川芎嗪对儿童哮喘中转录因子T-bet/GATA-3表达失衡干预作用的研究

目的通过检测30例哮喘儿童T-betmRNA和/GATA-3mRNA的表达强度及上清液中IFN-γ、IL-4水平,评价T-bet/GATA-3的比率与Th1/Th2失衡的关系及哮喘发病机制,研究川芎嗪对儿童哮喘中转录因子T-bet/GATA-3表达失衡的干预作用。方法抽取30例正常对照组、30例哮喘发作组儿童空腹外周静脉血4 ml,分离出单核细胞,用ELISA法测定上清液IL-4、IFN-γ含量,RT-PCR法检测转录因子T-bet mRNA和GATA-3mRNA表达强度。结果哮喘组儿童IFN-γ/IL-4比值明显低于正常对照组(P<0.001),川芎嗪干预组IFN-γ/IL-4比值明显高于哮喘(P<0.001),差异有显著性。哮喘组T-bet/GATG-3比值低于正常对照组(P<0.001),川芎嗪干预组T-bet/GATA-3比值高于哮喘组(P<0.001),差异有显著性。结论川芎嗪能通过上调儿童哮喘患者T-bet mRNA的表达强度,降低GA-TA-3mRNA表达水平,从而逆转Th1/Th2功能失衡,对儿童哮喘起到有效防治作用。     

细芥化痰平喘凝胶贴膏对哮喘小鼠气道炎症的影响

[目的]观察细芥化痰平喘凝胶贴膏对哮喘小鼠气道炎症的影响,探讨其治疗支气管哮喘的作用机制。[方法]选取60只健康雄性BALB/c小鼠,随机分为正常组、哮喘模型组、细芥化痰平喘凝胶贴膏低剂量组、中剂量组、高剂量组、细芥敷贴丸组,每组10只。除正常组外,其余各组采用卵清蛋白（OVA）致敏和激发建立小鼠哮喘模型,取小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）进行炎性细胞的总数及炎细胞分类计数检测,苏木素-伊红（HE）染色、丽春红酸性品红-苯胺蓝（Masson）染色观察肺组织病理学变化。采用酶联免疫吸附法（ELLSA）检测小鼠BALF中γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)的含量。[结果] 1)OVA成功致敏和激发,建立小鼠哮喘模型。2）与正常组相比,BALF中炎症细胞总数及以嗜酸性粒细胞（EOS）为主的各分类炎症细胞均显著增加（P<0.01）,细芥化痰平喘凝胶贴膏低中高3个剂量组、细芥敷贴丸组均能不同程度地抑制炎性细胞总数及炎症细胞的增加（P<0.01）,细芥敷贴丸组、细芥化痰平喘凝胶贴膏中剂量组两组对白细胞及EOS等炎...     

黄芪当归配伍对气道变应性炎症大鼠鼻黏膜及肺组织GATA-3、T-bet表达的影响

目的:通过研究黄芪当归配伍对气道变应性炎症模型大鼠鼻黏膜及肺组织GATA-3、T-bet表达的影响,探讨黄芪当归配伍治疗气道变应性炎症的作用机制。方法:采用卵清蛋白(OVA)喷雾的方法致敏造成大鼠气道变应性炎症模型,分别用黄芪、当归、黄芪当归配伍灌胃给药治疗。用免疫组化法测定鼻黏膜中及肺组织中GATA-3、T-bet的表达。结果:模型组鼻黏膜及肺组织GATA-3表达增加,而T-bet表达降低。当归组可降低肺组织GATA-3表达,增加鼻黏膜T-bet的表达;黄芪组可降低肺组织GATA-3表达,升高鼻黏膜及肺组织T-bet表达;芪归组可降低鼻黏膜及肺组织GATA-3表达,升高鼻黏膜和肺组织T-bet表达。各给药组均可降低鼻黏膜及肺组织中GATA-3/T-bet比值。结论:黄芪当归配伍可能通过对GATA-3/T-bet的影响,调节气道变应性炎症中Th1/Th2细胞因子平衡,从而对气道变应性炎症有抑制作用。     

平喘方及其拆方对支气管哮喘小鼠肺组织转录因子T-bet/GATA-3表达的影响

目的：观察平喘方及其拆方对支气管哮喘模型小鼠转录因子T—bet、GATA－3表达的影响,研究平喘方及其拆方防治支气管哮喘的作用机理。方法：通过对BALB／C小鼠用卵蛋白等腹腔注射致敏、雾化吸入激发,建立支气管哮喘动物模型。将120只清洁级雄性BALB／C小鼠,随机分为6组：对照组、模型组、平喘方组、拆方1组、拆方2组、拆方3组。各组分别于雾化激发哮喘后7d、21d分两批处死、取样、检测,动态观察。采用RT—PCR（Real Time PCR）法检测小鼠肺组织T—bet、GATA-3 mRNA的表达。结果：哮喘激发7d,拆方1、2、3组T—bet升高（P〈0．05）;平喘方组和拆方2、3组GATA-3降低（P〈0．05）;拆方3组T—bet／GATA-3比值升高（P〈0．05）。哮喘激发21d,平喘方及拆方1、2、3组T—bet升高（P〈0．01）,GATA-3降低（P〈0．01）,T—bet／GATA-3比值升高（P〈0．01）;其中平喘方组、拆方3组T—bet表达高于拆方1、2组（P〈0．05）,GATA-3低于拆方1、2组（P〈0．01）,T—bet／GATA-3的比值高于拆方1、2组（P〈0．05或P〈0．01）。结论：平喘方及拆方各组均能不同程度地调节支气管哮喘小鼠Th1／Th2上游因子T—bet／GATA-3 mRNA的表达,对Th1／Th2细胞的失衡有纠正作用,拆方3组疗效接近平喘方组。     

以转录因子T-bet/GATA-3为靶标的哮喘治疗手段探要

目的:探讨转录因子T-bet/GATA-3在哮喘发病中的作用机理,分析以T-bet/GATA-3为靶标的哮喘治疗手段。方法:总结近10年关于T-bet/GATA-3在哮喘发病中的机理研究及以此为靶标治疗哮喘的相关文章,进行分析、归纳。结果:T-bet/GATA-3作为哮喘发病中的转录因子,能够客观地反映Th1/Th2细胞分化和Th1型细胞因子、Th2型细胞因子的变化。以其为靶标治疗哮喘的方式近年取得的进展主要有生物制剂、免疫疗法、中医药、以及神经生长因子、寡核苷酸、转录因子圈套策略等分子和基因水平的治疗方法。结论:以转录因子T-bet/GATA-3为靶标的哮喘治疗手段近年取得较多进展,提示在转录水平将Th0细胞向Th1/Th2细胞分化这个环节作为治疗疾病的靶点,可能成为延长哮喘缓解期、减少复发的关键。     

穴位贴敷诱发接触性皮炎对支气管哮喘复发及血中转录因子T-bet/GATA-3的影响

目的:观察穴位贴敷诱发接触性皮炎对预防支气管哮喘复发及血中转录因子T-bet/GATA-3的影响。方法 :选取穴位贴敷治疗的哮喘患者37例,根据贴敷后是否出现接触性皮炎,分为治疗组(出现接触性皮炎)18例和对照组(未出现接触性皮炎)19例。比较2组患者治疗后3个月、6个月与治疗前1年同时期哮喘控制测试(ACT)评分变化情况,并检测2组患者治疗前后血中T-bet、GATA-3mRNA的表达及比值的变化情况。结果 :2组治疗后3个月ACT评分均较治疗前1年同期明显增高(P0.05);治疗组治疗后6个月ACT评分较治疗前1年同期明显增高(P0.05)。2组治疗后T-betmRNA表达均较治疗前明显升高(P0.01,P0.05),且治疗组治疗后T-bet/GATA-3比值较治疗前明显升高(P0.05),组间比较无统计学差异(P0.05)。结论 :采用穴位贴敷治疗支气管哮喘患者,无论是否出现接触性皮炎均能有效预防哮喘的复发,且出现接触性皮炎者临床疗效维持时间更长,其作用机制可能与增加了血中T-betmRNA的表达,调节了辅助性T淋巴细胞的免疫失衡有关。     

姜黄素对慢性哮喘大鼠气道炎症及p-ERK1/2表达的影响

目的:观察姜黄素对慢性哮喘大鼠肺泡灌洗液中炎症细胞变化及肺组织中细胞外信号调节激酶1/2磷酸化(p-ERK1/2)表达水平表达的影响,探讨姜黄素抑制哮喘大鼠气道炎症和改善气道重塑的作用机理。方法:30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(N组)、哮喘模型组(A组)、姜黄素组(C组)各10只,采用卵蛋白(OVA)等致敏大鼠哮喘模型,观察3组动物哮喘发作症状、气道炎症情况及免疫组化染色后p-ERK1/2表达情况。结果:哮喘模型组大鼠哮喘发作症状最明显,姜黄素组大鼠症状轻,正常对照组无症状。肺泡灌洗液总细胞数及中性粒细胞哮喘模型组明显高于正常对照组和姜黄素组。肺组织石蜡切片免疫组化发现哮喘模型组肺组织中p-ERK1/2吸光度显著高于同时期正常对照组、姜黄素组(均P<0.01)。结论:姜黄素可抑制哮喘的慢性气道炎症,改善气道重塑,其机制可能与抑制哮喘大鼠ERK1/2的磷酸化有关。     

甘草酸对哮喘小鼠气道炎症及磷脂酶A2活性的影响

目的观察甘草酸对哮喘小鼠气道炎症及磷脂酶A2活性的影响。方法建立小鼠卵蛋白哮喘模型,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸粒细胞(EOS)计数及用盐酸滴定法测定肺组织和血清中磷脂酶A2活性。结果甘草酸能显著降低小鼠BALF中炎性细胞总数、EOS数量及磷脂酶A2活性。结论甘草酸具有抗气道炎症及降低磷脂酶A2活性的作用。     

祛风宣痹方对实验性哮喘豚鼠气道炎症和Th1/Th2细胞因子的影响

目的:观察祛风宣痹方对哮喘豚鼠气道炎症和Th1/Th2细胞因子的影响,探讨其作用机制。方法:用卵蛋白和雾化吸入致敏法,复制豚鼠哮喘模型;取肺泡灌洗液进行嗜酸性粒细胞(Eos)计数;肺组织切片HE染色形态学观察;ELASA方法检测BALF中IFN-γ和IL-4的含量。结果:模型组较正常组肺泡灌洗液(BALF)中气道Eos炎症细胞表达异常,组织形态学病变明显,IFN-γ含量显著下降,IL-4的含量明显升高;地米组、中药高剂量组、中药低剂量组较模型组均有显著性差异,BALF中Eos的数量明显降低,组织形态学改善明显,IFN-γ含量显著升高,IL-4的含量明显下降,中药高剂量组效果强于低剂量组。结论:祛风宣痹方能减少EOS浸润,抑制气道炎症,调节Th1/Th2失衡,这可能是其阻断哮喘发生发展的机制之一。     

三拗芎葶合剂对哮喘大鼠肺组织转录因子T-bet、GATA-3及血浆中IFN-γ、IL-4的影响

目的探讨三拗芎葶合剂对哮喘大鼠肺组织转录因子T-bet,GATA-3及血浆中IFN-γ、IL-4的影响。方法取健康雄性SD大鼠60只,随机分为空白对照组、哮喘模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、地塞米松组6组。空白对照组用生理盐水造模,其余5组大鼠用OVA加氢氧化铝腹腔注射,从第3周起各组分别用等量生理盐水、1%OVA溶液雾化激发,同时用等量生理盐水、不同浓度三拗芎葶合剂灌胃、地塞米松腹腔注射2周。4周后处死大鼠取右肺采用RT-PCR法测量肺组织转录因子T-betmRNA、GATA-3mRNA,取血浆用ELISA法测量IFN-γ、IL-4浓度。结果实验显示模型组GATA-3 mRNA、IL-4浓度明显升高。T-betmRNA、IFN-r浓度降低;空白对照组、地塞米松组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组GATA-3 mRNA、IL-4浓度明显下降,T-betmRNA、IFN-γ浓度升高,以中药高剂量组、地塞米松组效果明显。结论三拗芎葶合剂能够通过升高大鼠血浆IFN-r水平、肺组织中T-bet mRNA抑制哮喘大鼠气道炎症,并改善大鼠生存质量。本结论为宣肺逐瘀化痰法治疗哮喘提供了实验依据。     

银屑灵熏剂蒸汽治疗对寻常型银屑病外周血单个核细胞表达T-bet、GATA-3蛋白水平的影响

目的 探讨银屑灵熏剂蒸汽治疗寻常型银屑病的临床疗效及对外周血单个核细胞（PBMC）表达T-bet及GATA-3蛋白水平的影响。方法 对30例寻常型银屑病患者行银屑灵熏剂蒸汽治疗,观察PASI评分下降率并使用Western blot法检测患者及25名健康对照者PBMC中T bet和GATA 3蛋白水平的变化,观察PASI评分与T-bet和GATA-3蛋白水平相关性。结果30例患者治愈12例,显效9例,有效8例,无效1例。治愈率为40.0%,有效率为96.7%。寻常型银屑病患者PBMC表达T-bet蛋白水平（1.7917±0.3840）较对照组（0.8860±0.1486）升高（P＜0.01）。GATA 3蛋白水平（0.8777±0.3114）较对照组（1.2384±0.1783）降低（P＜0.01）。经银屑灵熏剂治疗后,T-bet蛋白表达降为1.3410±0.3642,而GATA-3蛋白升高为1.0883±0.2435,治疗前后改变均有统计学意义（P＜0.01）。其中PASI评分与T-bet蛋白表达水平呈正相关（r=0.7448,P＜0.01）,与GATA-3蛋白表达水平呈负相关（r=－0.8291,P＜0.01）。结论 银屑灵熏剂蒸汽治疗银屑病有效,其可能机制是通过调节寻常型银屑病患者PBMC中转录因子T-bet/GATA-3蛋白的平衡表达,纠正寻常型银屑病患者Th1/Th2细胞亚群失衡的免疫异常,有效治疗银屑病。     

固本化痰法对支气管哮喘缓解期患者临床疗效及免疫功能的影响

目的:探讨固本化痰法对支气管哮喘缓解期患者临床疗效及免疫功能的影响。方法:将支气管哮喘缓解期患者241例随机分为治疗组122例和对照组119例,对照组不予干预,治疗组口服金龙固本合剂,疗程120天,观察哮喘的复发率及患者血清免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG、IgE)水平。结果:总有效率治疗组为96.46%,对照组为62.73%,2组比较差异有统计学意义(P0.01);IgA:2组患者在治疗120天及随访360天时血清IgA比较差异均无统计学意义(P0.05);治疗组在治疗120天及随访360天时血清IgA高于治疗前(P0.01)。IgM:2组患者在随访360天时血清IgM比较差异均无统计学意义(P0.05);治疗组在治疗120天时血清IgM高于对照组(P0.05),对照组在120天时血清IgM与治疗前比较差异无统计学意义(P0.05),而随访360天时高于治疗前(P0.01)。IgG:2组患者在治疗120天时血清IgG比较无差异(P0.05),随访360天时对照组血清IgG高于治疗组,其差异有统计学意义(P0.01),2组治疗120天时血清IgG与治疗前比较均无差异(P0.05)。IgE:2组患者在治疗120天时血清IgE比较无差异(P0.05),随访360天时血清IgE治疗组低于对照组,其差异有统计学意义(P0.01),治疗组在治疗120天及随访360天时血IgE与治疗前比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:固本化痰法能明显减少支气管哮喘发作次数,具有调节免疫功能作用。     

转录因子GATA-3/T-bet与哮喘关系及中医药治疗的研究进展

哮喘是一种临床常见的慢性呼吸系统疾病,近年来其发病率呈不断上升趋势。随着对哮喘不断地深入研究,大量实验表明转录因子GATA-3/T-bet表达的失衡可影响Th0的分化和Th1、Th2相关细胞因子表达,因此GATA-3/T-bet与哮喘的慢性气道炎症、气道高反应性以及气道重塑有着紧密的联系。文章通过整理、归纳GATA-3/Tbet的生物学特征、GATA-3/T-bet与哮喘的关系,以及中医药在治疗哮喘时对GATA-3/T-bet的调控作用,探讨中医药治疗哮喘可能是通过调节转录因子GATA-3/T-bet平衡来实现的,从而为中医药治疗哮喘提供了新的思路。     

自体血穴位注射对哮喘大鼠肺组织GATA 3和T-bet蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察自体血穴位注射对哮喘大鼠免疫学机制的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组(8只)、模型组(10只)、生理盐水穴位注射组(10只)、自体血穴位注射组(10只)和地塞米松腹腔注射组(10只)。后4组通过腹腔注射鸡卵蛋白(OVA)加氢氧化铝混合溶液每周1次致敏,2周后每天OVA超声雾化激发哮喘。自体血组穴位注射自体血(0.4mL/穴),"肺俞"穴和"肾俞"穴轮流取穴,隔天1次,共6次。免疫组化半定量法测肺中GATA 3和T-bet蛋白,RT-PCR法测其mRNA的表达。结果:模型组GATA 3、GATA 3mRNA表达和GATA 3mRNA/T-bet mRNA的比值(G/T比)均明显高于正常组(P<0.01),T-bet mRNA表达明显低于正常组(P<0.01)。自体血组GATA 3、GATA 3mRNA的表达及G/T比均明显低于模型组(P<0.01),T-bet及其mRNA的表达均明显高于模型组(P<0.01)。盐水穴位注射对哮喘模型无明显调节效果。地塞米松对GATA 3的作用与自体血相当,但对T-bet的调节不明显。结论:自体血穴位注射可以良性调节辅助性T细胞所分泌细胞因子的失衡,其作用与地塞米松腹腔注射相当。     

阿胶对哮喘大鼠气道炎症及外周血Ⅰ型/Ⅱ型T辅助细胞因子的影响

目的 探讨阿胶对哮喘大鼠Th1／Th2细胞因子的影响及其防治哮喘的作用机制。方法60只Wistar大鼠随机分为生理盐水（NS）对照组（A），低剂量阿胶组（B），中剂量阿胶组（C），高剂量阿胶组（D），斯奇康组（E），哮喘对照组（F）。用酶联免疫吸附试验（EIASA）检测血液中自介素-4（IL-4）、γ干扰素（IFN-γ）水平的变化。HE染色观察肺组织病理学变化。结果与NS对照组比较，哮喘模型组血液中IFN-γ水平显著降低（P＜0．01）。与哮喘模型组比较，阿胶低、中剂量组和斯奇康组IL-4水平显著降低（P＜0．01），NS对照组、阿胶低、中剂量组和斯奇康组人鼠肺组织嗜酸性细胞浸润程度也明显减轻。结论哮喘大鼠存在Th2型细胞优势反应，而阿胶可能具有抑制哮喘Th2细胞优势反应的作用，从而调节Th1／Th2型细胞因子平衡，同时，可减轻哮喘大鼠肺组织嗜酸性细胞炎症反应。     

化痰通络中药对痰瘀互结型高血压病患者血压及血管内皮生长因子的影响

目的观察化痰通络中药治疗痰瘀互结型高血压病的临床疗效及其对血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法将68例痰瘀互结型高血压患者随机分为2组,对照组(34例)给予硝苯地平控释片,治疗组(34例)在对照组治疗基础上加用化痰通络中药,疗程均为12周。观察2组的降压疗效,并比较2组治疗前后血压、中医证候积分、血清VEGF水平。结果对照组、治疗组降压总有效率分别为79.4%(27/34)、91.2%(31/34),2组比较差异有统计学意义(P0.05)。2组治疗后收缩压、舒张压、中医证候积分、血清VEGF水平均较治疗前明显下降(P0.01),治疗组各项指标均优于对照组(P0.05),且不良反应发生例数少。结论化痰通络中药配合降压药治疗痰瘀互结型高血压病的降压疗效显著,可改善患者临床症状,降低血清VEGF水平,在一定程度上改善血管内皮功能。     

化痰祛瘀、降气平喘法治疗支气管哮喘临床研究

目的 化痰祛瘀、了气平喘中药寒喘平口服液和热喘平口服液对支气管哮喘的临床儿。方法 治疗组分别应用寒喘平、热喘平口服液支气管哮喘共１０５例，并与用桂龙咳喘宁胶囊治疗者５２例作对照观察。结果 临床总有效率方面，寒喘平治疗组分别为８８．００ ％、、９０．９１％，桂龙咳喘宁对照组为７３．０８％，两组相比有显著差别（Ｐ〈０．０５）；临床主要症状、体征及实验室指标的改善情况方面，治疗组均优于对照组（Ｐ〈０．０