四逆散及醋炙品组方含药血清对CORT致PC12细胞损伤的保护作用研究

目的?探讨四逆散（SNS）及醋炙品组方四逆散（VPSNS）含药血清对皮质酮（CORT）致PC12细胞损伤的保护作用和抗抑郁作用的分子机制。方法?采用MTT和形态观察法,确立模型的建立是否成功;经培养后的细胞分为4组:空白对照组、CORT组、SNS血清组、VPSNS血清组,采用ELISA法测定细胞上清液中多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）含量;采用微板法测定细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力,并采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Western blot和qPCR法检测细胞中BDNF、ERK和CREB蛋白和基因表达。结果?与模型组相比,20%VPSNS血清组与20%SNS血清组均能显著提高DA、5-HT含量和SOD活力,以及BDNF、ERK和CREB蛋白和基因表达（P<0.05）,并均能降低TNF-α、IL-1β和LDH含量以及细胞凋亡率（P<0.05）。与20%SNS血清组相比,20%VPSNS血清组对CORT致PC12细胞损伤的保护作用更佳（P<0.05）。结论?BDNF-ERK-CREB通路可能参与了SNS和VPSNS对CORT致PC12细胞损伤的保护作用,且VPSNS的保护作用优于SNS。      

芍药内酯苷、芍药苷对血虚免疫抑制小鼠的补血作用及机制

目的研究芍药内酯苷、芍药苷对环磷酰胺致血虚免疫抑制小鼠的补血作用及机制。方法采用环磷酰胺法复制小鼠血虚模型,分别灌胃芍药内酯苷及芍药苷单体高、低剂量(30、15 mg/kg),检测小鼠外周血象、胸腺与脾脏指数,分离血清、血浆检验粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的含量变化,比较2者的补血作用及机制。结果芍药内酯苷、芍药苷高剂量组均能明显升高白细胞数(P0.01)和胸腺指数(P0.01、P0.05),升高血清中GM-CSF的含量(P0.01)和血浆中G-CSF含量(P0.001、P0.01),升高血清中IL-3含量(P0.01、P0.05),明显降低血清中IL-6含量(P0.05)和TNF-α含量(P0.001、P0.01)。结论芍药内酯苷与芍药苷通过机体的免疫调节作用对抗环磷酰胺导致的血虚状态,是白芍养血柔肝功效的重要特征有效成分。     

芍药苷神经保护作用的实验研究

目的观察芍药苷（PF）的神经保护作用,为阿尔茨海默病（AD）的防治提供理论依据。方法体外培养PC12细胞,用Aβ1-40诱导α7nAChR缺失,建立AD早期细胞模型;用不同浓度（50、100和200μM）的芍药苷预处理,光镜观察细胞形态,MTT比色法测定细胞活性,MTB比色法测定细胞内Ca2＋含量,免疫细胞化学法观察α7nAChR的表达情况。结果芍药苷预处理组细胞活性、α7nAChR平均灰度值（AVG）均随芍药苷浓度的增加而增加,且Aβ1-40＋PF100μM组和Aβ1-40＋PF200μM组增加明显（P〈0.05）;芍药苷预处理组细胞内Ca2＋含量均降低（P〈0.05）。结论芍药苷抑制细胞内Ca2＋超载和Aβ1-4040的神经毒性作用,改善PC12细胞的活性,保护α7nAChR,是其防治AD的重要机制。     

芍药苷神经保护作用的实验研究

目的观察芍药苷(PF)的神经保护作用,为阿尔茨海默病(AD)的防治提供理论依据。方法体外培养PC12细胞,用Aβ1-40诱导α7nAChR缺失,建立AD早期细胞模型;用不同浓度(50、100和200μM)的芍药苷预处理,光镜观察细胞形态,MTT比色法测定细胞活性,MTB比色法测定细胞内Ca2+含量,免疫细胞化学法观察α7nAChR的表达情况。结果芍药苷预处理组细胞活性、α7nAChR平均灰度值(AVG)均随芍药苷浓度的增加而增加,且Aβ1-40+PF100μM组和Aβ1-40+PF200μM组增加明显(P<0.05);芍药苷预处理组细胞内Ca2+含量均降低(P<0.05)。结论芍药苷抑制细胞内Ca2+超载和Aβ1-4040的神经毒性作用,改善PC12细胞的活性,保护α7nAChR,是其防治AD的重要机制。     

HPLC法测定白芍总苷胶囊中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷

目的建立HPLC对白芍总苷胶囊中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷同时定量的分析方法。方法采用HPLC法。色谱柱Zorbax SB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相A为乙腈,B为0.015%磷酸溶液,梯度洗脱程序为0min(8%A),5min(12%A),20min(20%A),25min(20%A);35min(45%A),40min(45%A);检测波长230nm;柱温30℃。结果芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷质量浓度与峰面积均呈良好的线性关系。平均回收率芍药内酯苷为96.99%,RSD为0.56%;芍药苷为103.6%,RSD为0.77%;苯甲酰芍药苷为104.2%,RSD为1.35%(n=5)。结论该方法分离度好,简便易行,具有良好的重现性,可用于白芍总苷胶囊中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷的同时测定。     

芍药及芍药苷含量的研究

芍药为毛莨科植物芍药 Paeonia Lictifloram的干燥根 ,为一常用中药 ,具有平肝止痛 ,和血调经 ,敛阴止汗之功效。常作为收敛剂、镇静剂和降压剂 ,为妇科常用中药。芍药苷 ( paeoniflorin)是芍药的主要有效成分 ,其含量可作为鉴定芍药药材质量优劣的一个指标 ,芍药苷含量分析法目前主要有分光光度法 [1] ,薄层扫描法 [2 ] ,高效液相色谱法 ( RP-HPLC) [3 ]和高效毛细管电泳法等。本研究采用 RP-HPLC法测定芍药及其制剂中芍药苷的含量 ,获得较为满意的结果 ,现报道如下。1　实验材料1 .1　仪　器 Shimadzu Li- 6A高效液体色谱仪 ,SPD-…     

芍药苷稳定性研究

[目的]研究芍药苷在不同温度及pH条件下的稳定性。[方法]采用高效液相色谱法在不同温度及pH条件下,测定芍药苷在不同时间的含量变化。[结果]芍药苷在pH=9.0条件下,高于60℃在3h完全降解,在酸性条件下不降解。[结论]芍药苷在酸性条件下稳定,在碱性条件下随温度的升高,降解加速。     

芍药苷对心肺细胞的保护作用及机制研究进展

心肺系统疾病因其高发病率、高患病率、高病死率成为困扰人们的重大难题。芍药苷,一种新的单萜苷,来源于芍药根的有效活性成分。近年来,芍药苷因其广谱的药效被广泛应用于心肺系统相关疾病的治疗。根据目前相关研究报道,芍药苷对多种心肺细胞具有重要的保护作用,能减轻多种原因,如缺氧、过氧化氢及脂多糖等所致的细胞损害,其具体机制可能与芍药苷的抗氧化及抗炎症等作用相关。     

芍药采收后放置对芍药苷含量的影响

目的通过对芍药根不同部位中芍药苷含量进行测定,为芍药的采收加工提供依据。方法采用HPLC法,测定芍药苷含量,结合自然干燥减重情况换算新鲜芍药中的含量。结果芍药苷含量以24～48h为最高。120h后出现另一次升高。结论芍药采收后应在48h内完成加工过程。     

神经元型一氧化氮合酶对氟西汀抗抑郁样作用的影响

目的:探讨神经元型一氧化氮合酶(nNOS)与氟西汀抗抑郁样作用之间的关系?方法:以强迫游泳和悬尾实验的不动时间为指标评价药物的抗抑郁样作用?ICR小鼠接受氟西汀治疗或氟西汀治疗前予L-精氨酸/D-精氨酸预处理,观察给药后小鼠不动时间的改变;nNOS敲除鼠和野生型背景鼠均接受氟西汀治疗,观察给药后小鼠不动时间的改变?结果:在ICR小鼠,氟西汀显著缩短小鼠不动时间,产生抗抑郁样作用,L-精氨酸能有效拮抗氟西汀的这一作用,而D-精氨酸不能拮抗氟西汀的作用?氟西汀缩短野生型小鼠的强迫游泳不动时间,产生显著的抗抑郁样作用,而氟西汀治疗nNOS敲除小鼠没有改变强迫游泳不动时间,未产生抗抑郁样作用?结论:nNOS分子介导了氟西汀的抗抑郁样作用?     

芍药甙对大鼠海马神经元的保护作用

目的: 观察缺氧对大鼠海马神经元的影响及芍药甙的保护作用. 方法: 采用细胞培养方法获取10～14 d的海马神经元,将药物加入到培养液中,4 h后建立950 mL/L NO2 50 mL/L CO2混合气体急性缺氧模型,台盼蓝染色细胞计数并做流式细胞仪检测,以及酶法测定抗氧化酶(超氧化物岐化酶SOD)的抗氧化能力及丙二醛(MDA),NO的含量. 结果: 离体条件下芍药甙组较对照组SOD活性升高,MDA及NO含量降低(P＜0.01),且成量效比例关系,同时细胞凋亡率显著降低. 结论: 芍药甙在体外有抗缺氧损伤的作用,其作用机制可能是通过抑制细胞凋亡,提高抗氧化酶的活力,清除自由基而发挥作用.     

Protective effect of paeoniflorin against optic nerve crush

Summary In order to evaluate the efficacy of traditional paeonia extract paeoniflorin against optic nerve crush, 16 Brown Norway rats were divided into two groups at random, with 8 rats in each group. In paeoniaflorin-treated group, 2 mg paeoniaflorin (total volum: 1 mL) was injected into rat’s peritoneum one time a day for a period of 8 days. Rats in untreated group were given a single dose of vehicle. The optic nerve was crushed by a special forceps for 30 s in the left eye and a sham procedure was performed in the right eye on the 2nd day after the first injection. The retrograde fluorogold labeling of ganglion cells was conducted 5 days after optic nerve crush. The whole retina was flat-mounted thereafter. The ganglion cells that survived the crush were counted under fluorescent microscope by using an automatic counting software. As compared with the contralateral eye, the survival rate of ganglion cells in the left eye increased from 40.22% to 64.53% with a significant difference found between them (t=2.55, P=0.023). The results suggested that the paeonia extract paeoniflorin possessed a protective effect against optic nerve crush. This project was supported by the Natural Sciences Foundation of Hubei Province (No. 2007ABA135).     

Protective Effect of Paeoniflorin against Optic Nerve Crush

In order to evaluate the efficacy of traditional paeonia extract paeoniflorin against optic nerve crush, 16 Brown Norway rats were divided into two groups at random, with 8 rats in each group. In paeoniaflorin-treated group, 2 mg paeoniaflorin （total volum： 1 mL） was injected into rat＇s peritoneum one time a day for a period of 8 days. Rats in untreated group were given a single dose of vehicle. The optic nerve was crushed by a special forceps for 30 s in the left eye and a sham procedure was performed in the right eye on the 2nd day after the first injection. The retrograde fluorogold labeling of ganglion cells was conducted 5 days after optic nerve crush. The whole retina was flat-mounted thereafter. The ganglion cells that survived the crush were counted under fluorescent microscope by using an automatic counting software. As compared with the contralateral eye, the survival rate of ganglion cells in the left eye increased from 40.22% to 64.53% with a significant difference found between them （t=2.55, P=0.023）. The results suggested that the paeonia extract paeoniflorin possessed a protective effect against optic nerve crush.     

芍药苷对增殖性瘢痕成纤维细胞增殖抑制作用及机制研究

目的探索芍药苷对增殖性瘢痕(HS)成纤维细胞增殖抑制作用及机制研究。方法 0(对照组),200,400,800μmol/L的芍药苷作用HS成纤维细胞24、48、72 h后,MTT法检测细胞活力,Hoechst染色法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞Ⅰ型胶原(COLⅠ)和Ⅲ型胶原(COLⅢ)含量,Western blot检测转化生长因子-β(TGF-β)/Smad信号通路相关蛋白及基质金属蛋白酶1(MMP1)、MMP13表达。结果 200,400,800μmol/L芍药苷能显著降低HS成纤维细胞活力(P0.01),使细胞核发白,皱染,使细胞周期阻滞在G1期(P0.01),能显著降低细胞中COLⅠ、COLⅢ含量(P0.01),下调MMP1、MMP13、TGF-β1、pSmad2及p-Smad3表达(P0.01)。结论芍药苷能明显抑制HS成纤维细胞增殖及胶原合成,可能是通过抑制TGF-β1/Smad信号通路实现的。     

白芍中芍药苷含量测定影响因素的实验研究

目的:改进HPLC测定白芍中芍药苷含量的方法.方法:采用大连依利特柱C18(250 mm×4.6 mm,5μm)分离白芍中的芍药苷,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(14:86),流速为1 ml/min,检测波长为230 nm;并对粉碎度和浸泡时间进行考察.结果:芍药苷进样量在0.24～1.20μg范围内时与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均同收率为98.31%.RSD为0.960/0:改进了白芍中芍药苷的含量测定方法.结论:白芍含量测定的影响因素为粉碎度和浸泡时间.     

芍药苷对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：芍药苷是一种潜在的神经保护药。文中探讨芍药苷对沙土鼠脑缺血再灌注（ cerebral ischemia／reperfusion, CI／R）损伤的保护作用及其作用机制。方法采用结扎双侧颈总动脉缺血10 min再灌注6 h,建立沙土鼠CI／R模型,随机数表法分为假手术组、模型组以及芍药苷5、10、20 mg／kg组,每组10只,术前3 d开始腹腔注射给药,1次／d,术前30 min给药1次。给药体积均为10 mL／kg,假手术组和模型组给予等体积等渗盐水。观察再灌注6 h内神经症状,计算卒中指数;放射免疫法测定内皮素和降钙素基因相关肽（ calcitonin gene-related peptide, CGRP）含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（ superoxide dis-mutase, SOD）活力,硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量。结果芍药苷5、10、20mg ／kg组的卒中指数（14．8±3．6、12．3±2．0、12．7±1．4）较模型组（18．4±2．9）均明显降低（P＜0．05）,而SOD活力[（99．30±9．71）、（106．85±15．13）、（110．25±14．90） nU／mgPro]较模型组[（86．54±10．22）nU／mg Pro]均显著升高（P＜0．05）;芍药苷10 mg／kg组、芍药苷20 mg／kg组脑组织丙二醛含量[（69．23±8．42）、（65．91±7．64）μmol／mgPro]较模型组[（94．76±10．30）μmol／mgPro]显著降低（P＜0．01）;芍药苷5、10、20 mg／kg组血浆内皮素水平[（24．06±5．37）、（19．62±5．60）、（21．08±4．64）ng／L]均比模型组[（30．52±7．13）ng／L]明显降低（P＜0．05）,芍药苷对血浆CGRP水平则无明显影响。结论芍药苷预处理对CI／R损伤有保护作用,其原因与其减少脑组织自由基的产生、抑制脂质过氧化反应、抑制内源性神经肽内皮素的产生等有关。