilentTC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(15∶85)为流动相,流速1mL·min-1,紫外检测器检测。结果:异荭草素的线性范围0.08～1.00μg,平均回收率101.2%,不同生长期对样品的异荭草素含量有显著影响,成熟期含量最高。结论:该方法便捷、有效,适用于检测鸭跖草中异荭草素含量,为其质量标准的制定提供依据,对确定鸭跖草的最佳采收期提供参考。     

HPLC测定宁夏枸杞中东莨菪素和东莨菪苷含量

目的:采用高效液相色谱法,建立宁夏枸杞中东莨菪素和东莨菪苷的含量测定方法.方法:色谱条件,Diamonsil C8柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相A为乙腈-水-醋酸(5∶94.5∶0.5),流动相B为乙腈-水-醋酸(72∶27.5∶0.5),梯度洗脱.流速1 mL· min-1,柱温30℃,检测波长346 nm.结果:东莨菪素在0.1 ～10 mg·L-1线性关系良好,回归方程Y=32 568X+637.8(r2 =0.999 9),平均回收率98.2％,RSD 1.45％;东莨菪苷在0.1～ 10 mg·L-线性关系良好,回归方程Y=23 951X+746.7(r2=0.999 9),平均回收率101.6％,RSD 1.27％.结论:该方法准确可靠,可用于测定宁夏枸杞中东茛菪素和东莨菪苷的含量,为宁夏枸杞开发利用提供理论依据.     

HPLC测定淡竹叶中日本当药黄素的含量

目的:建立中药淡竹叶中日本当药黄素的RP-HPLC含量测定方法。方法:高效液相色谱法,采用Cosmosil 5 C18-ms-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.05%醋酸水溶液(14:86),流速1.0 mL·min-1,分析时间20 min,检测波长350 nm,进样体积10μL。结果:日本当药黄素进样量与峰面积呈良好线性关系,线性范围为0.3～5.0μg,r=1.000 0(n=5),回收率为100.2%(n=6)。结论:该方法首次测定了8个地区淡竹叶药材中日本当药黄素的含量,该方法准确、简便、重复性好。     

HPLC同时测定荜茇中胡椒碱和荜茇明宁碱含量

目的:采用HPLC同步测定荜茇中胡椒碱和荜茇明宁碱的含量,为荜茇药材多指标质量控制奠定基础.方法:以荜茇药材中胡椒碱和荜茇明宁碱为指标成分,应用C18(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,流动相0.25％甲酸-甲醇(35∶65),流速为1 mL·min-1,检测波长343 nm,柱温40℃.结果:胡椒碱和荜茇明宁碱的峰面积与浓度的线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为100.4％,102.2％,RSD分别为2.6％,2.5％.建立了同时对荜茇中的2个成分进行定量的测定方法,并将此方法用于不同来源的荜茇各成分的测定.结论:该方法简便快捷,重复性良好,为中药材荜茇提供了更合理、可靠的质控方法.