妍婷颗粒对脂多糖诱导小鼠脾细胞产生TNF-α的影响

[目的]研究中药复方妍婷颗粒对脂多糖(LPS)诱导小鼠脾细胞产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,初步探讨妍婷颗粒对慢性盆腔炎抗炎、免疫调节的内在机制.[方法]体外培养小鼠脾细胞用LPS刺激,用不同浓度妍婷颗粒含药血清干预,酶联免疫银光法(ELISA)法检测上清液中TNF-α含量,反向逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测细胞中TNF-α mRNA表达.[结果]1)经LPS诱导后小鼠脾细胞TNF-α分泌量明显升高,TNF-α mRNA表达增强.2)小鼠脾细胞TNF-α的分泌量与表达与妍婷颗粒含药血清浓度呈剂量依赖性.[结论]妍婷颗粒具有抑制LPS诱导的小鼠脾细胞产生TNF-α的作用,据此推测妍婷颗粒的抗炎、免疫调节作用机制可能与其抑制脂多糖介导的TNF-α释放有关.     

天麻素对高糖诱导的神经小胶质细胞IL-1β，IL-6表达的影响

目的:研究天麻素对高糖诱导的神经小胶质细胞白介素-lβ(IL-1β)、白介素-6(IL-6)表达的影响.方法:将体外培养的小鼠小胶质瘤细胞(BV-2细胞)分成对照组、高糖组、天麻素低、中、高(25,50,100 mg·L~(-1))剂量组,培养24 h,观察细胞形态.应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中IL-1β,IL-6蛋白浓度,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法评价IL-1β,IL-6 mRNA表达.结果:与对照组相比,高糖组培养24 h后,细胞出现聚集,胞体、胞核变大,枝状突起明显,胞浆内颗粒物增多现象,天麻素各剂量组上述改变较轻.与对照组相比,高糖组细胞培养上清液中IL-1β,IL-6浓度,以及细胞内IL-1β,IL-6 mRNA表达明显增加,具有显著统计学差异(P<0.05);而与高糖组相比,天麻素各组细胞培养上清液中IL-1β,IL-6浓度,以及细胞IL-1β,IL-6 mRNA表达均降低,均具有显著统计学差异(P<0.05),其中以中浓度天麻素组最为显著,与高、低浓度组相比,均具有显著统计学差异(P<0.05).结论:天麻素能抑制高糖诱导的神经小胶质细胞IL-1β,IL-6表达.     

妍婷灌肠液对炎性不孕大鼠输卵管肿瘤坏死因子α及细胞间黏附分子-1的影响

目的探讨中药复方妍婷灌肠液(妍婷)治疗输卵管炎性不孕的疗效与机制。方法以混合菌接种法制作Wistar雌性大鼠输卵管炎性不孕模型,分为正常对照组、模型对照组、妍婷灌胃组以及妍婷灌肠组。分别于术后20 d开始服药,至妍婷干预后15,30 d各取8只以观察疗效。用免疫组织化学方法检测大鼠输卵管组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白表达,并于疗程结束后每组各取8只,观察各组受孕情况。结果治疗组大鼠于妍婷干预15,30d后,输卵管组织中TNF-α及ICAM-1蛋白表达高于正常对照组,妍婷灌胃组低于模型组,妍婷灌肠组低于模型组和妍婷灌胃组。结论中药妍婷可以降低输卵管炎性大鼠组织中TNF-α及ICAM-1蛋白表达,疏解粘连,促进输卵管再通,提高受孕率,从而对大鼠输卵管炎性不孕具有很好的治疗作用。     

补肾固表颗粒对免疫低下小鼠血清IL-2、IFN-γ及NK细胞活性、脾淋巴细胞增殖的影响

目的探究补肾固表颗粒对免疫低下小鼠血清IL-2、IFN-γ、TNF-α、NK细胞及脾淋巴细胞增殖的影响。方法将60只ICR雄性小鼠随机分成6组,即空白对照组,模型组,玉屏风组,补肾固表颗粒高、中、低剂量组。除空白对照组外,其余各组腹腔注射环磷酰胺50 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续3 d,建立免疫抑制动物模型。各组给予相应药物灌胃,连续28 d。采用MTT比色法检测脾淋巴细胞增殖情况,LDH法检测NK细胞杀伤活性,ELISA法检测血清IL-2和IFN-γ水平。结果与模型组比较,补肾固表颗粒可增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞增殖能力(P0.05),提高脾淋巴细胞杀伤率(P0.001),使血清IL-2、IFN-γ和TNF-α含量显著升高(P0.01)。结论补肾固表颗粒可以增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞转化和杀伤能力,提高血清IL-2、IFN-γ和TNF-α分泌水平,从而改善机体的免疫功能。     

小檗碱对LPS、IL-4诱导的小鼠RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-10的影响

目的 观察小檗碱（Berberine,Ber）对脂多糖（LPS）以及白介素-4（IL-4）诱导的RAW264.7细胞株分泌炎症因子中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、抑炎因子白介素（IL-10）的影响,初步探讨Ber对巨噬细胞极化的影响。方法 噻唑蓝（MTT）法测定小檗碱对RAW264.7细胞增殖的影响,选取半数抑制浓度（IC50）以下的小檗碱浓度作为干预剂量;酶联免疫法（ELISA）检测小檗碱对LPS以及IL-4不同诱导状态下RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-10的影响。结果 小檗碱对RAW264.7细胞的IC50在400～800 μmol·L-1之间。LPS作用下RAW264.7细胞促炎因子TNF-α分泌量明显升高,Ber（剂量分别为5,10,20 μmol·L-1）有显著的抑制作用,并有剂量依赖关系（均P＜0.01）;而LPS刺激下细胞IL-10分泌量也明显升高（P＜0.05）,而Ber仅在20 μmol·L-1剂量下表现抑制作用。在IL-4作用下,RAW264.7细胞抗炎因子IL-10分泌量明显升高,Ber（剂量分别为5,10,20 μmol·L-1）有显著的抑制作用,并呈现剂量依赖关系（均P＜0.01）;IL-4作用下TNF-α分泌量明显降低（P＜0.05）,Ber对TNF-α分泌量的影响无剂量依赖性。结论 Ber对LPS刺激下促炎因子TNF-α的分泌具有抑制作用,对IL-4诱导下IL-10分泌量的升高也有抑制作用,提示Ber在巨噬细胞极化过程中有调节作用。     

木丹颗粒对谷氨酸钠诱导的胰岛素抵抗小鼠胰岛β细胞功能影响的实验研究

目的研究木丹颗粒（Mudan Granule, MD）对谷氨酸钠（monosodium glutamate,MSG）诱导的肥胖性胰岛素抵抗小鼠糖代谢及胰岛β细胞功能的影响。方法新生小鼠连续7日皮下注射MSG形成模型动物,选40只具有胰岛素抵抗特征的MSG小鼠,依照体重、空腹血糖、血脂TG、TC以及胰岛素耐量试验中40 min血糖下降百分数5个指标,随机分为4组,包括模型组（Con 组）,MD组低、高剂量组和二甲双胍组（Met 组）,另取10只ICR小鼠为正常对照组（Nor 组）,MD低剂量组和高剂量组分别给予2.5、5 g/kg体重的原料药干膏粉水溶剂,Met组给予0.2 g/kg体重的盐酸二甲双胍水溶液,Nor组和Con组均给予等剂量配药溶剂蒸馏水,每日灌胃给药1次,给药时长15周。期间进行胰岛素耐量（ITT）和口服葡萄糖耐量试验（OGTT）;采用高血糖钳夹技术评价β细胞功能;测定MSG小鼠胰腺中硝化应激相关指标（ONOO－、iNOS）的改变;胰腺组织HE染色,观察胰岛病理形态的变化;检测胰腺中炎症相关因子蛋白iNOS和NF-κB p65及其磷酸化蛋白（p-NF-κB p65）水平的改变。结果与Nor组比较,Con组的OGTT及ITT实验各时间点的血糖水平、AUC以及空腹血清胰岛素、ONOO－含量、iNOS活性、iNOS表达、NF-κB p65亚基表达、p-NF-κB p65亚基表达均明显升高, ITT实验40 min血糖下降百分数、葡萄糖输注速率（GIR）、一相及最大胰岛素分泌均明显降低（P〈0.05, P〈0.01）。与Con组比较,Met组可改善上述各项指标（P〈0.05, P〈0.01）;MD低组OGTT及ITT实验的AUC、iNOS活性、iNOS表达、p-NF-κB p65亚基表达均明显下降,ITT实验40 min血糖下降百分数及GIR均明显升高（P〈0.05, P〈0.01）;MD高组OGTT及ITT实验的AUC、ONOO－含量、iNOS活性、iNOS表达、NF-κB p65亚基表达、p-NF-κB p65亚基表达均明显下降,ITT实验40 min血糖下降百分数、GIR以及最大胰岛素分泌?     

清热化瘀颗粒对局部脑缺血模型海马内IL-1β及ICAM-1的影响

目的　研究清热化瘀颗粒对局部脑缺血模型海马内白细胞介素 - 1β(IL - 1β)、细胞间黏附分子 - 1(ICAM - 1)的影响。方法　将 12 0只大鼠随机分成药物组、生理盐水组和对照组 ,每组 30只。制作大鼠大脑中动脉栓塞 (MCAO)模型 ,分别在缺血 0 .5 ,3,12 ,2 4 ,12 0h后断头处死 ,每组每时相处死 6只 ,用ELISA法检测缺血脑组织海马区IL - 1β ,ICAM - 1的含量。结果　药物组与生理盐水组中IL - 1β,ICAM - 1的含量在各时相点均明显高于对照组 (P <0 0 5 ) ,对照组在各时相点IL - 1β ,ICAM - 1的含量无变化 ,而生理盐水组在各时相点IL - 1β,ICAM - 1均高于药物组 (P <0 .0 5 )。结论　局部脑缺血海马内IL - 1β及ICAM - 1表达增多 ,清热化瘀颗粒可降低缺血脑组织内IL - 1β ,ICAM - 1表达水平     

清利固精颗粒对系膜增殖性肾炎IL-1β及TGF-β1的影响

目的:探讨清利固精颗粒(主药:地骨皮、芡实、土茯苓)对大鼠抗Thy1系膜增殖性肾炎(MsPGN)IL1β及TGFβ1的影响。方法:本研究应用大鼠抗Thy1系膜增殖性肾炎(MsPGN)动物模型,将大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、肾炎康复片组、清利固精组,每组8只大鼠。各实验组于第7天处死大鼠,检测肾小球培养上清IL1β含量,检测肾组织TGF-β1含量。结果:模型组大鼠肾小球培养上清IL1β含量及肾组织TGFβ1含量比正常对照组明显升高(P<0.01);与模型组相比,清利固精组肾小球培养上清IL1β含量及肾组织TGFβ1含量明显下降(P<0.01);清利固精颗粒降低肾组织TGF-β1含量疗效优于肾炎康复片(P<0.05)。结论:清利固精颗粒能降低肾炎大鼠肾小球培养上清IL-1β水平和肾组织TGF-β1含量,抑制细胞增殖及细胞外基质增加,可能是其治疗MsPGN作用机制之一。     

黄芪多糖对1型糖尿病小鼠胰腺β细胞总质量的影响

目的:研究黄芪多糖对1型糖尿病小鼠胰腺β细胞总质量的影响.方法:以低剂量链脲菌素(STZ)多次腹腔注射,建立1型糖尿病小鼠模型,每天分别用黄芪多糖(APS)100,200,400 mg·kg-1或生理盐水腹腔注射,15,30 d时将小鼠处死.以免疫组织化学染色并复染观察胰岛炎性细胞浸润,以间接荧光免疫双标法检测Insulin/Ki67(Hoechst33258复染)、Insulin/Cleaved caspase-3的表达,观察胰腺细胞(包括β细胞)增生、β细胞新生、β细胞凋亡和β细胞总质量的变化,以半定量RT-PCR检验胰腺再生蛋白1 mRNA的表达水平,以ELISA法检测脾细胞IFN-γ和IL-4的分泌.结果:与对照组比较,APS处理组胰岛炎症减轻、β细胞总质量增加、新生胰岛增多、β细胞凋亡减少、Th1/Th2分泌因子比值下调,所有这些均与APS的剂量和使用持续时间密切相关.但关于胰腺的细胞增殖和β细胞增殖,APS处理组与对照组没有明显差别.结论:APS通过改善1型糖尿病小鼠的免疫功能增加胰腺β细胞总质量.     

IL-1β,IL-8在使用复方苦参洗剂治疗小鼠瘙痒症中的表达

目的：观察复方苦参洗剂对细胞因子白介素-1β（IL-1β）和白介素-8（IL-8）引起皮肤瘙痒的治疗作用,初步探讨复方苦参洗剂治疗皮肤瘙痒的作用机理。方法：采用磷酸组胺建立小鼠瘙痒模型,用即用型SABC法免疫组化染色后对各皮损部位的切片进行IL-1β、IL-8含量检测。结果：与空白组和基质组相比,复方苦参洗剂高、中、低各剂量组IL-1β、IL-8灰度值均降低,其差异有统计学意义（P〈0.05）;与炉甘石洗剂组相比,复方苦参洗剂高、中剂量组IL-1β、IL-8灰度值降低,其差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：复方苦参洗剂可明显抑制瘙痒模型小鼠皮肤组织中IL-1β和IL-8的含量,其改变程度与用药剂量有密切关系。     

生姜油对佐剂性关节炎小鼠血清IL-1 β和IL-4的影响

目的观察生姜油对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)小鼠血清IL-1β和IL-4的影响。方法将小鼠随机分成5组,即正常对照组、AA模型组、生姜油高剂量组(1.0ml·kg-1)、生姜油低剂量组(0.5ml·kg-1)、地塞米松组(1.0ml·kg-1),然后除正常对照组外,每只小鼠右后足跖皮下注射弗氏完全佐剂(FCA)制备AA小鼠模型。致炎后第8天起开始ig给药,1次/d,连续14d。分别在致炎后第8,12,16,20天测量小鼠足肿胀度,并于第21天处死小鼠,ELISA法测血清中IL-1β和IL-4。结果生姜油1.0,0.5ml·kg-1均能明显减轻小鼠足肿胀(P<0.01或P<0.05),生姜油1.0ml·kg-1可显著降低AA小鼠血清IL-1β(P<0.05),但对IL-4无明显的影响。结论生姜油对AA有抑制作用,其抗炎机制之一可能是降低血清IL-1β水平。     

郁金提取物对福尔马林致痛小鼠海马NF-κB蛋白表达和外周血清IL-1β含量的影响

目的:探讨郁金提取物对福尔马林引起的炎性疼痛小鼠镇痛作用的机制。方法:采用清醒小鼠单侧足底皮下注射5%福尔马林20μL,取小鼠海马组织和外周血清,采用免疫组化法测定各组小鼠海马组织CA1区核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达,采用放射免疫法测定各组小鼠外周血清白介素-1β(IL-1β)含量的变化。结果:郁金提取物能显著降低福尔马林模型小鼠外周血清中IL-1β的含量和海马组织CA1区NF-κB蛋白的表达(P0.01),其结果具有一定的剂量相关性。结论:郁金提取物对福尔马林引起的炎性疼痛干预作用可能与抑制NF-κB和及其下游因子IL-1β参与的炎症反应有关。     

逍遥散对愤怒模型小鼠脑组织中IL-1β、TNF-α的影响

目的:探讨逍遥散对愤怒小鼠脑组织中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平影响。方法:用50只小鼠分为正常组,模型组,逍遥散高剂量组(11g/kg)、中剂量组(7g/kg)、低剂量组(3g/kg)。夹尾刺激7天后测定其智力水平,小鼠断头处死取脑组织,匀浆取上清液,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测IL-1β,TNF-α水平变化。结果:模型组动物记忆力下降,IL-1β、TNF-α升高,使用逍遥散治疗后IL-1β、TNF-α降低。结论:逍遥散能够有效改善愤怒引起的食欲下降、学习能力降低等。同时逍遥散能够降低愤怒应激引起的脑组织中IL-1β和TNF-α的异常升高,趋于正常。     

三七总皂苷对肝纤维化小鼠血清中转化生长因子-β1及白介素-1的影响

目的观察三七总皂苷对肝纤维化小鼠血清中TGF-β1及IL-1的影响,探讨三七总皂苷抗肝纤维化可能的免疫学机理。方法用CC l4复制小鼠中毒性肝纤维化模型,同时给与三七总皂苷治疗,酶联免疫吸附实验(ELISA法)测定血清中TGF-β1及IL-1的水平,并行肝脏病理组织切片检测。结果三七总皂苷能显著降低肝纤维化小鼠血清中TGF-βl及IL-1的水平,减轻肝纤维化程度。结论三七总皂苷具有抗肝纤维化作用,其机理可能与降低血清中TGβ-p1及IL-1的水平有关。     

参地颗粒对慢性肾炎脾肾亏虚证患者血清肝细胞生长因子和转化生长因子-β_1的影响

目的：观察参地颗粒对慢性肾炎（CGN）脾肾亏虚证患者血清肝细胞生长因子（HGF）和转化生长因子-β1（TGF-β）1的影响。方法：将68例CGN脾肾亏虚证患者随机分为治疗组和对照组各34例,治疗过程中治疗组失访1例,对照组失访2例,治疗组33例服用参地颗粒治疗,对照组32例服用卡托普利片治疗。疗程均为8周。检测2组治疗前后血清HGF、TGF-β1水平,观察临床疗效、中医证候疗效、24h尿蛋白定量水平、尿沉渣红细胞计数水平变化。结果：临床疗效总有效率治疗组为84.85%,对照组为59.38%,2组比较,差异有显著性意义（P〈0.05）。中医证候疗效总有效率治疗组为87.88%,对照组为62.50%,2组比较,差异有显著性意义（P〈0.05）。治疗后治疗组24h尿蛋白定量较治疗前降低（P〈0.01）;对照组较治疗前无明显变化（P〉0.05）;治疗后治疗组24h尿蛋白定量亦低于对照组（P〈0.05）。治疗后治疗组尿沉渣红细胞计数水平较治疗前降低（P〈0.05）;治疗后对照组尿沉渣红细胞计数水平下降不显著（P〉0.05）;且治疗后治疗组尿沉渣红细胞计数水平较对照组也有明显降低（P〈0.05）。2组治疗前血清HGF、TGF-β1水平无明显差异（P〉0.05）;治疗后治疗组血清HGF水平较治疗前上升（P〈0.01）,对照组无明显变化（P〉0.05）,治疗后2组血清TGF-β1水平均有所下降（P〈0.01,P〈0.05）,但治疗组TGF-β1水平低于对照组（P〈0.05）。结论：CGN脾肾亏虚证患者血清HGF水平降低、TGF-β1水平升高,参地颗粒可升高患者血清HGF水平、降低TGF-β1水平,减轻临床症状,降低尿蛋白和红细胞计数水平。     

平喘颗粒对哮喘小鼠NLRP3/Caspase-1/IL-1β通路的影响

目的 观察平喘颗粒对哮喘小鼠NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/白细胞介素-1β(IL-1β)通路的影响,探讨平喘颗粒治疗哮喘的作用机制。方法 将40只健康雌性小鼠随机分为空白组、模型组、布地奈德组及平喘颗粒组,每组10只。除空白组外,其余组建立哮喘模型。于致敏的前1 d开始,布地奈德组给予布地奈德混悬液0.5 mg/mL雾化吸入30 min,平喘颗粒组给予平喘颗粒药液31.2 g/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积的0.9%氯化钠注射液灌胃,均连续干预4周。末次干预结束后,HE染色观察各组小鼠肺组织病理改变,ELISA检测肺泡灌洗液中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-18(IL-18)水平,RT-qPCR检测肺组织中NLRP3、Caspase-1和IL-1βmRNA表达情况。结果 与空白组比较,模型组小鼠气道大量炎性细胞浸润,肺泡灌洗液中IL-6、IL-18水平和肺组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA相对表达量均明显升高(P均<0.05)。与模型组比较,平喘颗粒组和布地奈德组小鼠气道炎症浸润明显减轻,肺泡...     

HPLC法测定妍婷颗粒中芍药苷的含量

1 材料 仪器:美国Waters公司高效液相色谱系统:2996 Photodiode Array Deteetor,2965 Separations Module,Empower工作站;色谱柱:Kromasil C18 5μm(中国科学院大连化学物理研究所);SPD紫外检测器:MP2000电子天平,上海第二天平仪器厂.     

三七有效成分对人子宫内膜细胞培养液TNF-α和IL-1β含量的影响

目的利用细菌脂多糖(LPS)诱导正常子宫内膜细胞,导致细胞发生炎症反应的体外细胞模型,研究三七不同有效成分干预炎症细胞模型后,其细胞培养液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化.方法比较不同浓度的三七有效成分对正常子宫内膜细胞生长的抑制率,筛选最佳浓度的三七有效成分干预炎症子宫内膜细胞模型,测定其两个时间段(48h、72h)的、TNF-α、IL-1β的浓度.结果1.通过对三七有效成分5个梯度剂量进行剂量筛选,采用四氮唑蓝(MTT)法测定发现,符合药物对细胞的抑制率(IR)≤10%的为三七有效成分第3组(三七皂苷0.0408mg/mL+三七氨酸0.002mg/mL).2.3个药物干预组TNF-α和IL-1β浓度都明显低于同时段的模型组(P＜0.01).但是与正常对照组相比,两时段的三七皂苷组和三七氨酸组TNF-α和IL-1β的浓度含量还是明显高于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01),而三七复方组与正常对照组比较无明显差异.结论1.三七有效成分的剂量筛选的第3组(三七皂苷0.0408mg/mL+三七氨酸0.002mg/mL)可做为干预炎症子宫内膜细胞模型的三七复方的药物浓度,干预的时间及用量的定量化,为进一步的实验研究提供了必要的基础.2.三七的各有效成分可不同程度地抑制炎症细胞因子TNF-α、IL-1β的分泌.     

蜈蚣败毒饮对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成及血清IL-2影响的实验研究

目的：观察中药蜈蚣败毒饮对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成及血清IL-2水平的影响,初步探讨其治疗银屑病的作用机理。方法：取雌雄各半昆明种小鼠50只,随机分成5组。中药组分别给予低、中、高浓度蜈蚣败毒饮灌胃,阳性对照组给予复方青黛丸悬浊液灌胃,生理盐水组给予生理盐水灌胃。观察蜈蚣败毒饮对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的影响,并测定IL-2含量。结果：阳性对照组、中药各剂量组与生理盐水组比较颗粒层细胞均有所增多。蜈蚣败毒饮中、高剂量组颗粒层细胞增多更为明显,能够显著促进小鼠尾部鳞片中颗粒层形成,与阳性对照组比较有显著性差异（P〈0.05或P〈0.01）。蜈蚣败毒饮能降低小鼠血清IL-2的水平,与生理盐水组比较,有显著性差异（P〈0.01）;且蜈蚣败毒饮高剂量组的效果优于复方青黛丸及各剂量组,有显著性差异（P〈0.05）。结论：蜈蚣败毒饮抗银屑病的作用可能与改善银屑病表皮细胞角化不全及降低血清IL-2水平有关。