己酮可可碱对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、胶原合成及转化生长因子-β1表达的影响北大核心CSCD

目的探讨己酮可可碱对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、胶原合成及转化生长因子（TGF）-β1表达的影响。方法取人瘢痕疙瘩及正常皮肤组织培养的第5～8代成纤维细胞,在含有0．1—3g／L己酮可可碱的环境中培养。应用噻唑蓝（M1Tr）法检测成纤维细胞增殖,双抗体夹心-ELISA法测定TGF—β1表达,RT—PCR检测I、Ⅲ型前胶原mRNA表达。结果0．1～2g／L己酮可可碱能明显抑制瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞的增殖,呈明显的量效一时效关系,抑制作用在浓度2g／L时达到最高。浓度为0．5～2g／L时己酮可可碱能降低瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞TGF—B1表达,1或2g／L时己酮可可碱能降低瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA表达。结论己酮可可碱对瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞的增殖、TGF—β1以及I、Ⅲ型前胶原表达均有明显的抑制作用。     

色素障碍性皮肤病

20 0 4 2 394　白癜风患者转化生长因子 β1蛋白和 m RN A 的表达 /徐前喜 (北京大学人民医院皮肤科 )… / /中华皮肤科杂志 .- 2 0 0 3,36 (10 ) .- 595采用免疫组化及原位杂交法对 14例进展期白癜风患者皮损及 14例正常皮肤中转化生长因子β1(TGFβ1)进行检测。结果显示 ,白癜风皮损及正常皮肤中 TGFβ1均呈阴性表达。 13例白癜风患者皮损中有TGFβ1m RN A表达 ,其中 8例强阳性 ,3例阳性 ,2例弱阳性 ;1例正常人皮肤中 TGFβ1弱阳性。两组 T GFβ1m RNA表达阳性率比较差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。提示 TG Fβ1在白癜风的发病…     

银屑病患者皮损中转化生长因子-β_1、-β_1受体及其信号转导蛋白Smad2、3的表达

目的:观察银屑病患者皮损与正常人皮肤中T细胞转化生长因子(TGF)-β_1、TGF-β_1受体(TGF-β_1R I、TGF—β_1RⅡ)及其信号转导蛋白Smad2、3的表达,分析TGF—β_1信号转导通路在银屑病发病机制中的作用。方法:采用Real-time PCR(RTPCR)法检测20例银屑病患者皮损及10例正常人皮肤中TGF—β_1、TGF—β_1受体(I、Ⅱ)、Smad(2、3)mRNA的表达,用western blot杂交法检测TGF—β_1、Smad2、3的表达。结果:银屑病患者皮损中TGF—β_1、TGF—β_1R I、TGF—β_1RⅡ及其信号转导蛋白smad2、3的mRNA表达明显低于正常对照组(P0.01),TGF—β_1和Smad2、3的蛋白表达明显低于正常对照组(P0.01)。结论:T细胞TGF-β1信号转导通路的低表达可能有助于银屑病患者表皮过度增殖状态的发生和发展。     

尖锐湿疣组织中TGFβ1,TGFβRⅡ及Cyclin E的表达

目的研究转化生长因子β1(TGFβ1)、转化生长因子βⅡ型受体(TGFβRⅡ)和细胞周期素E(Cyclin E)蛋白在尖锐湿疣(CA)组织中的表达。方法采用免疫组织化学SP法和图像分析系统检测30例CA患者皮损、15例正常人皮肤(包皮)组织中TGFβ1,TGFβRⅡ及Cyclin E表达及分布。结果(1)TGFβ1,CyclinE在CA组织中的表达(分别为0.26380±0.01965,0.29554±0.01650)均显著高于正常皮肤组织(分别为0.20088±0.03815,0.24330±0.06417,P<0.05);TGFβRⅡ在CA组织中的表达(0.09730±0.01760)显著低于正常皮肤组织(0.23407±0.04883,P<0.05);(2)TGFβ1与Cyclin E在CA组织中的表达呈正相关(P<0.05);而TGFβRⅡ与Cyclin E在CA组织中的表达呈负相关(P<0.05)。结论CA组织中TGFβ1表达上调,而TGFβRⅡ表达下调,使TGFβ信号传导通路受阻,致TGFβ1缺乏对细胞增殖负性调节作用,导致Cyclin E过表达使细胞周期调控异常,细胞增殖。     

TGF－β1调节瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌MMP－1及TIMP－1的研究

@@@@目的：检测转化生长因子－β1（TGF－β1）对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶－1（MMP－1）和金属蛋白酶组织抑制剂－1（TIMP－1）表达的调节作用,探讨TGF－β1与瘢痕的关系。方法：培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞经不同浓度的TGF－β1处理,采用酶联免疫法（ELISA）测定瘢痕疙瘩成纤维细胞上清液中MMP－1和TIMP－1的水平。结果：瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP－1和TIMP－1的生成量显著高于正常皮肤（ P＜0．01）;TGF－β1显著降低瘢痕成纤维细胞MMP－1的生成量（ P＜0．01）,其作用在10～50 ng？mL呈剂量效应关系;不同浓度的TGF－β1对TIMP－1的生成量均无显著改变（P＞0．05）。结论： TGF－β1在瘢痕生成过程中起重要作用。     

体外培养人皮肤鳞状细胞癌A431细胞Smad2和Smad3 mRNA的表达

目的:探讨体外培养的人皮肤鳞状细胞癌(简称鳞癌)细胞的转化生长因子(TGF)β受体活化Smad--Smad2和Smad3 mRNA的表达水平.方法:采用反转录-实时荧光定量聚合酶链反应,分别检测体外培养的人皮肤鳞癌A431细胞与人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)中Smad2和Smad3 mRNA的表达水平.结果:人皮肤鳞癌A431细胞Smad2和Smad3的mRNA表达水平均显著低于对照的角质形成细胞.结论:Smad2和Smad3表达下调不但见于人类皮肤鳞癌的在体形成过程中,还见于能持续传代的体外培养的鳞癌细胞中.Smad2和Smad3表达下调可能代表了鳞癌细胞所固有的TGF-B信号转导通路的异常变化.有助于鳞癌的形成.     

瘢痕疙瘩中肿瘤坏死因子α刺激基因-6及相关上下游分子表达水平及相关性的初步探究

目的：研究瘢痕疙瘩中肿瘤坏死因子α刺激基因（TSG）-6及相关上下游分子的表达水平及相关性。方法：收集78例瘢痕疙瘩样本,另取50例正常皮肤组织样本作为对照。采用免疫组化检测TSG-6的阳性表达率,采用Western blot检测TSG-6、磷酸化磷酸肌醇-3-激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、自杀相关因子（Fas）、Fas配体（FasL）、转化生长因子（TGF）-β1及磷酸化Smad3(p-Smad3)的蛋白表达水平,采用荧光定量PCR法检测组织样本中微小RNA(miR)-23b、miR-181a及miR-376b的表达水平。结果：瘢痕疙瘩组织中TSG-6的阳性表达率、TSG-6、Fas及FasL的蛋白表达水平均低于正常皮肤组织,p-PI3K、pAKT、TGF-β1、p-Smad3、miR-23b、miR-181a及miR-376b的表达水平高于正常皮肤组织（P<0.05）;瘢痕疙瘩组织中TSG-6的表达水平与p-PI3K、p-AKT、TGF-β1、p-Smad3、miR-23b、miR-181a及miR-376b的表达水平呈负相关,与Fas及FasL的表达...     

TGF-β1和MMP-2在病理性瘢痕表皮中的表达和意义

目的:研究TGF-β1和MMP-2在病理性瘢痕表皮中的表达及其意义。方法:运用免疫组化法检测TGF-β1和MMP-2在病理性瘢痕表皮中的表达,并与其在表浅性瘢痕、正常皮肤表皮中的表达进行比较,分析其规律。结果:TGF-β1在病理性瘢痕表皮角质细胞中的阳性率及表达强度均较表浅性瘢痕和正常皮肤明显增高(P值均<0.05),MMP-2在病理性瘢痕表皮中的表达也出现增强,但与表浅性瘢痕、正常皮肤表皮比较,阳性率的差异不具有统计学意义(P>0.05),表达强度间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1和MMP-2在病理性瘢痕表皮中出现不同程度的表达增高,提示它们可能参与了病理性瘢痕的形成,表皮可能是多种细胞因子的重要来源。     

基底细胞癌和鳞状细胞癌中转化生长因子βⅠ型和Ⅱ型受体表达

目的探讨转化生长因子β(TGFβ)受体在基底细胞癌和鳞状细胞癌中表达水平的变化及其意义。方法采用实时定量PCR和SP免疫组化技术分别检测基底细胞癌、鳞状细胞癌及正常人对照皮肤中Ⅰ型和Ⅱ型TGFβ受体(TGFβRⅠ,TGFβRⅡ)mRNA和蛋白的表达。结果对18例基底细胞癌、24例鳞状细胞癌患者的皮损及正常人对照皮肤的研究显示,基底细胞癌和鳞状细胞癌皮损TGFβRⅠ和TGFβRⅡ的mRNA表达水平均显著低于正常人对照皮肤。免疫组化试验结果显示;TGFβRⅠ染色强度在基底细胞癌组、鳞状细胞癌组较正常人对照皮肤组显著降低(P<0.001);TGFβRⅡ在二组表皮肿瘤与正常人对照皮肤组问表达差异也有统计学意义(P<0.01)。结论基底细胞癌和鳞状细胞癌中TGFβ受体表达下调可能有助于这些上皮细胞起源的表皮肿瘤的形成。     

脉冲染料激光对体外瘢痕成纤维细胞中TGF-β1和TGF-β3表达的影响

目的探讨不同能量脉冲染料激光(Pulsed dye laser,PDL)对体外人瘢痕成纤维细胞转化生长因子(TGF)-β1和TGF-β3表达的影响。方法按组织块法体外培养人瘢痕成纤维细胞,分别用4、6、8、10、11、12 J/cm2能量的PDL照射细胞,观察不同能量PDL对细胞周期的影响,酶联免疫吸附测定(ELLSA)法检测激光照射后TGF-β1、TGF-β3的分泌量。结果 PDL照射后,处于G1期的瘢痕成纤维细胞较对照组明显增多;不同能量PDL照射瘢痕成纤维细胞后,TGF-β1的分泌量随激光能量密度的升高而降低,TGF-β3的分泌量则增加,差异有统计学意义。结论 PDL对瘢痕的治疗作用可能与抑制细胞增殖,减少瘢痕成纤维细胞TGF-β1分泌,增加TGF-β3的分泌有关。     

尖锐湿疣中转化生长因子β受体、受体活化Smad和共有Smad的表达

目的 探讨尖锐湿疣中转化生长因子β（TGF-β）信号转导途径TGFβ受体（TGFβR）、受体活化Smad和共有Smad蛋白的表达情况。方法 采用EliVisionTMplus免疫组织化学技术分别检测20例尖锐湿疣和15例正常人对照皮肤中TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、Smad1/2/3、磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）和Smad4的表达。结果 TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4在对照正常人皮肤的表皮中均有表达。尖锐湿疣表皮中TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4的免疫组化染色强度均明显低于对照正常人皮肤的表皮（P < 0.05或P < 0.01）。结论 尖锐湿疣表皮中存在着TGFβR、受体活化Smad和共有Smad蛋白的表达下调或缺失，可干扰TGFβ信号向下游的转导。失去TGFβ抑制作用的表皮角质形成细胞可出现异常增殖，导致尖锐湿疣表皮过度增殖病理改变的形成。     

尖锐湿疣组织中TGFβI、TGFβRII及cyclin E的表达

目的:检测转化生长因子βI(TGFβI)、转化生长因子β II受体(TGFβRII)和细胞周期素E(cyclin E)蛋白在尖锐湿疣(CA)组织中的表达.方法:采用免疫组化SP法和图像分析系统检测30例CA患者皮损,15名正常人皮肤(包皮)组织中TGFβI、TGFβRII及cyclin E的表达.结果:TGFβI和cyclin E在CA组织中的表达均显著高于正常皮肤组织(P<0.05);TGFβRII在CA组织中的表达显著低于正常皮肤组织(P<0.05);TGFβI与cyclin E在CA组织中的表达呈正相关(P<0.05);TGFβRII与cyclin E在CA组织中的表达呈负相关(P<0.05).结论:TGFβRII表达下调,使TGFβ信号传导通路受阻,降低了TGFβI对cyclin E表达的抑制作用,及其对细胞增殖的负性调节作用,使CA组织过度增殖,可能是CA发病机制之一.     

转化生长因子-β1 mRNA在银屑病皮损和外周血单一核细胞中的表达

银屑病是一种以表皮角质形成细胞(KC)过度增生为特征的皮肤慢性炎症性疾病。许多细胞因子促进了KC的增生，但转化生长因子β1(TGF—β1)对KC具有抑制生长作用。笔者的前期研究结果显示：TGF—β1在银屑病表皮KC中表达减少或缺失，那么在银屑病皮损损TGF—β1mRNA表达水平如何?患者外周血单一核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMC)中     

曲尼司特对人正常皮肤和瘢痕疙瘩成纤维细胞部分细胞因子表达的影响

目的 ：研究曲尼司特对正常皮肤和瘢痕疙瘩成纤维细胞转化生长因子-β1（TGF-β1）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和白介素-6（IL-6）表达的影响。方法：在体外无血清培养的人正常皮肤成纤维细胞和瘢痕疙瘩成纤维细胞中,分别加入0、10、25、50和250μg／mL曲尼司特孵育24、72、96h,用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ABC—ELISA）法测定其上清液中TGF-β1、bFGF和IL-6的表达水平。结果：与对照组相比。25、50和250μg／mL曲尼司特能抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β1的表达;50μg／mL和250μg／mL曲尼司特能增加瘢痕疙瘩成纤维细胞bFGF的表达;10～250μg／mL曲尼司特可降低IL-6的表达,上述改变在一定时段差异有统计学意义（P〈0．05）。不同浓度曲尼司特对正常皮肤成纤维细胞的影响相似。结论：曲尼司特能降低瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β1的产生。增加bFGF的合成,减少IL-6的表达,这或许可解释其在抑制异常瘢痕形成中的作用。     

皮肤纤维瘤中Smad 1/2/3、P-Smad2/3和Smad4蛋白质表达的检测

目的：探讨转化生长因子β（TGF—β）信号转导途径中Smad1、Smad2、Smad3（Smad1／2／3），磷酸化Smad2／3（p-Smad2／3）和Smad4蛋白在皮肤纤维瘤中的表达特点及其意义。方法：采用EliVision^TM plus免疫组化技术检测皮肤纤维瘤与正常对照皮肤中Smad1／2／3、p-Smad2／3和Smad4的表达情况。结果：与正常皮肤相比，Smad1／2／3、p-Smad2／3和Smad4蛋白在皮肤纤维瘤的增殖表皮中表达下调，但在真皮内瘤体中大量增殖的梭形细胞中表达却显著上调。结论：皮肤纤维瘤瘤体中梭形细胞Smad1／2／3、p-Smad2／3和Smad4蛋白表达上调可促进TGF—β信号转导，有助于皮肤纤维瘤中纤维增殖状态的形成。     

转化生长因子β及其受体Ⅰ、Ⅱ在银屑病皮损中的表达

目的　探讨转化生长因子 β(TGF β)及其受体Ⅰ、Ⅱ在银屑病角质形成细胞中的表达及其与银屑病的关系。方法　采用免疫组化方法检测TGF β1,TGF β2 ,TGF βRI,TGF βRⅡ在银屑病皮损、皮损周边正常皮肤及正常对照皮肤的原位表达。结果　与正常皮肤相比 ,TGF β1、TGF β2 、TGF βRⅠ和TGF βRⅡ在银屑病表皮基底层表达明显减弱或缺失 ;TGF βRⅡ在棘层至颗粒层的阳性表达率增加。结论　TGF β/TGF βR在银屑病皮损基底层的表达下调或缺乏 ,可能在银屑病角质形成细胞过度增殖中发挥作用 ,而且TGF β/TGF βR系统也可能与银屑病细胞异常分化有关     

槲皮素对瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原合成的影响

目的研究槲皮素对瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原合成的影响,探讨其作用机理。方法体外培养瘢痕疙瘩及正常皮肤成纤维细胞,应用羟脯氨酸比色法对不同药物浓度处理后成纤维细胞胶原合成量进行分析;RT-PCR及Real-timePCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGFβ-1基因表达水平。结果槲皮素可抑制体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原合成,该作用呈剂量依赖效应;槲皮素可降低Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGFβ-1基因mRNA水平。结论槲皮素对于瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原合成有显著抑制效应,其作用机制之一为通过抑制TGFβ-1基因在转录水平降低了前胶原mRNA水平,因而使成纤维细胞胶原合成减少。     

ROCK1基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖与迁移及相关分子表达的影响

目的研究ROCK1基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和迁移能力及相关分子表达的影响。方法免疫组化检测人瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中ROCK1蛋白的表达, Western印迹检测人瘢痕疙瘩组织中ROCK1、转化生长因子β1(TGF-β1)和E钙黏附蛋白(E-Cad)的表达。体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF), 分为ROCK1基因过表达对照组(ROCK1 NC组, 转染ROCK1基因过表达对照载体)、ROCK1基因过表达组(ROCK1 OE组, 转染ROCK1基因过表达载体)、ROCK1基因干扰对照组(sh NC组, 转染ROCK1基因干扰对照载体)、ROCK1基因干扰组(shROCK1组, 转染ROCK1基因干扰载体)共4组。细胞计数试剂盒8(CCK8)检测ROCK1基因对HKF存活率的影响;Transwell小室检测ROCK1基因对HKF迁移的影响;实时荧光定量PCR、免疫印迹检测ROCK1、TGF-β1和E-Cad基因mRNA和蛋白的表达。结果免疫组化检测显示, 人瘢痕疙瘩组织中ROCK1表达较正常组织显著降低(t = 6.47, P = 0.003);Western印迹检测显示, 与正常...     

转化生长因子-β1、-β受体Ⅰ和Smad7在皮肤鳞状细胞癌的表达及其意义

鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma)简称鳞癌,是常见的皮肤恶性肿瘤之一,目前其发病机制尚不十分清楚,但有研究认为其发病与Smads介导的转化生长因子(transfoming growth factor,TGF)-β信号通道关系密切[1].TGF-β1作为TGF-β家族的一员,是细胞生长的抑制因子,其对细胞生长抑制功能的减弱在细胞恶性转化过程中发挥重要作用[2].     

正常皮肤、增生性瘢痕与瘢痕疙瘩成纤维细胞培养及生物学特征的研究

目的:分析正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞在形态学、生长动力学及生物学的特性.方法:采用组织块培养法培养细胞;MTT法检测细胞在血清饥饿状态下的活性;免疫组织化学法检测3种成纤维细胞中结缔组织生长因子(CTGF)和胸苷磷酸化酶(TP)的表达.结果:正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞在形态与生长动力学上基本相似,血清饥饿对不同来源的成纤维细胞生长的影响并没有显著的差别.CTGF、TP在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞中均呈强阳性表达,而在正常皮肤成纤维细胞中的表达却很微弱,且有显著差别.结论:正常皮肤、增生性瘢痕与瘢痕疙瘩3类成纤维细胞在体外培养状态下,其形态、生长特性以及对血清饥饿的影响无显著差异.3类成纤维细胞对细胞因子具有不同的反应特性.