诺帝对HPV16型亚基因永生化人宫颈上皮细胞的诱导分化作用

目的 研究诺帝(Nordy)对HPV16型亚基因(E6、E7)永生化人宫颈上皮细胞(H8细胞)的诱导分化作用.方法 MTT法检测诺帝对H8细胞增殖的抑制作用,流式细胞术(FCM)分析细胞周期,免疫细胞化学S-P法检测增殖细胞核抗原Ki67的表达,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性变化.结果 诺帝能够明显抑制H8细胞增殖;可阻滞细胞周期于G0/G1期,S期细胞减少;细胞核内Ki67蛋白的表达水平明显下降;端粒酶活性明显降低.结论 诺帝对H8细胞有诱导分化作用,这种作用可能是通过抑制增殖,阻滞细胞周期,降低端粒酶活性来实现的.     

单磷酸阿糖腺苷对下呼吸道感染的治疗作用

目的单磷酸阿糖腺苷是一种新型抗病毒药,我院呼吸科采用肌内注射或静脉注射单磷酸阿糖腺苷粉针,治疗下呼吸道感染34例.结果 临床治愈12例(35.29%),有效19例(55.88%),总有效率(91.18%)且未发现严重不良反应.     

ATRA诱导HPV16型亚基因永生化人宫颈上皮细胞分化的实验研究

目的:研究ATRA对HPV16型亚基因(E6、E7)永生化人宫颈上皮细胞(H8细胞)的诱导分化作用及机制.方法:H8细胞经ATRA处理后,用MTT法测定ATRA的抗增殖效应,光镜、电镜观察细胞形态变化,流式细胞术(FCM)检测细胞周期,免疫组化SABC法检测增殖细胞核抗原Ki67表达水平的变化,PCR-ELISA法检测端粒酶活性变化,荧光免疫细胞化学检测HPV和E6蛋白表达变化.结果:ATRA使H8细胞增殖抑制;细胞形态朝良性方向分化;细胞堆积于G1期,S期细胞减少;细胞核内Ki67的表达水平下降;端粒酶活性下降.结论:ATRA对H8细胞有明显诱导分化作用,这种作用可能是通过抑制增殖,阻滞细胞周期,降低端粒酶活性来实现的.     

单磷酸阿糖腺苷对慢性乙型肝炎疗效观察

我院自１９９７年１０月～１９９８年８月应用单磷酸阿糖腺苷治疗慢性乙型肝炎４２例,取得了较好的疗效,现报道如下。１　材料与方法１．１　病例选择　所选病例为１９９７年１０月～１９９８年８月在我院门诊及住院的慢性乙型肝炎病人,均符合１９９０年全国第六次病毒...     

单磷酸阿糖腺苷对乙肝患者血清标志物的作用

用国产单磷酸阿粮苷（ARA－AMP）合用胸腺治疗漫性乙型肝炎（慢性乙肝）39例，并以精制白细胞干扰素合用胸腺肽39例进行配对研究，主要观察患者乙肝病毒血清标本物和的作用．结果发现ARA－AMP合用胸腺肽疗效较好，在治疗结束对和治疗结束后6月的HBeAg明转率为69．23％和66．66％；HBV－DNA阴转串为61．54％和51．28％，两者阴转率均显著高于对照组（P旨＜0．05），但对HBSHg的作用无明显差异（P＞0．05）．在用药过程中未见ARA－AMP任何毒副作用。研究提示：ARAAMP是治疗慢性乙肝有效、安全的制剂．     

人巨细胞病毒促进HPV16永生化的宫颈皮细胞癌变研究

探讨宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒和人巨细胞病毒协同感染的关系。方法：本实验应用我国室建立的ＨＰＶ１６永生化的人宫颈上皮细胞系,转染ＨＣＭＶ即早基因。结果：ＨＣＭＶ整合在细胞染色体中,协同ＨＰＶ１６促进宫颈上细胞的恶性化,在裸鼠中形成肿瘤。     

鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及体外对HPV感染的永生化人宫颈上皮细胞的作用

目的研究鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)的体外对HPV感染的永生化人宫颈上皮细胞的作用。方法采用乳化蒸发法制备POD-NLC,分别应用扫描电镜、粒径仪、高效液相法等方法研究其表征,并观察其稳定性。分别以不同浓度(0.0001~1μg/ml)的POD-NLC和鬼臼毒素(POD)处理H8细胞,采用MTT法检测细胞的增殖活性,以荧光显微镜观察细胞的形态变化,流式细胞术(FCM)检测其凋亡率和细胞周期。结果◆制备的POD-NLC扫描电镜下呈球形,有较好的稳定性,粒径为(85.6±10.25)nm,电位为(26.2±4.1)mV,包封率为(88.56±3.1)%;◆POD-NLC能较强地抑制H8细胞的增殖,其抑制作用呈现时间和剂量依赖性;POD-NLC和POD作用72h对H8细胞的抑制率最高分别为95.8%、65.6%,半数抑制浓度(IC50)分别为0.015、0.13μg/ml;空白NLC对H8细胞的增殖无影响;◆浓度为0.01μg/ml的POD-NLC和POD分别处理H8细胞48h后,H8细胞的凋亡率分别为(88.30±4.28)%和(59.95±3.26)%;荧光显微镜观察,均出现了核固缩、染色质高度凝聚、凋亡小体等典型的凋亡形态改变;与空白对照组相比,POD-NLC组和POD组G2/M期细胞比例明显增多,S期细胞比例无明显变化,G0/G1期细胞比例明显减少,但两组间细胞周期时相比例的差异无统计学意义(P>0.05)。结论该制备工艺可行;与POD相比,POD-NLC对H8细胞具有更强的增殖抑制和凋亡诱导效果,可使细胞阻滞于G2/M期,显示出良好的抗宫颈HPV感染的效果。     

木黄酮对宫颈永生化上皮细胞的影响及其对细胞周期的调控机制

目的:观察木黄酮对人宫颈永生化上皮细胞生长的抑制作用,并探讨其调控细胞周期的相关机制.方法:本研究采用人宫颈永生化上皮细胞系(H8细胞),应用磺酰罗丹明B(SRB)法,绘制细胞生长曲线,获得抑制50%细胞生长所需药物浓度(IC50).应用流式细胞仪分析细胞周期.免疫荧光法检测细胞周期调控因子cyclin D1,cyclin B1,CDK4,cdc2和p21的蛋白表达,RT-PCR半定量法检测其mRNA表达.结果:不同浓度的木黄酮对H8细胞有生长抑制作用,并呈剂量依赖关系.木黄酮对H8细胞作用d5的IC50为55μM.木黄酮作用后使H8细胞阻滞于G2/M期.木黄酮作用3d后,开始显著下调H8细胞cdc2的mRNA和蛋白表达(P＜0.05).其对H8细胞cyclin D1、cyclin B1、CDK4和p21的mRNA和蛋白表达均无影响(P＞0.05).结论:木黄酮可以抑制宫颈永生化上皮细胞的生长,其作用机制之一可能是通过下调其cdc2的表达.     

HPV16 E6/E7永生化口腔上皮细胞的上皮-间叶变

目的研究人乳头状瘤病毒HPV16 E6／E7永生化口腔上皮细胞的上皮-间叶变(EMT)，以及发生EMT细胞的生物学特征。方法相差显微镜、微分干涉显微镜观察HPV16 E6／E7永生化口腔上皮细胞系HIOEC细胞形态学改变；透射电镜观察细胞间桥粒形成情况；RT-PCR比较正常口腔上皮细胞和HIOEC细胞中β-catenin、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、wnt-4、wnt-5a、snail基因的转录情况；免疫组化检测HIOEC细胞中细胞角蛋白(CK)、波形蛋白(Vim)的表达。免疫荧光、激光共聚焦显微镜观察Actin细胞骨架的改变。结果HIOEC细胞呈梭形成纤维细胞样改变，细胞分散生长；RT—PcR结果显示HIOEC细胞E-cadherin、want-4转录水平下调，wnt-5a转录水平上调，β-catenin、snail基因无明显改变。HIOEC细胞共表达CK和Vim。Actin细胞骨架在HIOEC细胞中更显丰富，呈束排列。结论HPV16 E6／E7永生化口腔上皮HIOEC细胞发生上皮一间叶变，细胞表现间叶细胞的部分生物学特征。     

HPV16 E6/E7永生化口腔上皮细胞的上皮-间叶变

目的研究人乳头状瘤病毒HPV16 E6/E7永生化口腔上皮细胞的上皮-间叶变(EMT),以及发生EMT细胞的生物学特征.方法相差显微镜、微分干涉显微镜观察HPV16 E6/E7永生化口腔上皮细胞系HIOEC细胞形态学改变;透射电镜观察细胞间桥粒形成情况; RT-PCR比较正常口腔上皮细胞和HIOEC细胞中β-catenin、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、wnt-4、wnt-5a、snail基因的转录情况;免疫组化检测HIOEC细胞中细胞角蛋白(CK)、波形蛋白(Vim)的表达.免疫荧光、激光共聚焦显微镜观察Actin 细胞骨架的改变.结果 HIOEC细胞呈梭形成纤维细胞样改变,细胞分散生长;RT-PCR结果显示HIOEC细胞E-cadherin、wnt-4转录水平下调, wnt-5a转录水平上调,β-catenin、snail基因无明显改变.HIOEC细胞共表达CK和Vim.Actin细胞骨架在HIOEC细胞中更显丰富,呈束排列.结论 HPV16 E6/E7永生化口腔上皮HIOEC细胞发生上皮-间叶变,细胞表现间叶细胞的部分生物学特征.     

单磷酸阿糖腺苷联合胸腺肽对乙肝病毒复制标志物作用的研究

该文报告选择１１６例慢乙肝分为３组,单磷酸阿糖腺苷联合胸腺肽治疗组（Ⅰ组）４６例,抗惭肝免疫核糖核酸治疗组（Ⅱ组）３６例,对照组（Ⅲ组）３４例。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组ＨＢｅＡｇ阴转率分别为６３．９％、３１．３％和１６．７％;ＨＢＶＤＮＡ阴转率分别为５６．８％,１９．０％和１４．３％;抗ＨＢｃＩｇＭ阴转率分别为５６．０％,３３．３％和２５．９％。显示单磷酸阿糖腺苷联合胸腺肽治疗对乙肝病毒复制有较好的抑制作用,     

单磷酸阿糖腺苷多次十日疗法对慢性乙型肝炎的治疗

单磷酸阿糖腺苷和它的前体阿糖腺苷是具有强抗病毒活性的一类物质。有报道认为两者对降低乙肝病毒的血清学标志的滴度及导致慢性乙肝的长期缓解均有疗效。作者对十例患慢性乙肝1～4年不等且从没有进行过抗病毒治疗的男性患者,用单磷酸阿糖腺苷10mg/kg/天肌内给药治疗三个疗程(每一疗程十天,连续治疗三个月),并追踪12     

HPV16基因组甲基化对宫颈病变的影响

人乳头瘤病毒(HPV)导致的生殖道感染是宫颈癌及癌前病变的主要诱因。高致病性HPV16亚型感染可增加宫颈癌的患病风险,但多为自限性感染,仅部分患者发生宫颈癌变,故仍需对HPV携带者的癌变风险进行精确的检测和判断。HPV DNA甲基化与癌症发生发展密切相关,HPV DNA甲基化与病毒载量、复制转录以及病毒致瘤性具有相关性。准确鉴定HPV相关的甲基化模式对宫颈上皮内瘤变具有较好的诊断价值,将有助于改善宫颈癌癌前病变患者的筛查、临床诊断及治疗。     

黄芪注射液对宫颈永生化上皮细胞生长的作用及其细胞周期调控机理

目的:研究黄芪注射液对宫颈永生化上皮细胞生长的调节作用及细胞周期调控机理。方法:选择宫颈永生化上皮细胞(H8细胞)进行实验,用不同浓度的黄芪注射液进行处理,采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测不同细胞周期的比例以及不同免疫细胞亚群的含量,采用PCR法检测细胞周期相关蛋白的mRNA含量。结果:黄芪注射液处理能够以剂量依赖性的方式降低细胞活力,200μg/mL浓度的抑制效应最显著;200μg/mL黄芪处理组的NK细胞、CD3~+CD4~+CD8~-T细胞含量以及CD3~+CD4~+CD8~-/CD3~+CD4~-CD8~+T细胞比例高于0μg/mL黄芪处理组,CD3~+CD4~-CD8~+T细胞含量低于0μg/mL黄芪处理组;200μg/mL黄芪处理组的G0/G1期、S期细胞比例以及cyclinA、cyclinB、cyclinD1的mRNA含量低于0μg/mL黄芪处理组,G2/M期细胞比例高于0μg/mL黄芪处理组(均P<0.05)。结论:黄芪注射液对宫颈永生化上皮细胞的生长具有抑制效应,其作用途径包括调节免疫细胞含量、停滞细胞周期和下调细胞周期相关蛋白的表达。     

挥发性有机物对永生化支气管上皮细胞的急性毒性

目的评估家装材料中典型挥发性有机物(VOCs)混合物体外条件下对永生化支气管上皮细胞(BEAS-2B)所致的急性毒性。方法选取装修材料中常见的12种挥发性有机物及其混合物作为研究对象,以液体染毒方式处理细胞,检测染毒后细胞的LC50、克隆存活、活性氧(ROS)产生和胞外乳酸脱氢酶(LDH)的变化,确定VOCs混合物的急性毒性。结果各VOCs作用于细胞后,其LC50值由0.70 g/L到22.80 g/L不等,而VOCs混合物细胞的LC50和克隆存活的LC50分别为0.82 g/L和0.30 g/L,毒性明显升高,展示出独特的化学性质和毒性特质,表明VOCs混合物的毒性效应是12种成分毒性效应的联合作用(协同、加强、超相加)的结果。同时VOCs混合物还诱导BEAS-2B细胞产生大量活性氧.OH和O2.-,使胞外LDH升高,且各效应与毒物作用剂量成正相关关系。结论VOCs混合物细胞毒性明显升高,表现为各成分的联合作用。它可诱导BEAS-2B细胞产生活性氧(ROS),引起细胞膜受损而死亡。且VOC混合物的急性毒性效应在高剂量时呈现细胞致死效应,较低剂量时呈现一种细胞转化效应。     

单磷酸阿糖腺苷联合乙肝疫苗对乙肝病毒标志阴转的疗效观察（摘要）

单磷酸阿糖腺苷联合乙肝疫苗对乙肝病毒标志阴转的疗效观察（摘要）张仙居１衣立渊１张敏２１９９３年２月～１９９４年６月，应用单磷酸阿糖腺苷（ＡＲＡ－ＡＭＰ）联合乙肝疫苗治疗慢性乙型肝炎，取得较好效果，现报告如下。临床资料按１９９０年上海全国肝炎会议诊断标...     

四甲基吡啶卟啉－光动力疗法对人宫颈永生化上皮H8细胞的作用

目的：探讨四甲基吡啶卟啉－光动力疗法（TMPyP4-PDT）对人宫颈永生化上皮H8细胞增殖和凋亡的影响。方法显微镜下观察TMPyP4-PDT后H8细胞形态学变化;采用细胞活力试剂盒（CCK-8）检测细胞的增殖活力;Annexin V-FITC／PI 双染试剂盒检测细胞凋亡率;免疫细胞化学 SABC 法检测 TMPyP4-PDT 对 H8细胞p16INK4a蛋白的表达变化;蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测人端粒酶逆转录酶（hTERT）、p21蛋白的表达。结果 TMPyP4-PDT可抑制H8细胞的增殖,诱导细胞凋亡,且在一定范围呈TMPyP4剂量依赖性;免疫细胞化学SABC法结果显示,TMPyP4-PDT可降低细胞p16INK4a蛋白的阳性率;Western blotting结果表明,TMPyP4-PDT下调hTERT的表达,上调p21的表达。结论 TMPyP4-PDT可抑制H8细胞的增殖,诱导H8细胞的凋亡,其作用机制可能与下调p16INK4a、hTERT及上调p21的表达有关。     

宫颈微环境改变与HPV感染对宫颈癌的影响

宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤。人乳头瘤病毒（Humanpapillomavirus,HPV）感染是宫颈上皮内瘤变（Cervicalintraepithelialneoplasia,CIN）及宫颈癌发生的必要因素。高危型HPV（尤其是16、18型）感染的宫颈病变进展的危险性大于低危型HPV感染。目前普遍认为高危型HPV持续感染,再加上宫颈微环境改变以及其它一些辅助致癌因素（如多产、性紊乱、吸烟等）的协同作用,抑制细胞凋亡,逃逸正常的免疫监视而最终导致细胞周期失控,使细胞永生化,促使宫颈癌发生。