小檗碱对肝细胞核因子4α表达及葡萄糖激酶活性的影响

目的：观察小檗碱对小鼠原代肝细胞核因子4α（HNF4α）表达及葡萄糖代谢关键酶葡萄糖激酶（GK）活性的影响，探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制。方法：采用改良两步灌流法培养小鼠原代肝细胞，用不同浓度的小檗碱（0，1，3，10，30，100μmol·L^-1）和1mmol·L^-1二甲双胍干预24h后，采用RT-PCR方法检测HNF4αmRNA表达；采用Westernblot方法检测HNF4α蛋白的表达，同时检测GK的活性。结果：与阴性对照组相比，小檗碱在10，30，100μmol·L^-1时能够明显促进HNF4α mRNA及蛋白的表达，二者同时在30μmol·L^-1时达到最大值（HNF4αmRNA相对吸光度为0．48±0．20，蛋白相对吸光度为3．47±0．86，P〈0．01）；在10，30μmol·L^-1时明显上调GK活性，同时在30μmol·L^-1时达到最大值（0．080±0．073，P〈0．05）；而二甲双胍对HNF4α mRNA、蛋白的表达及对GK活性的影响则与阴性对照组无明显差异。结论：小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节肝细胞核因子4仅的表达进而调节GK活性有关。     

甲基莲心碱对LPC诱导内皮细胞损伤的保护作用及与ADMA的关系

目的：观察甲基莲心碱对溶血性磷脂酰胆碱（1ysophosphatidylcholine，LPC）诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及其与非对称性二甲基精氨酸（asymmetricdimethylarginine，ADMA）的关系。方法：10mg·L^-1的LPC孵育人脐静脉内皮细胞株（HUVEC-12）24h或0．1，1．0，10．0μmol·L^-1甲基莲心碱预处理HUVEC-12细胞1h，再予LPC孵育细胞24h，收集细胞上清液测定-氧化氮（NO）、丙二醛（MDA），ADMA含量和收集细胞测定细胞内活性氧（ROS）水平。结果：LPC孵育HUVEC-12细胞24h后细胞上清液中MDA，ADMA含量及细胞内ROS水平显著性增加（P〈0．05），细胞上清液中N0含量显著性降低（P〈0．05）；0．1，1．0，10．0μmol·L^-1的甲基莲心碱预处理组ROS水平，MDA，ADMA含量显著降低，NO含量显著性升高（P〈0．05）。结论：甲基莲心碱对LPC诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用，该作用可能与其降低ADMA水平有关。     

维药老鼠瓜不同部位中白花菜苷的含量测定

目的测定维药老鼠瓜不同部位中白花菜苷的含量。方法高效液相色谱HPLC定量分析法，色谱柱为Phnomenex ODS柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-0．002mol·L^-1氯化钾溶液（15：85）；流速0．8ml．min^-1；检测波长224nm；柱温25℃。结果白花菜苷在1．96～58．8μg·ml^-1范围内呈现良好的线性关系（r=0．9999），回归方程为：Y=13685．4X-109．1，平均回收率为96．3％（RSD=2．0％）。结论该法简便、准确、重复性好，对老鼠瓜药材的鉴别和质量控制有一定的意义。     

升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对TNF-α所致大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响。方法：建立大鼠胸主动脉平滑肌细胞原代培养方法，将细胞分为空白组、模型组、升麻苷组、5-O-甲基维斯阿米醇苷组，并采用细胞计数法和免疫化学方法分别对平滑肌细胞的生长特性和纯度进行测定。用MTT法观察升麻苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷各剂量组拮抗肿瘤坏死因子（TNF—α）诱导平滑肌细胞增殖的作用，用流式细胞技术测定升麻苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷对平滑肌细胞周期的影响。结果：升麻苷（50，100，200mg·L^-1）和5-O-甲基维斯阿米醇苷（50，100，200mg·L^-1）均能明显抑制TNF—α引起的平滑肌细胞增殖，与TNF—α组相比有极显著差异（P〈0．01）。升麻苷（50，100，200mg·L^-1）和5-O-甲基维斯阿米醇苷（50，100，200nag·L^-1）均使G1／G0期细胞比例增加，S期、G2／M期细胞比例减少，与TNF—α组相比差异极显著（P〈0．01）。结论：升麻苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷对TNF-α引起的平滑肌细胞增殖有明显的抑制作用。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中的芍药苷及其药动学研究

目的：建立HPLC-MS／MS分析方法测定大鼠血浆中的芍药苷含量，并用于研究当归对赤芍主要有效成分芍药苷的药动学影响。方法：质谱检测方式一：多反应离子监测，选择监测的离子为m／z450～m／z327（芍药苷）和m／z388～m／z225（栀子苷）。大鼠分别灌胃赤芍煎液和赤芍及当归煎液，芍药苷剂量均为294．78mg·kg^-1。HPLC-MS／MS法测定芍药苷的血药浓度，并计算芍药苷药动学参数。结果：单独服用赤芍煎液时芍药苷的主要药动学参数分别为Cmax（1．55±0．53）mg·L^-1，Tmax（0．9±0．3）h，t1/2（1．51±0．63）h，MRT（3．08±0．74）h，AUC0→T（4．68±0．85）mg·h^-1·L^-1。同时服用当归煎液和赤芍煎液时芍药苷的Cmax，Tmax，t1/2,MRT，AUC0→T，分别为（0．93±0．42）mg·L^-1。，（1．5±0．8）h，（3．08±1．79）h，（5．19±1．95）h，（3．36±0．56）mg·h-1·L^-1。两组药动学参数中，MRT，Cmax和AUC0→T具有显著性差异（P〈0．05）。结论：当归能显著影响赤芍主要有效成分芍药苷的药动学。     

芦丁在不同介质中平衡溶解度的测定

目的测定芦丁在水、0．1mol·L^-1 HCl和不同pH值磷酸盐缓冲液中的平衡溶解度。方法，采用紫外分光光度法测定芦丁在水、0．1mol·L^-1 HCl和磷酸盐缓冲液中的浓度。结果37℃下，芦丁在水中的平衡溶解度为194．57mg.L^-1;在0．1mol．L^-1 HCl中的平衡溶解度为173．08mg·L^-1；在磷酸盐缓冲溶液中随缓冲液pH值增加（2．5—7．8），其溶解度由55．48mg·L^-1递增到521．08mg·L^-1。结论芦丁极微溶于水；芦丁的溶解度受介质的pH值影响大。     

雾化吸入银杏叶总黄酮对哮喘小鼠Th1／Th2失衡的影响

目的：研究银杏叶总黄酮（total ginkgo flavone glycosides，TFG）对哮喘小鼠辅助性T细胞1／辅助性T细胞2（Th1／Th2）失衡的影响。方法：48只BALB／e小鼠随机分为正常组、哮喘组、TGF雾化吸入组以及地塞米松组，以卵蛋白（OVA）、氢氧化铝免疫系统致敏和局部激发的方法建立哮喘模型。自实验第21天起给予TFG治疗组连续雾化吸入50g·L^-1TFG溶液30min，地塞米松组腹腔注射地塞米松1mg·kg^-1，连续10d。第32天酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法测定肺细胞灌洗液（bronehalveolar lavage fluid，BALF）中细胞因子γ-干扰素（interferon-γ，IFN-γ）、白介素-4（interleukin-4，IL-4）和血清中总免疫球蛋白E（immunoglobulin E，IgE）含量，观察各组肺组织的病理变化，免疫组织化学染色技术检测肺组织中GATA连接蛋白-3（GATA binding protein-3，GATA-3）的表达情况。结果：与模型组比较，TFG组BALF中IL-4含量（49．30±7．95）ng·L^-1降低（P〈0．01）、IFN-γ水平升高（49．08±5．46）ng·L^-1（P〈0．01）、血浆总IgE水平降低（9．47±1．52）μg·L^-1（P〈0．01）；模型组支气管平滑肌肥厚，黏膜充血、水肿，管腔内可见黏液栓，并有大量炎性细胞浸润；而TFG组和地塞米松组小鼠的上述炎症性改变明显减轻；模型组GATA-3表达显著，TFG治疗组则明显减轻。结论：雾化吸入TFG对哮喘小鼠有明显的治疗作用，其机制可能与阻断GATA-3的表达、恢复Th1／Th2平衡有关。     

As2O3对大鼠生精细胞凋亡及其Bcl-2/Bax表达的变化

目的；观察不同剂量的染砷（As2O3）大鼠生精细胞凋亡及其Bcl-2／Bax表达的变化。方法：40只健康雄性sD大鼠随机分成4组，分别为0．375，0．75，1．5mg·kg^-13个染毒组和正常正常组，灌胃法连续给药16周后处死，对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数，并计算每日精子生成量（DSP）。采用TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡，免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2／Bax的表达。结果：①与正常组相比，中剂量组（0．75mg·kg^-1）和高剂量组（1．5mg·kg^-1）睾丸精子头计数和DSP均显著降低（P〈0．01），生精细胞凋亡指数（AI）显著升高（P〈0．01），生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低（P〈0．01），Bax表达明显升高（P〈0．01）；②DSP与生精细胞AI呈负相关（r=-0．563，P〈0．01）；③生精细胞凋亡与Bcl-2表达呈负相关（r=-0．825，P〈0．01），与Bax表达呈正相关（r=0．710，P〈0．01）。结论：一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2和促进Bax的表达，诱导生精细胞凋亡增加而导致精子生成量的减少，产生雄性生殖毒性。     

鸦胆子油乳对人肺癌A549细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的：研究鸦胆子油乳对人肺癌A549细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表达的影响。方法：以健康人外周血单个核细胞（peripheral polymorphonuclear neutrophil，PMN）为正常对照，分别用不同剂量的鸦胆子油乳（0．5，1．25，2．5，5g·L^-1）与人肺癌A549细胞共育48h，采用定量sandwich酶免疫技术和RT—PCR法分别测定PMN细胞和A549细胞培养上清液VEGF分泌和细胞内VEGFmRNA的表达，未加药组采用等量RPMI1640培养液。结果：A549细胞上清液VEGF分泌量较外周血单个核细胞显著上升（120．73VS21．21，P〈0．05），2.5g·L^-1鸦胆子油乳作用48h能使A549细胞VEGF分泌显著减少（20．30vs120．73，P〈0．05）。A549细胞VEGFmRNA表达较骨髓单个核细胞也显著七升（0．9573VS0．4649，P〈0．05），鸦胆子油乳（0．5，1．25，2．5g·L^-1）作用48h对A549细胞VEGFmRNA表达无显著影响，5g·L^-1鸦胆子油乳可显著降低A549细胞VEGF、mRNA表达（0．4682VS0．9573，P〈0．05）。结论：鸦胆子油乳能降低A549细胞VEGF的分泌和表达，该作用可能足其抗肿瘤的作用机制之一。     

HPLC-电化学检测法用于黄芩苷和黄芩素大鼠血浆稳定性研究

目的：考察黄芩苷（BG）和黄芩素（B）在缓冲液及大鼠血浆中的稳定性，建立测定二者在大鼠血浆中含量的样品处理方法，并初步探讨二者在血浆中稳定性的影响因素。方法：采用HPLC-电化学检测法，分别考察BG，B在不同条件下的稳定性及使二者稳定的条件。结果：BG，B在大鼠血浆中较在pH7．4的缓冲液中更不稳定。在pH7．4缓冲液中加入抗氧化剂可使BG和B的稳定性明显提高，剩余百分含量达到102％和100％；在大鼠血浆中加入抗氧化剂及1mol·L^-1。HCl可使BG和B的稳定性明显增加，剩余百分含量可分别达到98％和103％。结论：BG和B在pH7．4缓冲液中的稳定性主要受氧化影响，BG和B在血浆中的稳定性不仅与氧化有关，还受血浆中的内源物质影响，最终确定每1mL大鼠血浆中加入抗氧剂及100μL 1mol·L^-1HCl为血浆样品的处理条件，此条件可使样品稳定。     

氨基葡萄糖与铜钴镍三种金属离子的配位性能研究

目的 研究氨基葡萄糖的质子化和与Cu2 ,Co2 ,Ni2 的配位性能.方法 用pH电位滴定法测定(298±0.1)K,I=0.10 mol/LKNO3条件下氨基葡萄糖的质子化常数及与Cu2 ,Co2 ,Ni2 的二元配合物的生成常数.结果 氨基葡萄糖pKa为7.78,配合物生成常数的对数分别为Cu2 ,5.22(110),9.38(120);Co2 ,3.19(110),5.99(120);Ni2 ,3.40(110),6.31(120).结论 氨基葡萄糖与Cu2 ,Co2 ,Ni2 配位时不解离出醇羟基质子,不同金属离子配合物生成常数的大小符合Irving-William序列.     

关于PD2、PA2、PD2＇计算方法的探讨

目的：叙述近年来关于PD2、PA2、PD2’各自含义、计算方法，以阐明其研究意义。方法：通过对药理实验方法学中有关内容的阐述，以及对近10年来相关文章的对比分析和总结，得到一些对今后的药物研究有帮助的参考性知识。结论：PD2、PA2、PD2’的测定基本上是首先通过某一药物的动物或计算机虚拟实验，然后用图解法、计算方法（包括软件计算）或者二者联用的方法三种思路求得各自具体数值。     

补骨脂乙素诱导HepG2细胞凋亡及对Bcl-2家族表达的影响

目的:观察补骨脂乙素对人肝癌细胞HepG2凋亡及其相关蛋白的影响。方法:用不同浓度补骨脂乙素(3、4、5、6和7mg/ml)处理HepG2细胞24h后,MTT法检测药物对细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:补骨脂乙素4mg/ml即能抑制HepG2细胞的增殖并诱导其凋亡,7mg/ml时凋亡率可达94.57%,在浓度4～7 mg/ml之间有良好的量效关系。补骨脂乙素浓度为7mg/ml时促凋亡蛋白Bax、Bid表达明显增加、抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少。结论:补骨脂乙素4mg/ml能诱导HepG2细胞凋亡,可能与其影响Bcl-2家族蛋白的表达有关。     

Manuscript Preparation-Part 2

正1.Main Text The preferred length of an original article is no more than 8000 words,and review no more than 10000 words.Text is usuallybut not necessarily-divided into the Introduction,Methods,Results,and Discussion sections.Headings and subheadings may be used to clarify their content,especially in the Methods,Results,and Discussion(including conclusion).Every reference,figure