大黄抑菌作用的体外研究

目的研究大黄中5种羟基蒽醌对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。方法采用pH梯度萃取法从大黄中提取出蒽醌成分,采用体外实验及二分法测定各成分的抑菌效果。结果大黄中大黄素、芦荟大黄素、大黄酸有抑菌作用,大黄酚与大黄素甲醚无抑菌作用。抑菌效果大黄素最好,芦荟大黄素次之,大黄酸最差。结论大黄具有抑菌作用。     

10种中草药提取物对痤疮致病菌的体外抑菌活性研究

目的：研究10种中草药对痤疮致病菌的体外抑菌活性。方法：制备10种中草药提取物,采用牛津杯抑菌圈法定性检测中草药对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的抑菌活性,然后通过2倍稀释法定量检测其最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果：10种中草药提取物中大黄、黄柏、丁香、姜黄4种中草药对两种致病菌均有抑菌作用;其中大黄的抑菌效果最好,对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的最小抑菌浓度分别为3.125、6.25mg/mL,最小杀菌浓度分别为6.25、12.50mg/mL。     

复方金银花外洗液及其单味药的体外透皮实验与抑菌活性研究

目的:观察复方金银花外洗液(外洗液)及金银花水提液(金银花液)体外透皮吸收的效果;并探讨两者对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌的体外抑菌活性。方法:采用改良的Franz扩散池装置,以昆明小鼠腹部皮肤为屏障,利用高效液相色谱法研究外洗液及金银花液中绿原酸的透皮吸收性能;采用管碟法测定外洗液及金银花液对4种菌的抑菌能力;用试管二倍稀释法与平板涂布法结合确定药液对4种菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果:绿原酸在体外可以通过透皮吸收,外洗液和金银花液在8 h内绿原酸的累积透皮释药量分别为1.68、0.98μg·cm~(-2);金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌对外洗液及金银花液均敏感;含相同绿原酸量的外洗液的抑菌圈直径都大于金银花液;含相同质量浓度的绿原酸和生药的外洗液对4种菌的MIC值均比金银花液对4种菌的MIC值小。结论:外洗液及金银花液均有体外透皮吸收作用和抑菌活性,且复方的最高安全剂量和功效要强于单味药。     

杏香兔耳风总酚酸耐药突变选择窗的体外研究

目的 测定杏香兔耳风总酚酸和对照药绿原酸对金黄色葡萄球菌ATCC26003和大肠埃希菌ATCC44102的防耐药变异浓度(MPC)。方法 采用琼脂平板二倍稀释法,测定杏香兔耳风总酚酸和绿原酸对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小抑菌浓度(MIC)、99 %抑菌浓度(MIC99)、初测MPC(MPCpr)和MPC。结果 杏香兔耳风总酚酸、绿原酸对金黄色葡萄球菌的MIC、MPC和细菌耐药选择指数(MPC/MIC99)分别为0.4,6.0 mg·mL-1;10.8,8.4 mg·mL-1;34.0,1.6。对大肠埃希菌的MIC、MPC和MPC/MIC99分别为12.0,6.0 mg·mL-1;16.8,9.6 mg·mL-1;1.4, 1.7。结论 杏香兔耳风总酚酸限制金黄色葡萄球菌耐药突变菌株作用强于绿原酸,限制大肠埃希菌耐药突变菌株作用弱于绿原酸。     

金银花提取液抑菌活性的研究

目的观察金银花的体外抑菌作用。方法应用牛津杯法和试管2倍稀释法对不同菌株的敏感性及最小抑菌浓度测定法进行体外抑菌试验。结果金银花对上述细菌均有抑菌作用。金黄色葡萄球菌对金银花提取液有较强的敏感性,抑菌圈大于20 mm,大肠杆菌对金银花提取液中度敏感,铜绿假单胞菌对金银花提取液低度敏感。对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌,金银花提取物的MIC值为0.031 2 g/ml,而对绿脓杆菌其MIC值为0.125 g/ml。结论金银花提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌均有抑菌作用。     

泻心汤体外抗菌作用拆方研究

目的通过拆方研究泻心汤体外抗菌作用。方法采用拆方方法,以金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、致病性大肠杆菌、变形杆菌、黑曲霉菌、白色念珠菌、绿脓杆菌为受试菌,考察各拆方组的抗菌强度及最小抑菌浓度(MIC)。结果大黄-黄连配伍组可增加对乙型溶血性链球菌的抑均半径、降低最小抑菌浓度(MIC),黄芩-黄连配伍组可增加对白色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌的抑菌半径及降低最小抑菌浓度(MIC),黄芩-黄连配伍组对金黄色葡萄球菌的抑菌作用明显减弱。结论大黄对全方的体外抑菌活性起到相加作用,黄芩对全方的体外抑菌活性变化较为复杂。     

五倍子有效部位抗病原微生物活性

目的:探讨五倍子抗细菌和抗白假丝酵母真菌的有效活性部位。方法:采用琼脂平板二倍稀释法测定了五倍子醇提物的石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水6个有效部位对金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌等5个种属细菌和白假丝酵母真菌的最低抑菌浓度(MIC)。用单因素方差分析法、独立样本t检验比较分析不同活性部位对受试菌株抑菌活性的强弱。结果:五倍子石油醚、三氯甲烷和乙醇有效部位均无抗细菌和真菌活性,水部位仅对金黄色葡萄球菌有一定抗菌活性,MIC为733.69 g·L-1,正丁醇部位仅对5种细菌有较强的抗菌活性,MIC为2.06~32.96 g·L-1,而乙酸乙酯部位对受试细菌和白假丝酵母真菌均有强的抗菌活性,MIC分别为2.88~23.07 g·L-1和0.36~27.28 g·L-1。统计分析表明,乙酸乙酯和正丁醇部位对革兰阳性菌的抑菌活性强于对革兰阴性菌的抑菌活性(P<0.01,P<0.05),两者对同种属细菌的抑菌活性强弱相当,对耐药株和敏感株具有相似的抗菌活性。虽五倍子乙酸乙酯部位对白假丝酵母真菌临床分离株的MIC(95.15±96.34)mg·L-1明显高于克霉唑(8.00±8.92)mg·L-1(P<0.01),但克霉唑对临床分离株的耐药率为14.29%(2/14),而乙酸乙酯部位对所有临床分离株均有相似的抗菌活性(MIC为0.36~0.72 g·L-1)。结论:五倍子抗细菌和真菌的活性部位为乙酸乙酯部位。     

5种中药醇提物体外抑制2种革兰阳性菌的活性

目的:研究丹参、丁香、厚朴、金银花、大黄这5种中药醇提物对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活力,进而通过正交试验考察不同配比对这2种革兰阳性菌的抑菌作用.方法:丹参、丁香、厚朴、金银花、大黄醇提物浓缩至0.2g·mL-1,通过测量抑菌圈直径考察不同中药醇提物与醇提物配伍后对这2种细菌的抑菌效果.结果:痤疮丙酸杆菌对丹参醇提物为高度敏感,抑菌圈直径为(23.27±3.68) mm,对丁香、厚朴醇提物为中度敏感,为(18.82±2.27),(17.78±1.88) mm;金黄色葡萄球菌对丁香和厚朴醇提物为高度敏感,抑菌圈直径分别为(21.94±0.74),(19.52士1.09)mm,对大黄和丹参为中度敏感,抑菌圈直径为(14.43±2.24),(16.01±0.88) mm.丹参、厚朴、丁香醇提物最佳复配比例为1∶1∶1,其对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为(20.07±1.26),(20.57±0.38) mm.结论:丹参、厚朴、丁香的醇提物对这2种菌的抑菌活力均为高度敏感,抑菌作用最佳.丹参、厚朴、丁香的醇提物对2种菌抑菌活性的最佳配比为1∶1∶1.     

12种中草药对耐药与非耐药菌株抑菌活性的对比研究

目的：探讨五倍子等12种中草药对金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、肠球菌及耐万古霉素肠球菌4种菌株的抑菌作用。方法：采用中药抗菌试验试管法测定药物的最低抑菌浓度。结果：五倍子、黄连、大黄、黄柏、黄芩对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用;五倍子、黄连、黄柏、白头翁、大黄、败酱草对肠球菌和耐万古霉素肠球菌有较强的抑菌活性。结论：12种中药对各菌株均有不同的抑制作用,对耐药菌株和非耐药菌株抑菌活性无明显差异。     

甘肃道地中药大黄、黄芩对多重耐药菌的抑菌活性

目的：观察甘肃道地中药材大黄、黄芩的体外抑菌活性,为临床中药治疗耐药菌感染提供参考。方法：采用煎煮法制备大黄、黄芩中药原液,用肉汤稀释法测定两种药液对产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的最小抑菌浓度。结果：大黄对产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠杆菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的最小抑菌浓度分别为250mg／mL和125mg／mL。黄芩对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的最小抑菌浓度为250mg／mL;对产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠杆菌未见明显抑菌作用。结论：大黄、黄芩对临床常见的多重耐药菌有不同程度的抑菌活性,且大黄的抑菌活性优于黄芩;大黄对金黄色葡萄球菌抑菌活性优于大肠埃希菌。     

温里药挥发油的皮肤刺激性考察

目的:考察温里药挥发油的皮肤刺激性。方法:以3种温里药挥发油(肉桂挥发油、丁香挥发油、高良姜挥发油为研究对象,比较三者的皮肤细胞毒性和在体皮肤刺激性,并利用皮肤测试板预测这3种中药挥发油皮肤刺激性。结果:3种中药挥发油对人皮肤成纤维细胞(HSF)的毒性相差显著,肉桂挥发油、高良姜挥发油、丁香挥发油的半数抑制率(IC50)分别为(11. 16±0. 28),(53. 33±1. 71),(226. 70±17. 61) mg·L~(-1);在体皮肤刺激性评价表明,3种温里药挥发油对皮肤刺激性的排序为肉桂挥发油丁香挥发油高良姜挥发油;皮肤测试板评价3种挥发油刺激性结果与在体皮肤刺激性结果一致。结论:肉桂挥发油、丁香挥发油以及高良姜挥发油的皮肤细胞毒性评价结果与其在体皮肤刺激性结果不一致,采用皮肤测试板有望能够准确预测挥发油的在体皮肤刺激性。     

牡丹皮等10种中药对白色念珠菌浮游菌 和生物膜作用的研究

目的:观察牡丹皮等10种中药和土槿皮乙酸体外对白色念珠菌浮游菌和生物膜的作用。方法:10种中药为牡丹皮,黄连,丁香,肉桂,高良姜,桂枝,知母,苦参,蛇床子,白花蛇舌草,用水煎煮后浓缩,提取物用DMSO溶解,培养基稀释,体外微量稀释法检测药物对白色念珠菌浮游菌最低抑菌浓度(MIC)和抑制生物膜50%的浓度(SMIC50)的作用。结果:土槿皮乙酸对白色念珠菌的MIC为15.6 mg.L-1,对生物膜的SMIC50是31.2 mg.L-1。牡丹皮和高良姜对白色念珠菌生物膜有一定的抑制作用,SMIC50分别125,250 mg.L-1。黄连,丁香,肉桂,桂枝,知母,苦参,蛇床子,白花蛇舌草在2 000 mg.L-1均没有表现出抑菌活性。结论:体外微量稀释法检测到土槿皮乙酸对白色念珠菌浮游菌和生物膜具有明显的抑制作用,10种中药材中仅牡丹皮和高良姜的水煎液对白色念珠菌生物膜有一定的抑制作用,其他8种中药材的水煎液对白色念珠菌浮游菌和生物膜的抑制作用不明显。对中药抗真菌活性的评价值得进一步探讨。     

忍冬叶总黄酮的测定及其体外抗菌活性

目的:研究忍冬叶总黄酮的分离工艺及其对9种常见病原菌的体外抗菌活性。方法:以河南封丘忍冬叶为研究对象,以总黄酮为主要考察指标,通过大孔树脂柱色谱分离得到忍冬叶总黄酮,并对其进行最小抑菌浓度(MIC),最小杀菌浓度(MBC),抑菌圈活性等体外抗菌评价。结果:建立了忍冬叶总黄酮简便、有效的分离工艺,证实了忍冬叶总黄酮对9种供试病原菌具有较好的广谱抑菌性(MIC为1.95~62.5 g·L~(-1),MBC几乎均为125 g·L~(-1))。此外,当忍冬叶总黄酮部位同时含有较多绿原酸(4.2%)时,不仅得率高(10.5%),活性也更强。结论:忍冬叶总黄酮具有较好的广谱抗菌性,可以将其开发抗畜禽病原菌药物或者饲料添加剂,这也为忍冬叶资源的合理开发利用奠定了坚实的基础。     

黄芎抗栓胶囊中3种大黄蒽醌类成分配伍前后的含量变化

目的:考察黄芎抗栓胶囊中大黄与处方中其他药物配伍前后大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量变化,为该制剂的药效学研究提供参考。方法:按处方比例分别制备大黄单提样品、大黄与处方中其余药材的共提样品和大黄单提与处方中其余药材共提的合并样品,采用UPLC测定单提、共提与合并样品中大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量,流动相甲醇-0.1%磷酸(85∶15),流速0.25 m L·min~(-1),检测波长254 nm。结果:大黄素、大黄酚、大黄素甲醚在单提样品中质量分数最高,分别为2.437,17.040,2.720 mg·g~(-1),其次为合并样品,分别为1.914,13.236,2.155 mg·g~(-1),共提样品中质量分数最低,分别为1.308,6.478,1.169 mg·g~(-1)。结论:黄芎抗栓胶囊中大黄与其他药物配伍对大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的溶出具有较大影响,该影响主要发生在提取过程中。     

大黄对内毒素血症模型大鼠氧化应激损伤的保护作用初探

目的:观察大黄水提物对内毒素血症模型大鼠体内血清中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)活力及丙二醛(MDA),过氧化氢(H2O2)含量的影响,初步探讨大黄水提物对内毒素血症模型大鼠氧化应激的保护作用。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,地塞米松阳性药组(7.5×10-4g·kg-1),大黄高、低剂量组(3.0,1.5 g·kg-1)。每天早晚各给药1次,连续给药7次,末次给药0.5 h后尾静脉注射内毒素(LPS)(5 mg·kg-1)复制模型,然后每间隔0.5 h测定一次动物肛温,于造模后4 h麻醉动物,剖取脾脏、胸腺、肾上腺等组织称取各脏器质量计算其脏器系数,股动脉取血制备血清,采用比色法试剂盒测定血清中SOD,CAT活力及MDA,H2O2的含量。结果:与模型组比较,大黄水提物1.5 g·kg-1能显著降低模型大鼠的体温变化指数(TRI4)(P0.05),明显降低血清中MDA,H2O2的含量(P0.05),显著升高SOD,CAT的活力(P0.05)。结论:氧化应激是LPS诱发内毒素血症的重要环节,大黄可以通过上调SOD及CAT的活性,清除体内过度累积的自由基,干预模型大鼠体内氧化应激损伤的信号传导,起到一定的保护作用。     

大黄调控肠道水通道蛋白对脓毒症大鼠肠道菌群的影响

目的:探究大黄治疗脓毒症模型大鼠的病原生物学机制。方法:采用LPS腹腔注射法制作大鼠脓毒症模型,实验分为5组,分别为假手术组,脓毒症模型组,大黄高、中、低剂量组(150,100,50 mg·kg^-1),2次/d ig给药,连续给药3 d,记录各组大鼠病死率情况,采用细菌传统培养法对大鼠膜菌群、腔菌群及肠系膜淋巴结、血液进行细菌培养计数,同时通过RT-qPCR及Western blot法检测大鼠结肠水通道蛋白水通道蛋白2(AQP2)和AQP8。结果:大黄高、中剂量组大鼠病死率降低;各组大鼠膜菌群和腔菌群变化差异大,以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乳酸杆菌及双歧杆菌较明显,各治疗组AQP2和AQP8表达与脓毒症模型组有明显差异性(P<0.05)。且各治疗组AQP2和AQP8表达下降,与大黄剂量有依赖性,同时淋巴结与血标本细菌含量有所降低。结论:大黄可下调AQPs表达发挥泻下功能,减少脓毒症大鼠细菌移位治疗脓毒症,但中剂量大黄在发挥上述作用时有利用平衡肠道菌群。     

构树叶提取物抑菌活性的初步观察

目的: 研究构树叶提取物的抑菌活性。方法: 采用有机溶剂萃取、硅胶柱层析等方法从构树叶提取活性成分,观察其对金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏埃希菌、大肠杆菌、沙门氏菌和鸭疫里默氏杆菌等病原菌的抑制作用、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果: 水、70%乙醇和50%丙酮提取物对鸭疫里默氏杆菌外的病原菌均有较好的抑菌活性,水提取物对其他几种菌的MIC分别为6.75,25,6.75,12.5 g·L^-1,有机溶剂分步萃取构树叶水提取物,抑菌成分主要存在于乙酸乙酯和正丁醇萃取物中;用硅胶柱层析从乙酸乙酯和正丁醇萃取物中均分离到3个具有抑菌活性的组分。结论: 构树叶中含有多种抑菌成分,其理化性质、抑菌活性和抑菌机制各不相同;进一步分离、鉴定上述抑菌成分并测定其化学结构可望为开发新型抗菌药物提供依据。     

京万红组方成分体外抗白色念珠菌抑菌效应探讨

目的:研究京万红组方成分中盐酸小檗碱、黄芩苷及冰片的体外抗白色念珠菌作用。方法:以白色念珠菌为研究对象,K-B纸片扩散法分别测定50,100,150 g·L^-1的盐酸小檗碱、黄芩苷、冰片及制霉菌素药液抑菌圈直径;采用试管双倍稀释法和棋盘法,测定盐酸小檗碱、黄芩苷、冰片、制霉菌素分别最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),测定盐酸小檗碱、黄芩苷、冰片两两联用及3种组分联用的MIC,计算出联合抑菌分数(FIC)。结果:盐酸小檗碱、黄芩苷、冰片MIC分别为160,1 280,320 mg·L^-1;MBC分别为640,20 480,640 mg·L^-1。盐酸小檗碱与黄芩苷联用FIC指数0.5,为协同作用;黄芩苷与冰片联用FIC指数为0.625,为相加作用;盐酸小檗碱与冰片联用FIC指数为0.5,为协同作用。3种组分药物联合使用FIC指数为0.375,有一定的协同作用。结论:盐酸小檗碱、黄芩苷、冰片对白色念珠菌均有抑制作用,且3种组分药物联合使用具有一定的协同作用。     

黄连-黄芩药对在泻心汤和葛根芩连汤组方配伍中主要成分的含量变化

目的：探索药对黄连-黄芩在泻心汤和葛根芩连汤组方不同配伍情况下其中所含小檗碱、巴马汀、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量变化。方法：采用HPLC以乙腈-10 mmol·mL^-1甲酸铵溶液（内含0.2%三乙胺,用甲酸调pH到4.00）为流动相进行梯度洗脱。结果：组方中黄芩、大黄、甘草使黄连中小檗碱、巴马汀含量降低,葛根使小檗碱、巴马汀含量增加。组方配伍中黄连使黄芩中黄酮类成分含量降低,大黄和甘草对黄芩苷含量的影响无显著性差异,但使黄芩素、汉黄芩素含量降低;葛根使黄芩苷含量降低,但使黄芩素、汉黄芩素含量增加。结论：该方法可以有效鉴定泻心汤和葛根汤中5种成分,不同配伍对5种有效成分含量有影响增加。