延胡索乙素逆转多药耐药性人乳腺癌细胞MCF-7

目的:探讨延胡索乙素(Tetrahydropalmatine,Tet)逆转人乳腺癌细胞MCF-7多药耐药的作用机制.方法:采用SRB法测定药物对细胞的毒性作用;通过免疫细胞化学技术分析药物对细胞 Pgp、Lrp、Mrp、Gst、TopoⅡ等多药耐药相关蛋白表达的影响.结果:Tet在浓度小于2.5μg/ml时对MCF-7无毒性作用,2.5μg/ml 的Tet可明显逆转MCF-7/ADM耐药细胞的耐药性.MCF-7/S细胞不表达Pgp,而高表达TopoⅡ;MCF-7/ADM细胞Pgp高表达,但TopoⅡ低表达.Lrp、Mrp、Gst在MCF-7/S及MCF-7/ADM中的表达无明显差异.加入Tet后MCF-7/ADM细胞Pgp蛋白的表达明显下降,Topo的表达显著升高,其它几种蛋白的表达无明显变化.结论:Tet具有逆转MCF-7细胞MDR的作用,主要通过下调肿瘤细胞内Pgp的表达、上调TopoⅡ的表达而达到逆转耐药的效果.     

解毒祛瘀方对乳腺癌细胞MCF-7/ADM的耐药逆转作用

目的:研究解毒祛瘀方对人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM耐药逆转的作用及机制。方法:以MCF-7/ADM细胞为研究对象,利用噻唑蓝(MTT)比色法检测解毒祛瘀方对人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM生长的影响;应用流式细胞术检测肿瘤细胞内罗丹明123(Rh-123)的含量;分别利用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤细胞内多药耐药蛋白1(MDR1),乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)mRNA及蛋白表达变化。结果:与空白组比较,经1.25,2.5 g·L~(-1)解毒祛瘀方作用后,阿霉素对人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM的逆转倍数(RF)分别提升1.7倍和3.0倍(P0.05);人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM中Rh-123含量分别提高了1.8倍和2.5倍(P0.05),MDR1和BCRP蛋白和mRNA表达水平明显下降(P0.05),1.25,2.5 g·L~(-1)解毒祛瘀方MDR1 mRNA表达分别降低35.5%和56.0%(P0.05),BCRP mRNA表达分别降低41.6%和49.5%(P0.05)。结论:解毒祛瘀方可提高人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM对阿霉素的敏感性,逆转该细胞对阿霉素的耐药性,其机制可能与降低MDR1和BCRP蛋白和mRNA的表达,抑制细胞药物外排作用相关。     

补骨脂素逆转人乳腺癌耐药细胞MCF-7／ADR多药耐药性的研究

目的研究具有钙拮抗作用的中药补骨脂素对多耐药性的逆转作用。方法：选用异搏定作阳性对照，观察其对多药耐药细胞系MCF-7／ADR多药耐药性的逆转作用。结果：补骨脂素在非细胞毒性剂量下能使MCF-7／ADR对阿霉素的浓度升高。结论：补骨脂素具有逆转人乳腺癌MCF-7／ADR多药耐药性的作用。     

漏芦抽提剂对人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR的耐药逆转作用研究

目的:研究漏芦抽提剂逆转肿瘤耐药的作用。方法:用漏芦抽提剂及其含药血清处理人乳腺癌耐药细胞株(MCF-7/ADR),以MTT法测定漏芦抽提剂及其含药血清对MCF-7/ADR细胞系的耐药逆转作用。结果:漏芦抽提剂对MCF-7/ADR细胞系具有很强的细胞毒作用,与ADM合用培养96 h细胞死亡率平均为ADM组的1.63倍,与耐药逆转剂维拉帕米(VRP)相比(ADM+VRP组为ADM的1.78倍),无显著性差异(P>0.05)。漏芦抽提剂含药血清(大剂量)和ADM合用时,培养96 h细胞死亡率平均为ADM的1.70倍,这一结果与耐药逆转剂维拉帕米作用结果相似。结论:漏芦抽提剂在逆转肿瘤多药耐药方面可能具有良好的应用前景。     

粉防己碱抗人乳腺癌细胞MCF-7/TAM对三苯氧胺的耐药性研究

目的 探讨粉防己碱（Tet）对耐三苯氧胺（TAM）的人乳腺癌细胞MCF 7/TAM逆转耐药效应及其机制。方法 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定Tet对MCF 7/TAM 细胞的药物毒性及其逆转耐药效果;采用实时荧光定量PCR法检测Tet对MCF 7/TAM 细胞多药耐药相关蛋白1（MRP1）基因影响;采用Western blot法检测MCF 7/TAM 细胞MRP1蛋白变化。结果 Tet对MCF 7/TAM细胞有明显逆转耐药作用,非细胞毒性剂量（0.625 μg/ mL）的Tet逆转耐药倍数为2.0。Tet作用于MCF 7/TAM细胞后,能够下调MRP1基因（P<0. 05）和蛋白表达水平。结论 Tet可逆转MCF 7/TAM细胞的耐药性,逆转机制可能与下调细胞的MRP1表达有关。     

中药逆转乳腺癌细胞多药耐药性的实验研究

目的:从单味中药中筛选具有逆转乳腺癌细胞耐药性的逆转剂.方法:建立乳腺癌耐药细胞的细胞模型,采用SRB法测定单味中药及其对应血清的细胞毒性作用及其逆转作用.结果:理气类中药中延胡索具有对MCF-7/VCR耐药性的逆转作用,而且它的细胞毒作用很小;1.667g/L的延胡索可使MCF-7/VCR的耐药性逆转3.27倍.结论:延胡索能够有效地逆转乳腺癌细胞MCF-7/VCR的耐药性.     

多西紫杉醇联合顺铂治疗晚期乳腺癌临床观察

目的：探讨多西紫杉醇联合顺铂治疗晚期乳腺癌的临床疗效及毒副反应。方法：5％葡萄糖或生理盐水250m1＋多西紫杉醇70mg／m^2静脉滴注,再给予生理盐水200ml＋顺铂25mg／m^2静脉滴注,每日2次,连用3天,化疗前30分钟静注格拉司琼3mg止吐,并用甲氢咪瓜0．6静脉滴注治疗,21天为1周期,2个周期后评价疗效．结果：42例中CR8例,PR21例,SD9例,PD6例,总有效率（CR＋PR）为69．0％,主要毒副反应为消化道反应和白细胞减少。结论：多西紫杉醇联合顺铂治疗晚期乳腺癌疗效较好,毒副反应可耐受。     

中药单体逆转卵巢癌顺铂耐药机制的研究进展

卵巢癌的早期症状不典型并且缺乏有效的筛查方法,多数患者确诊时已是晚期,严重危害当代妇女健康.肿瘤减灭术后以铂类药物为主的化疗是晚期卵巢癌和复发性卵巢癌患者的首选,但几乎所有的复发性卵巢癌患者最终都会发展为铂耐药.因此寻找天然、安全、有效的化疗增敏剂已成为卵巢癌研究中迫切而又重要的课题.随着中药在癌症治疗中的应用日益广泛...     

顺铂耐药机制的研究进展

顺铂在肿瘤化疗中的应用受到细胞获得的或固有的耐药性的影响。顺铂进入细胞中，由氯化物配合体所形成的水合物可以与细胞大分子的亲核性位点相作用，并在细胞的DNA中形成顺铂加合物，这被认为可激发细胞循环的停止和凋亡过程。对顺铂作用机制的认识已经提高了我们对其耐药性的理解。减少的胞内蓄积导致了药物流出的增加，巯基分子例如GSH的过度流入及其钝化作用都导致了细胞对顺铂的耐药性。还有，DNA修复途径中顺铂加合物的过度清除也能导致对顺铂的耐药性。最后，控制细胞凋亡途径有关的信号传导通路调节蛋白的错误表达也能影响对药物的敏感度。     

龙葵碱对乳腺癌MCF-7细胞微管系统的影响

目的研究龙葵碱对乳腺癌MCF-7细胞微管系统的影响。方法 MTT法检测龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪分析龙葵碱对MCF-7细胞周期的影响以及细胞内α-微管蛋白及微管相关蛋白(MAP-2)的变化。结果龙葵碱对MCF-7细胞的IC50为22.08μg/mL,能够将MCF-7细胞阻滞于S期;能够增加MCF-7细胞内α-微管蛋白和MAP-2的量。结论龙葵碱通过升高MCF-7细胞内的微管蛋白及MAP-2的表达,将MCF-7细胞阻滞于S期,从而抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长。     

粉防己碱对人乳腺癌MCF-7细胞线粒体能量代谢的影响

目的研究粉防己碱对人乳腺癌MCF-7细胞线粒体能量代谢的影响,探讨其抗肿瘤作用及其机制。方法采用MTT法检测粉防己碱对MCF-7细胞的细胞毒活性,评价其增殖抑制作用;通过检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)变化、三磷酸腺苷(adenosinetriphosphate,ATP)含量、活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)水平和呼吸电子传递链复合酶I～IV活力,评价粉防己碱对MCF-7细胞线粒体功能的影响;运用细胞能量代谢分析仪对活体细胞能量代谢进行实时全过程分析,评价粉防己碱对MCF-7细胞能量代谢的影响。结果粉防己碱可抑制MCF-7细胞增殖,其半数抑制浓度(50%concentration of inhibition,IC_(50))值为20.13μmol/L;粉防己碱显著降低MCF-7细胞MMP、ATP含量、ROS水平和呼吸电子传递链复合酶I～IV活力(P0.05、0.01);粉防己碱可对MCF-7细胞能量代谢过程中基础氧消耗、ATP产能、线粒体储备能和质子漏产生影响。结论粉防己碱能够通过破坏线粒体功能并减少细胞能量代谢,从而抑制MCF-7细胞增殖。     

葡萄籽提取物对乳腺癌细胞增殖和 Survivin基因表达的影响

目的:观察葡萄籽提取物(GSE)对乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制及对Survivin基因表达的影响,探讨GSE抑制肿瘤的分子生物学机制.方法:GSE剂量分别为40,80,120,160,200 mg·L~(-1),在不同时间段,MTT法检测GSE对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用,计算IC_(50),流式细胞术检测细胞周期变化.RT-PCR方法检测肿瘤细胞中Survivin mRNA表达水平.荧光素酶试剂盒观察GSE作用于含Surivin核心启动子的pGL3荧光报告载体后Survivin核心启动子的活性变化,并利用生物信息学软件分析Survivin核心启动子序列上的转录因子结合位点.结果:GSE能有效抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,具有剂量和时间依赖性(p＜0.05);GsE使细胞周期停滞于S期;GSE能有效抑制Survivin mRNA的表达(P＜0.01);GSE明显降低Survivin基因核心启动子活性(P＜0.01).结论:GSE使细胞周期停滞于S期,从而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,其作用机制之一可能是通过调控与Survivin核心启动子活性相关的转录因子的活性,进而降低Survivin基因的表达水平而实现的.     

补骨脂酚诱导人乳腺癌MCF-7细胞S期周期阻滞及机制研究

目的研究补骨脂酚对人乳腺癌MCF-7细胞生长抑制作用及其机制。方法采用噻唑蓝法(MTT法)考察补骨脂酚对MCF-7细胞生长的影响;采用流式细胞术检测补骨脂酚处理后细胞周期分布情况及活性氧(ROS)的产生;利用荧光显微镜观察补骨脂酚对MCF-7细胞核的影响;采用蛋白免疫印迹法检测补骨脂酚作用下MCF-7细胞凋亡、周期相关蛋白和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族蛋白的表达;引入ROS清除剂及MAPK家族蛋白抑制剂考察其在补骨脂酚作用下对MCF-7细胞生长抑制率和细胞周期相关蛋白表达的影响。结果补骨脂酚可以呈时间、剂量依赖性抑制MCF-7细胞生长,其抑制作用明显强于阳性药5-氟尿嘧啶。补骨脂酚可诱导MCF-7细胞产生ROS,同时上调p-p53及p21蛋白表达水平,下调细胞周期相关蛋白CDK2和CyclinA2表达水平,进而引起细胞发生S期阻滞。而上述影响可被ROS清除剂Tiron逆转,表明ROS参与补骨脂酚诱导的S期阻滞。加入p38MAPK抑制剂SB203580后,细胞产生的ROS水平降低,表明ROS的产生依赖于p38MAPK途径。结论补骨脂酚抑制MCF-7细胞增殖的作用与其引起细胞发生S期阻滞有关,ROS参与S期阻滞过程。     

中药逆转乳腺癌多药耐药研究进展

乳腺癌多药耐药是导致化疗失败的主要原因。探索、发掘高效、低毒、多作用靶点的中药以逆转乳腺癌多药耐药是目前研究的热点。以下综述了中药提取物、中药单体及中药复方在逆转乳腺癌多药耐药方面的研究进展。目前研究主要以体外实验为主,其在体内的作用效果及安全性仍需进一步研究证实,方可应用于临床。     

中药QHF复方抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭的机制研究

摘要：目的 研究中药QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其可能的作用机制,为QHF的临床应用提供理论依据。方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,以对数生长期的细胞为研究对象,予以不同浓度QHF复方及其他药物,CCK8法检测QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞生长增殖的影响。细胞划痕实验和Transwell实验检测QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞迁移、侵袭的影响。Western blot检测QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞HGF/c-Met及其下游PI3K/Akt、MAPK/ERK信号通路的影响。结果 CCK8实验结果显示：中药QHF复方可不同程度抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖且这种抑制作用可显著拮抗HGF对乳腺癌MCF-7细胞增殖的促进作用。细胞划痕实验和Transwell实验结果显示：中药QHF复方能明显抑制MCF-7细胞迁移、侵袭且这种抑制作用可拮抗HGF 对MCF-7细胞迁移、侵袭的促进作用。Western blot实验结果显示：中药QHF复方可明显抑制乳腺癌MCF-7细胞HGF、p-c-Met、p-Akt、p-ERK、VEGF、MMP-2、MMP-9的表达。结论 中药QHF复方抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭的机制可能与抑制乳腺癌MCF-7细胞异常活化的HGF/c-Met及其下游PI3K/Akt、MAPK/ERK信号通路有关。     

绿原酸通过影响自噬及耐药蛋白表达逆转5-氟尿嘧啶结肠癌细胞的耐药性

[目的] 观察绿原酸（ChA）对耐5-氟尿嘧啶（5-FU）结肠癌细胞（HCT116-R）中多药耐药及自噬蛋白的影响,探讨绿原酸对HCT116-R细胞系的耐药逆转作用及相关作用机制。[方法] 体外传代培养HCT116、HCT116-R细胞系,采用CCK8法检测了ChA和5-FU对HCT116细胞增殖活力的影响;采用100、400 mg/L ChA干预HCT116-R细胞系48 h后,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western Blot）分析细胞中耐药、自噬相关基因及相关蛋白的表达。[结果] ChA可以诱导5-FU对结肠癌HCT116细胞增殖活力的抑制作用;Western Blot实验结果表明HCT116-R细胞中P-糖蛋白（P-gp）、肺抗药性相关蛋白（LRP）、自噬相关基因Beclin-1及高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达相对于HCT116细胞显著上调（P<0.05）;进一步分析发现ChA呈剂量性的抑制HCT116-R细胞中P-gp、LRP、Beclin-1及HMGB1 mRNA和蛋白表达（P<0.05）,并且ChA还降低了p-Akt1、Akt1、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR表达（P<0.05）。[结论] ChA通过影响Akt1/mTOR分子通路活化降低耐药相关蛋白P-gp、LRP及自噬相关蛋白Beclin1、HMGB1表达,进而逆转5-FU结肠癌细胞系的耐药性。     

雷公藤内酯醇单独及与华蟾素联合对人乳腺癌MCF-7细胞生长影响的实验研究

目的观察雷公藤内酯醇和华蟾素对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。方法利用台盼蓝计数以及MTT法检测该药物对肿瘤细胞的抑制作用。结果雷公藤内酯醇在75~150 mg/L的剂量下可以对MCF-7细胞的生长产生明显的抑制作用;华蟾素在0.4 g/mL0、.2 g/mL的剂量下可对MCF-7细胞的生长产生明显的抑制作用;雷公藤内酯醇(75 mg/L)和华蟾素(0.2 g/mL)联合作用也可以对MCF-7细胞的生长产生明显的抑制作用;两者均有明显的时间依耐性。结论雷公藤内酯醇和华蟾素单独应用或者联合作用均可对乳腺癌细胞MCF-7的增殖产生抑制作用。     

Barbigerone reverses multidrug resistance in breast MCF‐7/ADR cells

Development of agents to overcome multidrug resistance (MDR) is one of the important strategies in cancer chemotherapy, and P‐glycoprotein (P‐gp) correlates with the degree of resistance. As a naturally occurring isoflavone, whether barbigerone (BA) could reverse MDR, is unknown. In this paper, we evaluated effects of BA on reversing P‐gp mediated MDR of adriamycin (ADR)‐resistant human breast carcinoma (MCF‐7/ADR) cells. BA (0.5 μM) treatment showed strong potency to increase ADR cytotoxicity toward MCF‐7/ADR cells. It was also demonstrated that BA time‐ and dose‐dependently increased accumulations of ADR and reduced the efflux in MCF‐7/ADR cells, pretreatment of these cells with BA might relocalized ADR to the nuclei. Furthermore, the results also revealed that BA did not affect P‐gp, but alter P‐gp ATPase activity. Intravenous administration of BA significantly increased anticancer efficacy of ADR to MCF‐7/ADR xenograft model in nude mice. These results revealed that BA might reverse P‐gp mediated MDR through inhibition of ATPase activity, which indicated a novel use of BA as a potent candidate for cancer chemotherapy.