枸杞多糖对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其抑制NF-κB,TNF-α,IL-6和IL-1β表达的机制

探讨枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对缺血再灌脑损伤小鼠的保护作用及其可能的机制。采用颈总动脉栓线造成大脑中动脉缺血,缺血2 h后将栓线拔出以实现大脑中动脉血流再灌注,形成小鼠短暂性大脑中动脉阻塞(transient middle cerebral artery occlusion,t MCAO)模型,观察LBP(25,50,100 mg·kg-1)对小鼠脑梗死范围,脑含水量,神经症状的影响;采用HE染色观察LBP对小鼠脑组织神经细胞的影响,Western blot法检测缺血大脑皮层NF-κB p65蛋白的表达,ELISA法检测血清中TNF-α,IL-6和IL-1β的水平。结果显示,LBP对缺血再灌注小鼠神经症状有明显的改善作用,能明显降低脑梗死范围和脑含水量。脑组织病理切片也证实了LBP对神经细胞的保护作用。Western blot结果显示,小鼠缺血再灌后缺血侧大脑皮层p65蛋白水平明显增高,LBP能显著降低p65蛋白水平。ELISA结果显示,LBP能显著降低缺血再灌后TNF-α,IL-6和IL-1β的生成。表明LBP对缺血再灌注小鼠脑损伤有明显保护作用,该作用可能与其抑制NF-κB和炎症反应有关。     

五色梅总黄酮对佐剂诱导大鼠关节炎的作用

目的:观察五色梅总黄酮对风湿性关节炎的治疗作用。方法:采用完全弗氏佐剂(CFA)诱导关节炎大鼠模型,设正常组,模型组,阳性药地塞米松组(0.15 mg·kg-1),五色梅总黄酮高、低剂量组(100,25 mg·kg-1)。ig给药各组每天1次,连续16 d,观察造模后第3,8,16,21,24天大鼠足跖肿胀率及关节炎指数,测定大鼠炎性组织液和血清中的白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。小鼠二甲苯耳廓肿胀法和大鼠棉球肉芽肿法观察五色梅总黄酮的抗炎作用;小鼠热板法和醋酸扭体法观察五色梅总黄酮的镇痛作用。结果:与模型组比较,五色梅总黄酮100 mg·kg-1剂量组能降低佐剂性关节炎大鼠足肿胀率并降低关节炎指数(P0.05),并能降低佐剂性关节炎大鼠炎性组织液和血清中IL-1β,TNF-α水平(P0.05);五色梅总黄酮140,70 mg·kg-1剂量组均能显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀程度,100 mg·kg-1剂量组能显著抑制大鼠棉球肉芽组织质量(P0.05,P0.01);五色梅总黄酮140,70 mg·kg-1剂量组均能显著减少醋酸引起小鼠的扭体反应次数和增加小鼠热板痛阈值(P0.05)。结论:五色梅总黄酮有效改善类风湿性关节炎大鼠关节炎症状,同时具有显著的抗炎镇痛作用,其机制可能与降低炎性组织液和血清中IL-1β,TNF-α水平有关。     

腹泻型肠易激综合征模型大鼠海马与结肠组织中细胞因子的含量变化及mRNA的表达

目的:探讨腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠海马与结肠组织中细胞因子白细胞介素1β(IL-1β),白细胞介素2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量变化及其mRNA的表达,初步分析脑-肠轴中细胞因子在IBS-D中的发病机制。方法:取健康SD大鼠30只,分为正常组和模型组,正常组10只,模型组20只。模型组复制IBS-D模型,造模成功后取模型大鼠和正常大鼠的海马和结肠组织制成石蜡切片,采用免疫组化染色法分析组织中IL-1β,IL-2和TNF-α的表达,同时采用RTq PCR法检测其海马与结肠组织中IL-1β,IL-2和TNF-αmRNA的表达。结果:与正常组比较,IBS-D模型组海马和结肠组织中IL-1β,IL-2和TNF-α均明显增加,且海马与结肠组织中的IL-1β,IL-2和TNF-α呈一定程度的相关性;IL-1βmRNA在IBS-D组大鼠海马组织中表达量明显增加,TNF-αmRNA在海马和结肠组织中表达量均明显增加(P0.05),IL-2 mRNA的表达水平无显著变化。结论:IL-1β,IL-2和TNF-α作为致炎介质,在IBS-D脑海马和结肠组织均异常表达,提示其作用机制可能是通过影响神经-内分泌-免疫网络而实现脑-肠轴功能的结构基础改变,进而导致IBS-D的发生和发展。     

活血通络汤内服联合活络术治疗气虚血瘀证神经根型颈椎病99例

目的:观察活血通络汤内服联合活络术治疗神经根型颈椎病(气虚血瘀证)的临床疗效及对血清白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(TIL-6)水平的影响。方法:采用随机按数字表法将200例神经根型颈椎病患者分为对照组101和观察组99例。对照组口服用根痛平颗粒,2袋/次,2次/d;观察组采用活络术注射穴位,1次/d,7次为1个疗程,休息1周后进行下1个疗程,同时采用活血通络汤内服,1剂/d,两组疗程均为4周。记录两组疼痛视觉模拟评分(VAS)和颈椎病评价量表评分(CASCS),检测治疗前后血液流变学,检测治疗前后患者血清白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)水平。结果:观察组和对照组临床总有效率分别为90.1%和73.27%,观察组优于对照组(P0.05);治疗后观察组VAS评分低于对照组(P0.01),CASCS评分高于对照组(P0.01);观察组全血黏度高切、中切、低切和血浆黏度均比治疗前下降(P0.01),观察组全血黏度高切和血浆黏度明显低于对照组(P0.01);治疗后观察组治疗后体内TNF-α和IL-1β,IL-6水平明显低于对照组(P0.01)。结论:活血通络汤内服联合活络术治疗神经根型颈椎病(气虚血瘀证)临床疗效显著,其作用机制可能与其改善血液流变学和降低血清IL-1β,TNF-α,IL-6水平相关。     

马蔺子素对大鼠放射性肺损伤的防护作用

目的:探讨马蔺子素对SD大鼠放射性肺损伤的防护作用。方法:将210只SD大鼠随机分为0.9%氯化钠溶液组(正常组),马蔺子素组(单药组),单纯照射组(模型组),激素组,马蔺子素大、中、小剂量(60,30,15 mg·kg~(-1)·d~(-1))组,每组30只。采用~(60)Coγ单次20 Gy右全肺照射,建立大鼠放射性肺损伤模型。照射后第1,4,8,12,24周取大鼠肺组织苏木素伊红(HE)染色,马松三色(Masson)染色进行组织病理学观察;紫外分光光度计检测肺组织中羟脯氨酸含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL~(-1)β)和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)浓度;免疫组化法检测肺组织中TNF-α,TGF-β_1的表达。结果:与模型组比较,大、中剂量马蔺子素照射组可显著降低放射性肺损伤的程度,且有降低羟脯氨酸含量和抑制TNF-α,IL~(-1)β,TGF-β_1表达的作用(P0.05)。单药组各项指标与正常组相当。结论:中、大剂量马蔺子素对放射性肺损伤有较好的防护作用,且对大鼠肺组织几乎无毒性。     

蝙蝠葛酚性碱对大鼠肝纤维化的影响及其机制探讨

目的:观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的影响,并探讨其作用机制。方法:SD大鼠随机分成正常组,模型组,秋水仙碱组(1 mg·kg-1),PAMD高、中、低剂量组(25,12.5,6.25 mg·kg-1)。采用40%CCl4(1m L·kg-1)ip诱导肝纤维化模型大鼠。所有大鼠给予等体积药物或生理盐水ig,持续30 d。放射免疫法检测血清透明质酸(HA),层粘连蛋白(LN),Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(CⅣ)水平。生化分析法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)水平。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肝脏中转化生长因子-β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。电子显微镜观察大鼠肝组织镜下形态结构,计算肝和脾脏脏器指数。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清HA,LN,PCⅢ,CIV,ALT和AST明显增加(P0.05),TP和ALB明显降低(P0.05),肝组织TGF-β1和TNF-α水平明显升高(P0.05),肝脏病理纤维化大鼠明显加重,肝脏和脾脏脏器指数明显升高(P0.05);与模型组比较,PAMD高、中剂量组大鼠血清HA,LN,PCⅢ,CIV,ALT和AST明显降低(P0.05),TP和ALB明显升高(P0.05),肝组织TGF-β1和TNF-α水平明显降低(P0.05),肝脏病理纤维化大鼠明显减轻,肝脏和脾脏脏器指数明显降低(P0.05)。结论:PAMD能有效减轻CCl4诱导肝纤维化大鼠的肝脏损伤,降低肝纤维化程度,其机制与抑制肝脏TGF-β1和TNF-α蛋白表达有关。     

新疆肉苁蓉提取液对M-KOOPG小鼠抗骨质疏松的作用机制

目的:探讨新疆肉苁蓉提取液对M-KOOPG小鼠抗骨质疏松的作用机制。方法:选用M-KOOPG雌性小鼠40只,随机分成4组,即肉苁蓉提取液高、低剂量组(10,5 g·kg~(-1)·d~(-1)),福善美组(10 mg·kg~(-1)·周-1),模型组,每组各10只。连续ig给药30,60 d时每组处死M-KOOPG小鼠5只,苏木素-伊红(HE)染色观察M-KOOPG小鼠各组间骨小梁形态及数目变化;免疫组织化学法观察M-KOOPG小鼠骨组织中白细胞介素-1β(IL~(-1)β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的定位及阳性表达。结果:连续ig 30,60 d,肉苁蓉提取物高、低剂量组、福善美组小鼠骨小梁形态及数目均有增加,免疫组化指标IL~(-1)β,TNF-α显示在骨小梁表面的成骨细胞、破骨细胞及骨髓基质细胞的细胞浆表达呈不同程度降低,IL~(-1)β,TNF-α阳性表达细胞数与模型组比较均有显著性差异(P0.05)。结论:新疆肉苁蓉提取液通过降低M-KOOPG小鼠中IL~(-1)β,TNF-α的阳性表达,提示具有抗骨质疏松的作用。     

板党多糖对溃疡性结肠炎大鼠的防治作用及其分子机制研究

目的:观察板党多糖对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠溃疡性结肠炎的防治作用并研究其机制。方法:SD大鼠60只,分为6组,每组10只,分别为正常组,模型组,板党多糖低、中、高(0.25,0.50,1.00 g·kg~(-1))剂量组,固肠止泻丸组(1.08 g·kg~(-1))。各组按各剂量ig给药5 d后,以TNBS 60 mg·kg~(-1)灌肠造模,再继续ig给药3周,每天1次。造模后第1,2,3及21天进行疾病活动指数(DAI)评价,末次给药30 min后乙醚麻醉,断头处死大鼠。取大鼠的结肠组织先进行黏膜损伤指数评价(CMDI),然后一半组织进行组织病理学检查及评分,另一半采用实时荧光定量-聚合酶链式反应(q PCR)检测Toll样受体4(TLR4),白细胞介素-6(IL-6),核因子-κB(NF-κB),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-10(IL~(-1)0)的mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠充血水肿,溃疡症状明显,组织病理学检查结果显示炎性细胞浸润较严重,CMDI评价及病理学组织评分明显升高,TLR4,IL-6,NF-κB,TNF-αmRNA表达明显升高,IL~(-1)0 mRNA表达明显降低(P0.01);与模型组比较,板党多糖组大鼠结肠充血水肿,溃疡症状得到改善,组织病理学检查结果显示炎性细胞浸润情况明显改善,CMDI评价及病理学组织评分明显降低,对TLR4,IL-6,NF-κB,TNF-αmRNA表达具有下调作用,对IL~(-1)0 mRNA表达具有上调作用(P0.05,P0.01)。结论:板党多糖对TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎呈现出良好的预防性治疗作用,其机制可能与调节TLR4,IL-6,NF-κB,TNF-α及IL~(-1)0水平有关。     

补肾化痰方对去卵巢大鼠骨组织TNF-α和IL-6的影响

目的： 观察补肾化痰方对去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）表达的影响, 探讨补肾化痰方对去卵巢大鼠骨代谢影响的可能机制。 方法： SD大鼠随机分为5组：模型组（A）、假手术组（B）、利维爱组（C）、补肾化痰方低剂量组（D）、补肾化痰方高剂量组（E）。行双侧卵巢切除术后3月,C,D,E组分别以利维爱0.23 mg·kg^-1、补肾化痰方9.4 g·kg^-1、补肾化痰方18.8 g·kg^-1灌胃给药,A,B组予以等体积的生理盐水。1次/d,给药时间为8周。术后5个月,双能X线骨密度测定仪检测大鼠股骨骨密度,免疫组化检测大鼠骨组织TNF-α和IL-6表达。 结果： 补肾化痰方低、高剂量组均能显著提高去卵巢骨质疏松症大鼠的骨密度,增加骨小梁数量和密度,降低骨组织TNF-α和IL-6表达水平。 结论： 补肾化痰方对去卵巢大鼠骨质疏松症有较好的治疗作用,其作用机制与降低骨组织中细胞因子TNF-α和IL-6水平有关。     

宣肺平喘胶囊对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的影响

目的:研究宣肺平喘胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的作用机制。方法:SD健康大鼠60只,除正常组10只外,其余大鼠采用香烟烟熏联合气管内注射脂多糖方法建立COPD大鼠模型,造模成功后,随机分为宣肺平喘胶囊低、中、高剂量组(0.38,0.75,1.5 g·kg~(-1)),模型组,阳性药物组(地塞米松,0.09 mg·kg-1)。正常组和模型组以蒸馏水ig,阳性药物组以地塞米松混悬液ig,其余治疗组以宣肺平喘颗粒混悬液ig,时间30 d,每天1次。末次ig后,观测大鼠一般情况;取血清,酶连免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),血管内皮生长因子(VEGF),白细胞介素-8(IL-8),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测大鼠肺组织血小板源生长因子-B(PDGF-B)蛋白的表达,检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数和分类,同时进行苏木素-伊红(HE)染色,病理组织观察。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中TNF-α,IL-8,IL-1β含量增高,VEGF含量降低,肺组织PDGF-B含量增高,支气管肺泡灌洗液中白细胞总数增高,嗜中性粒细胞、淋巴细胞、肺泡巨噬细胞比例增高(P0.05,P0.01);与模型组比较,宣肺平喘胶囊各剂量组大鼠血清TNF-α,IL-8,IL-1β明显降低,VEGF明显增多,肺组织PDGF-B明显降低(P0.05,P0.01),支气管肺泡灌洗液中嗜中性粒细胞、淋巴细胞、肺泡巨噬细胞比例明显降低(P0.05),宣肺平喘胶囊高剂量组和地塞米松组与模型组比较,支气管肺泡灌洗液中白细胞总数均明显降低(P0.05,P0.01)。结论:宣肺平喘胶囊能够降低COPD大鼠血清中的TNF-α,IL-8,IL-1β降低,降低肺组织中PDGF-B,增高血清中VEGF,高剂量组还可以降低BALF白细胞总数,作用机制有可能与减少炎症介质生成和释放,发挥抗炎作用,减轻气道表皮粘液分泌,抑制气道重塑有关。     

车前子不同炮制品抗大鼠膜性肾病的比较

目的:比较车前子生品和盐炙品水煎液抗大鼠膜性肾病的活性。方法:热回流法提取车前子不同炮制品;选用改良的Border法应用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)建立大鼠膜性肾病模型,在给药的第6周末检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)及血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),总蛋白(TP),尿素氮(BUN),肌酐(SCr)水平;采用电镜和光镜观察肾脏病理形态学变化,免疫组化法检测各组大鼠肾组织肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β,转化生长因子(TGF)-β1,核转录因子-κB(NF-κB)p65的表达情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠的尿蛋白、肾指数、血清生化指标、肾脏免疫调节因子具有极显著差异(P0.01),肾脏病理形态变化明显;与模型组比较,贝那普利组、盐炙品3个剂量组和生品高剂量组均可显著降低模型大鼠尿蛋白、肾指数(P0.05,P0.01),使血清生化指标呈显著差异(P0.05,P0.01),病理形态结果显示,大鼠肾脏病变有明显的改善,4种细胞因子表达显著降低(P0.01,P0.05);与生品高剂量组比较,贝那普利组和盐炙品高、中剂量组尿蛋白量显著降低(P0.05,P0.01),贝那普利组和盐炙品高剂量组肾指数显著降低(P0.05),贝那普利组、盐炙品高、中剂量组血清中BUN,SCr,TC,TG的含量显著低于生品高剂量组(P0.05,P0.01),低剂量组仅BUN显著低于生品高剂量组(P0.05),贝那普利组、盐炙品高、中剂量组血清中TP显著升高(P0.05),贝那普利组对肾脏4种免疫调节因子的表达显著降低(P0.01),盐炙品3个剂量组中TNF-α,IL-1β的积分吸光度(IA)显著降低(P0.01),盐炙品高剂量组TGF-β1,NF-κB p65的IA表达显著低于生品高剂量组(P0.05,P0.01)。结论:车前子盐炙品对膜性肾病大鼠的肾保护作用和对肾脏中免疫调节因子的调节作用均优于生品,可继续深入车前子盐炙品的物质基础和药效机制研究。     

车前子多糖对膜性肾病大鼠肾损伤和肠道菌群的影响

目的 研究车前子多糖（PSP）对膜性肾病（MN）大鼠肾损伤的保护作用及对肠道菌群的影响,为PSP治疗MN的深入研究提供理论基础。方法 采用尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA,3.5 g·L^-1）诱导MN大鼠模型,造模周期为7周。于造模第4周,将造模成功大鼠按照随机数字法分为模型组,阳性药物组（盐酸贝那普利,10 mg·kg^-1·d^-1）,PSP高剂量组（PSP-H,800 mg·kg^-1·d^-1）,PSP中剂量组（PSP-M,400 mg·kg^-1·d^-1）,PSP低剂量组（PSP-L,200 mg·kg^-1·d^-1）,每组10只;另取10只未造模的大鼠为正常组。正常组和模型组大鼠灌服等体积生理盐水,各给药组大鼠灌服相应药物,每日1次,连续4周。实验结束后,采用光镜法分别观察大鼠肾脏及结肠组织病理变化,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清及结肠组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白细胞介素-1β（IL-1β）含量,免疫组织化学法检测大鼠肾组织中TNF-α,IL-1β蛋白表达情况,运用16S rRNA测序法研究PSP对MN大鼠肠道菌群调节作用。结果 与正常组比较,模型组大鼠肾小球增大、基底膜增厚,结肠组织腺体萎缩,血清及结肠组织中TNF-α,IL-1β含量明显上升（P<0.05）,TNF-α,IL-1β蛋白表达显著增加（P<0.01）;与模型组比较,盐酸贝那普利组和PSP-H组大鼠肾小球囊腔减小、基膜增厚程度减轻、结肠组织中黏膜排列较整齐,但PSP-M,PSP-L组对肾组织及结肠组织改善效果不佳;PSP-H,PSP-M组大鼠血清及结肠组织中TNF-α,IL-1β含量明显下降（P<0.05）,肾组织中TNF-α,IL-1β蛋白表达显著降低（P<0.01）,PSP-L组差异无统计学意义;模型组大鼠肠道菌群中有害菌厚壁菌门丰度升高、有益菌拟杆菌门丰度降低;给予PSP后有害菌厚壁菌门丰度降低、有益菌拟杆菌门丰度升高,以PSP-H变化最为显著。结论 PSP可有效缓解MN大鼠的肾损伤、降低炎症因子表达,并可调节MN大鼠肠道菌群结构、改善受损的肠道屏障。     

车前子水煎液对痛风性肾病大鼠的肾保护作用及机制

目的:观察车前子水煎液对痛风性肾病大鼠的药效学指标及对肾组织半胱氨酸蛋白酶-1(cysteine-aspartic acid protease-1,Caspase-1),Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)和凋亡相关点样蛋白(fapoptosis-associated specklike protein,ASC)表达的影响,探讨车前子水煎液对痛风性肾病大鼠的肾保护作用和初步机制。方法:60只SD大鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,阳性药组(别嘌醇,50 mg·kg~(-1)),车前子水煎液高、中、低剂量组(1.62,0.81,0.27 g·kg~(-1)),除正常组外,其余各组采用腺嘌呤和酵母联用的方法制作痛风性肾病大鼠模型,给予车前子水煎液,观察肾脏特征;计算肾重指数;检测大鼠血清中尿酸(uric acid,UA),尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),肌酐(creatinine,SCr),丙氨酸氨基转移酶(cereal third transaminase,ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST),碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP);采用光镜观察肾脏病理形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western bolt)和免疫组化法(immunohistochemical methods)测定肾组织中NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达量。结果:与模型组比较,别嘌醇组和车前子水煎液各剂量组的肾脏体积减小,别嘌醇组和车前子中剂量组肾重指数降低,车前子高剂量组肾重指数降低明显,别嘌醇组和车前子水煎液各剂量组血清UA,BUN,SCr,ALT,AST,ALP明显降低(P0.05,P0.01),肾组织病变程度均有一定减轻,其中车前子高、中剂量组最好,别嘌醇组和车前子水煎液高剂量组中NLRP3,ASC和Caspase-1蛋白的表达明显降低(P0.05,P0.01),车前子水煎液中剂量组中NLRP3蛋白的表达降低(P0.05)。结论:车前子对痛风性肾病大鼠具有较好肾保护作用,可能与其下调肾组织中NLRP3,ASC和Caspase-1蛋白表达,抑制下游炎性细胞因子释放有关。     

车前子酚类成分的研究

目的研究车前子Plantaginis Semen中的酚类成分。方法车前子65%、95%乙醇提取物采用大孔树脂、硅胶、ODS、Sephadex LH-20、制备柱进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到9个化合物,分别鉴定为(+)-(7R,7'R,8S,8'S)-新橄榄树脂素(1)、(+)-古柯愈创木基甘油-β-阿魏酸乙酯(2)、圣草酚(3)、木犀草素(4)、金圣草素(5)、羟基酪醇(6)、(E)-3,4-二羟基苯亚甲基丙酮(7)、阿魏酸(8)、5,7-二羟基色原酮(9)。结论化合物2~3、6~7、9为首次从车前属植物中分离得到,化合物5为首次从该植物中分离得到。     

车前子多糖成分的提取工艺研究

采用两次正交试验以车前子总多糖量为指标得出车前子多糖成分的最佳提取工艺。提取时用PH =9的 30倍量碱水 ,提取 3次 ,共提 4 8小时 ;醇沉时浓缩比为 1∶2 0 ,加 2倍醇 ,静置 6小时     

一种车前子多糖的分离纯化及单糖组成分析

目的:分离纯化车前子多糖,分析车前子均一多糖的单糖组成。方法:采用阴阳弱离子串联树脂柱脱蛋白和初步分离,DEAE Cellulose DE-52和Sephacryl S-400柱色谱分离纯化得车前子均一多糖(PP-B10),利用紫外-可见吸收光谱、红外光谱和高效体积排阻色谱(HPSEC)分析PP-B10的结构特性和纯度,柱前衍生-HPLC法确定PP-B10的单糖组成。结果:PPB10纯度较高,含有少量蛋白,由甘露糖、核糖、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖7种单糖组成,其物质的量比为147.2∶3.2∶22.5∶4.8∶1.1∶95.7∶28.8的酸性多糖。结论:PP-B10是一种全新单糖组成的车前子均一多糖。     

车前子提取物部位群抗痛风的作用

目的: 探讨车前子部位群的抗痛风活性与机制,为后续研究提供参考依据。方法: 以系统溶剂法提取分离车前子。90只昆明种小鼠,随机分为9组,每组10只,分别为正常组,高尿酸血症组(模型组),别嘌呤醇组(0.01 g·kg^-1),总提物组(25 g·kg^-1),石油醚组(25 g·kg^-1),二氯乙烷组(25 g·kg^-1),乙酸乙酯组(25 g·kg^-1),正丁醇组(25 g·kg^-1),水部位组(25 g·kg^-1)。除正常组外,其余各组采用氧嗪酸钾盐诱导小鼠急性高尿酸血症模型,ig给予相应药物,正常组和模型组给予等体积生理盐水,连续给药7 d。观察车前子总提物及5个部位对小鼠血清尿酸水平及肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活性的影响。结果: 系统溶剂法提取分离车前子得到5个部位,分别为石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水部位。与正常组比较,模型组小鼠血清尿酸的水平与XOD活性明显升高(P<0.01);与模型组比较,别嘌呤醇、车前子总提物及各不同部位均可降低小鼠血清尿酸的水平与XOD活性(P<0.05,P<0.01)。结论: 车前子及不同提取部位具有一定的抗痛风作用。     

车前子和车前草的商品鉴定

对我国29个省(区)、市的车前子和18个省(区)、市的车前草进行了商品鉴定,结果表明我国车前子的主流商品是车前和大车前,平车前较少;车前草的主流商品为车前,平车前和大车前较少。     

车前子对腹泻大鼠小肠组织AQP3基因及蛋白表达的影响

目的:观察车前子对腹泻大鼠小肠组织水通道蛋白3 (AQP3)基因和蛋白表达的影响,探讨其治疗腹泻的作用机制。方法:采用番泻叶灌胃法复制大鼠腹泻模型。将60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、氢氯噻嗪组和车前子低、中、高剂量组。除正常组外,其余各组均于每天上午灌胃番泻叶药液,正常组灌胃等量蒸馏水;每天下午各治疗组灌服相应药物,正常组和模型组灌服等量蒸馏水,给药期间观察大鼠的排便情况,连续14 d。实验结束后,根据粪便性状和大便次数,统计对比各组大鼠的稀便率、平均稀便级和腹泻指数。麻醉状态下,剖取2份小肠组织,1份置于冻存管,液氮冻存,用于qRT-PCR法和免疫组化法检测小肠组织AQP3基因和蛋白的表达,1份置于4%多聚甲醛液中固定,苏木精-伊红(HE)染色法观察小肠黏膜病理形态学变化。结果:模型组稀便率、平均稀便级和腹泻指数明显增加(P0.01);小肠绒毛表皮细胞明显凋亡坏死,固有层毛细血管扩张充血明显,间质有少量中性粒细胞浸润;小肠组织中AQP3基因蛋白的表达水平均下降(P0.01)。与模型组比较,车前子各剂量组大鼠的稀便率、平均稀便级和腹泻指数均降低(P0.01);小肠绒毛表皮细胞凋亡、坏死和毛细血管扩张充血现象均减轻,间质有少量中性粒细胞浸润,中、高剂量组可见上皮细胞增生;小肠组织中AQP3基因和蛋白的表达水平均显著高于模型组(P0.01)。结论:车前子具有止泻作用,其机制与减轻小肠黏膜炎性损伤,上调AQP3基因蛋白的表达水平,增加小肠对水的吸收、调节水液代谢有关。     

苏木治疗大鼠膜性肾病的实验研究

目的:观察中药苏木(水提取物)对大鼠膜性肾病(MN)的疗效,探讨其在膜性肾病治疗中的作用。方法:采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)复制大鼠MN模型,随机分为模型组(B组)、苏木组(C组)、雷公藤组(D组)、强的松组(E组),另设正常对照组(A组),每组10只。各治疗组分别给予苏木、雷公藤多甙片、强的松连续灌胃治疗4周。用药前后检测各组大鼠24h尿蛋白定量等,第4周末观察各组大鼠肾脏光镜下病理变化,并进行白介素18(IL-18)定量酶检测。结果:模型组血脂、24h尿蛋白定量显著升高,血浆蛋白降低明显,苏木组、雷公藤组、强的松组相关指标有好转趋势。光镜下观察模型组肾小球明显肿胀,球内细胞数增多,肾小球基底膜增厚,系膜区系膜细胞增生;各治疗组基底膜增厚不明显,损伤相对减轻。IL-18检测在治疗组表达较模型组有所减少。结论:苏木应用于大鼠膜性肾病后,血、尿化验有好转趋势,大鼠生存表现有所改善,病理及生化检测提示,苏木对大鼠膜性肾病有一定治疗作用。IL-18检测提示苏木在抑制免疫反应方面起到一定作用。