荷叶黄酮治疗大鼠肠缺血-再灌注损伤的研究

目的:研究荷叶黄酮对大鼠肠缺血-再灌注损伤(I/R)的影响,并探讨其保护作用机制。方法:60只健康雄性Wistar大鼠随机分为5组:假手术组、模型组及荷叶低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组。以无创动脉夹夹闭肠系膜上动脉45 min,再灌注2 h建立小肠I/R模型,试剂盒测定血清和肠组织中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的活性。结果:与模型组比较,荷叶黄酮预处理组MDA和NO含量显著降低(P0.05);荷叶黄酮剂量依赖性地抑制肠缺血-再灌注所致的血清和肠SOD活性下降(P0.05),并降低肠缺血-再灌注所致的NOS活性(P0.05)。结论:荷叶黄酮具有潜在治疗大鼠肠缺血-再灌注损伤的应用价值,其作用机制可能与抗氧化作用有关。     

桃核承气汤对大鼠肠缺血再灌注损伤血清IL-4、IL-6,IL-10及TNF-α的影响

目的:观察桃核承气汤对大鼠肠缺血再灌注损伤血清IL-4、IL-6、IL-10及TNF-α水平的影响.方法:采用肠系膜上动脉夹闭方法制作肠缺血再灌注损伤模型.成年Wistar大鼠56只(雌雄各半)随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注组、桃核承气汤(大、中、小)剂量组、乳果糖对照组.肠缺血1h再灌注3h后光镜行小肠黏膜损伤评分及电镜下观察小肠黏膜上皮细胞超微结构变化,并用ELISA法测定血清IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α水平.结果:缺血再灌注组肠黏膜上皮细胞损伤严重,肠黏膜损伤评分及血清IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α水平均升高(P＜0.01);与缺血再灌注组比较,桃核承气汤各剂量组、乳果糖组肠黏膜上皮细胞及肠黏膜损伤程度轻、IL-6、TNF-α水平均降低,但仅桃核承气汤大剂量组IL-4、IL-10水平有显著升高.经两两比较后,桃核承气汤大剂量作用最好.结论:桃核承气汤能抑制促炎细胞因子IL-6、TNF-α的释放,促进抗炎因子IL-4、IL-10的释放,从而通过减轻炎症反应对大鼠肠缺血再灌注损伤有保护作用,并呈剂量依赖效应.     

IL-13对急性肾缺血再灌注损伤大鼠IL-6表达的影响

目的观察IL-13对急性肾缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠IL-6表达的影响。方法 Wistar雄性大鼠57只,随机分为5组:假手术组、缺血再灌注组、治疗对照组、治疗1组和治疗2组。阻断大鼠双侧肾脏血流45 min再灌注24 h建立急性RIRI模型;于阻断血流后分别从双侧肾动脉开口注射入鼠重组IL-13(rmIL-13)治疗1组0.5 g/50 g,治疗2组1.5g/50 g;治疗对照组以生理盐水代替。检测各组大鼠血清IL-6水平和肾脏表达,以及肾功能和肾脏病理。结果与治疗对照组比较,治疗2组肾脏IL-6基因和蛋白表达明显减少(P<0.01),IL-6血清水平也明显下降(P<0.01);治疗2组肾功能障碍及BUN、Cr水平显著改善(P均<0.01),肾组织病理变化明显减轻,肾小管损害评分明显减少(P<0.01)。血清IL-6蛋白水平与BUN、Cr呈正相关(r=0.628,0.745,P<0.01),肾组织IL-6 mRNA与BUN、Cr呈正相关(r=0.745,0.792,P<0.01)。结论 IL-13能有效地抑制急性RIRI大鼠IL-6的表达,并保护肾功能。     

茶多酚对大鼠肠缺血再灌注肝损伤的保护作用

目的研究茶多酚(TP)对大鼠肠缺血再灌注(I/R)肝损伤的保护作用及其可能的作用机制,为其临床新用途提供实验依据。方法大鼠随机分为模型组、假手术组及TP(100.0、50.0、25.0、12.5mg/kg)组,通过夹闭肠系膜上动脉60min、再灌注120min,建立肠I/R损伤模型。于缺血前20min舌下iv药物,假手术组仅分离不夹闭肠系膜上动脉。再灌120min后,各组取血及肝组织,测定血清及肝组织中SOD活力、MDA和NO水平,光镜下观察肝组织形态学改变。结果与假手术组相比,肠I/R损伤后,血清及肝组织中的SOD活力降低,MDA、NO水平升高,镜检发现肝有明显组织形态学损伤。与模型组相比,TP呈剂量依赖性增强SOD活力,降低MDA及NO水平,减轻肝组织形态学损伤。结论TP对肠I/R所致肝损伤有显著的剂量依赖性的保护作用,可能与其自由基清除作用、减轻中性粒细胞聚集及活化、抑制大量NO释放有关。     

川芎嗪对大鼠肠缺血再灌注肝损伤保护作用的实验研究

目的探讨川芎嗪对大鼠肠缺血再灌注肝损伤的保护作用。方法选用健康W istar大鼠24只,随机分成3组(每组8只):假手术对照组、缺血再灌注组、川芎嗪治疗组。夹闭大鼠肠系膜上动脉(SMA)60 m in造成缺血,再灌注2 h后取出肝组织制成匀浆,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、Ca2 -Mg2 -ATP酶的含量及肝形态细胞学变化。结果川芎嗪治疗组肝组织MDA含量明显低于缺血再灌注组(P<0.01),SOD,GSH-PX,Ca2 -Mg2 -ATP酶的含量均明显高于缺血再灌注组(P<0.01),肝细胞形态学异常变化明显减轻。结论川芎嗪能减少大鼠脂质过氧化,改善ATPase功能,减轻大鼠肠缺血再灌注所致肝脏损伤。     

银杏叶提取物对大鼠急性肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:研究银杏叶提取物对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法:肾缺血45 min再灌注4 h建立大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型,用银杏叶提取物预处理,测定肾皮质丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性,血浆肌酐和尿素氮的水平,并观察肾脏病理学改变。结果:缺血再灌注损伤后,肾皮质MDA含量升高,SOD,Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性下降;血浆BUN和Cr水平升高;肾组织出现明显的病理改变。银杏叶提取物预处理能降低肾皮质丙二醛含量;提高超氧化物歧化酶、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性;降低血浆肌酐和尿素氮水平;肾组织病理改变明显减轻。结论:银杏叶提取物对大鼠急性肾缺血再灌注损伤具有保护作用。     

银杏叶提取物对缺血再灌注大鼠脑线粒体的保护作用

线粒体是一种结构和功能复杂而敏感的重要细胞器,是细胞能量产生的主要部位,是细胞的活力及生存和死亡的调节中心。缺血再灌注细胞凋亡过程中许多重要事件的发生都与线粒体密切相关,包括caspases激活因子的释放、细胞内氧化还原状态的改变、线粒体膜电位的丧失、Bcl-2家族促进和抑制凋亡蛋白的参与等。其作为凋亡的中心环节已在许多凋亡系统被证实[1,2]。银杏Ginkgo biloba L.为中国特有的古老植物,用作药物在我国已有5000年的历史。现代药理学研究证实,其提取物(extract of Ginkgo biloba,EGB)具有清除自由基、降低血液黏度、延长血液凝…     

桃核承气汤对大鼠肠缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:探讨桃核承气汤对大鼠肠缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用及其机制。方法:采用肠系膜上动脉夹闭方法制作肠缺血再灌注损伤模型。实验大鼠随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注组、桃核承气汤大剂量组、桃核承气汤中剂量组、桃核承气汤小剂量组、乳果糖组。观察肠缺血1 h再灌注3 h后肠黏膜损伤程度,肠组织含水量,测定血浆D-乳酸和内毒素水平,并测定血清IL-6、TNFα-含量。结果:桃核承气汤大、中、小剂量组及乳果糖组肠黏膜损伤程度轻,肠组织含水量低,D-乳酸、内毒素、IL-6、TNF-α均低于缺血再灌注组。结论:桃核承气汤通过减轻炎症反应对大鼠肠缺血再灌注损伤有保护作用,并呈剂量依赖效应。     

薄层扫描法测定洋金花及康灵片中东莨菪碱含量

在硅胶Ｇ薄层板上，以甲苯－丙酮－无水乙醇－氨水（２０：２０：５：２）为展开剂，采用双波长（λｓ＝５００ｎｍλＲ＝６００ｎｍ）薄层扫描法测定了洋金花及其制剂康灵片中东莨菪碱的含量，结果准确、可靠，方法快速、简便。     

HPLC测定洋金花中东莨菪碱和阿托品的含量

目的：建立测定洋金花中东莨菪碱和阿托品含量的反相高效液相色谱方法。方法：采用Hypersil BDS C₁₈柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm),流动相甲醇-水（40∶60,水中含0.02 mol·L^-1醋酸钠、0.02％三乙胺、用冰醋酸调pH至6.0）,流速1.0 mL·min^-1,检测波长215 nm,柱温室温。结果：东莨菪碱和阿托品的平均回收率分别为99.6%和100.4%；RSD为1.8%和1.5%。结论：该方法简便、准确,灵敏度高,重复性好。     

三种提取方法提取洋金花生物碱的比较研究

目的 对洋金花三种提取方法提取物中有效部位和有效成分的提取率及其化学成分进行比较,以进一步评价各提取方法.方法 以洋金花总生物碱、阿托品和东莨菪碱为指标,采用UV法、TLC法及HPLC法,分别对浸渍法、回流法和微波法的提取物中的洋金花生物碱进行鉴别及定量测定.结果 总生物碱的提取率微波法为0.42％,回流法为0.38％,浸渍法为0.32％;东莨菪碱的提取率微波法和回流法相同为0.24％,浸渍法为0.13％;阿托品的提取率微波法为0.15％,回流法为0.10％,浸渍法为0.08％;TLC图谱比较发现,三种方法提取的生物碱成分的斑点无明显差异,都显示4个相似的生物碱斑点.结论 微波法提取洋金花生物碱耗时短,溶剂用量少,操作简便,效率高,综合各方面考察,微波辅助提取洋金花生物碱是值得在大生产中推广应用的环保、节能、减耗的新技术.     

洋金花最佳采收期评价

目的:探索中药材洋金花最佳采收期评价新方法的可行性。方法:将洋金花的生长过程进行Logistic生长曲线方程拟合,建立数学模型,运用有序聚类分析的方法将其生长过程划分并将各划分期拟定为采收期,以生物活性成分为指标,结合产量对洋金花最佳采收期进行评价。结果:洋金花的生长过程与Logistic生长曲线方程拟合度良好,有序聚类分析后将洋金花采收期拟定为五个时期,评价后发现与以往采收期试验研究结果有差别。结论:洋金花药材最佳采收期评价新方法可行。     

基于对植物神经系统相关指标影响的洋金花各化学拆分组分的药性研究

目的:进一步阐明洋金花化学拆分组分的药性归属,为"中药一味一性,一药X味Y性(Y≤X)"的中药性味理论新假说的客观性提供科学依据。方法:取雄性昆明种小鼠和Wistar大鼠,分别随机分为正常组,洋金花水煎液组,生物碱组分高、低剂量组,大孔树脂50%乙醇洗脱组分高、低剂量组。各组分别ig给药,正常组给同体积生理盐水,每天给药1次,连续10 d。观察洋金花及其化学拆分组分对植物神经系统相关的心率、呼吸频率、血压、唾液分泌量、体温指标的影响,作为洋金花药性评价系统的一部分,对洋金花及其化学拆分组分的药性做进一步评价。结果:与正常组比较,洋金花及生物碱组分明显使小鼠心率增加、大鼠呼吸频率加快、大鼠动脉平均血压升高、小鼠唾液分泌抑制、大鼠体温升高(P0.05,P0.01)。大孔树脂50%乙醇洗脱组分可促进小鼠唾液分泌,对小鼠心率减少、大鼠呼吸频率减缓有一定作用趋势(P0.05,P0.01),对大鼠动脉平均血压和体温无明显作用。大孔树脂50%乙醇洗脱组分与生物碱组分比较,对小鼠心率,大鼠呼吸频率、大鼠动脉平均血压、小鼠唾液分泌量、大鼠体温影响有一定差异或差异具统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:洋金花及生物碱组分药性为温,大孔树脂50%乙醇洗脱组分与生物碱组分药性不同,结合前期研究结果,可判定其药性为凉。     

四种洋金花的显微鉴定

本文报道了白花曼陀罗花、毛曼陀罗花、曼陀罗花及紫花曼陀罗花的显微鉴定研究结果,为洋金花的品种鉴定提供了依据。     

丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤后TLR4及神经细胞凋亡的影响

 目的 观察丹皮酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后 Toll样受体4（TLR4）和神经细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、尼莫地平组（0.4 mg·kg^-1）、丹皮酚组（15、30 mg·kg^-1）。采用线栓法阻塞大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。通过 HE染色观察大鼠大脑皮层区细胞损伤程度,免疫组化法检测缺血侧脑组织 TLR4表达的变化,酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素6（IL-6）含量,流式细胞仪检测神经细胞凋亡。结果 丹皮酚可明显改善大鼠皮层区细胞损伤,减少 TLR4的表达、降低血清中 IL-6含量,减轻神经细胞凋亡率。结论 丹皮酚能减轻缺血再灌注脑组织损伤程度、降低神经细胞凋亡率,机制可能与抑制脑组织内 TLR4表达有关。     

洋金花治疗银屑病有效部位的药理作用研究(Ⅰ)——抗炎、抗瘙痒及抗过敏作用

目的:阐明洋金花治疗银屑病有效部位的抗炎、抗瘙痒及抗过敏作用。方法:以二甲苯致小鼠耳肿胀法和10%蛋清致大鼠足肿胀法进行抗炎作用研究;用0.35%磷酸组织胺刺激豚鼠皮肤考察抗搔痒作用;以氯化乙酰胆碱和组织胺混合液引起的豚鼠喘息性抽搐为指标考察抗过敏作用。结果:洋金花治疗银屑病有效部位可明显抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀和蛋清引起的大鼠足肿胀;可使组织胺所致豚鼠皮肤搔痒的组织胺用量明显增加;对乙酰胆碱和组织胺混合液所引起的豚鼠变态反应性哮喘的发作潜伏期明显延长。结论:洋金花治疗银屑病有效部位具有较强的抗炎、抗皮肤瘙痒及抗过敏等药理作用。     

异氟醚预处理对大鼠肠缺血再灌注后肠损伤的影响

目的研究不同浓度的异氟醚预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响,并初步探讨其作用机制。方法成年雄性SD大鼠60只,按照随机分层区组设计分为5组(n=12):肠缺血再灌注组(缺血再灌注损伤组):暴露腹腔后夹闭肠系膜上动脉1h后开放再灌注2 h;0.25肺泡最低有效浓度、0.5肺泡最低有效浓度、1.0肺泡最低有效浓度异氟醚预处理30 min组(即0.25M组、0.5M组和1.0M组):在暴露腹腔前预吸入相应浓度的异氟醚30 min,再行肠缺血再灌注;假手术组:仅暴露腹腔,不行异氟醚预处理及肠系膜上动脉夹闭。颈动脉插管监测平均动脉压。在再灌注2 h时采血检测血浆超氧化物歧化酶活力、丙二醛和肿瘤坏死因子α含量;取小肠组织行组织切片HE染色,在光镜下观察其结构病理变化程度及改良Chiu’s评分,并用免疫组化染色法和Western blot方法检测肠组织Caspase-3活化表达情况。结果与缺血再灌注损伤组比,0.5M组、1.0M组的病理评分值显著性减低(P<0.01),而0.25M组无显著差异(P>0.05)。在再灌注期,缺血再灌注损伤组的平均动脉压随时间延长呈明显下降趋势,显著低于假手术组(P<0.05),而异氟醚预处理能明显减缓平均动脉压下降(P<0.01)。0.5M组、1.0M组较缺血再灌注损伤组的超氧化物歧化酶活力显著性增高,而丙二醛水平减低(P<0.01)。与缺血再灌注损伤组相比,1.0M组、0.25M组的肿瘤坏死因子α含量无显著性差异(P>0.05),而0.5M组较缺血再灌注损伤组显著性降低(P<0.01)。0.5M组、1.0M组的caspase-3蛋白表达量较0.25M组和缺血再灌注损伤组明显减少(P<0.05)。结论 0.5M与1.0M异氟醚预处理均能相似地减轻缺血再灌注后的肠黏膜结构的病理改变,并可减缓再灌注期的低血压,其保护效应可能与提高超氧化物歧化酶活性、减少丙二醛生成、下调肿瘤坏死因子α生成的炎症反应级联效应以及抑制细胞凋亡有关。     

二仙除痹汤对大鼠胶原诱导型关节炎的影响

目的探讨二仙除痹汤对大鼠胶原诱导型关节炎（CIA）的作用及机制。方法取健康Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组及二仙除痹汤低、高剂量组,除正常组外其余各组建立大鼠CIA模型。二仙除痹汤低、高剂量组于造模后第7日起分别给予二仙除痹汤8、16 g/kg灌胃,每日1次,连续4周。评估发病率及临床积分,观察关节组织病理形态和放射学改变,检测关节组织匀浆上清和血清中促炎细胞因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α以及血清炎症介质前列腺素（PG）E2的含量变化。结果模型组大鼠CIA发病率100%,关节炎最高临床积分8.2,踝关节出现明显的炎症细胞浸润、血管翳形成、软骨和骨破坏等组织病理学变化以及关节间隙狭窄或增宽、关节面虫蚀样破坏等影像学改变,关节和血清中IL-1β、TNF-α、IL-6以及血清PGE2含量明显升高。与模型组相比,二仙除痹汤低、高剂量组可显著降低关节炎的发病率（分别为60%、40%）、临床积分（分别为5.7、3.8）和改善关节组织病理学改变,二仙除痹汤高剂量组还能明显抑制骨破坏程度,降低关节和血清中IL-1β、TNF-α、IL-6及PGE2的含量,二仙除痹汤低剂量组的亦显著抑制血清中IL-1β、IL-6以及关节中IL-6的含量。结论二仙除痹汤能控制大鼠CIA病情的发生发展,其机制可能与对系统和关节局部促炎细胞因子和炎症介质的有效抑制有关。