培养毛乳头细胞生物学特性和毛囊重建的研究

目的 观察毛乳头细胞在体内外诱导毛囊再生和支持毛囊生长情况。方法 采用免疫组化、原位杂交、毛囊器官型培养和裸鼠移植技术，观察不同传代培养的毛乳头细胞碱性成纤维细胞生长因子，内皮素和干细胞因子的表达变化情况。结果 低传代培养的毛乳头细胞的内皮素和干细胞因子表达较强，传代6代后减弱。用低传代培养的毛乳头细胞与毛囊上皮细胞在毛囊器官型培养模型中可见毛囊样结构形成，移植到裸鼠后可见较为完整的毛囊形成。用低传代培养的毛乳头细胞与毛囊上皮细胞按一定比例混合后直接注射到裸鼠皮下，也可见毛囊样结构形成。发现毛乳头细胞诱导毛囊再生的能力与其表达内皮素和干细胞因子的强弱相关。结论 低传代培养的毛乳头细胞在体内外均具有诱导毛囊再生的能力，并且与其表达内皮素和干细胞因子的强弱相关。     

人腋窝毛乳头细胞的分离与培养

【摘要】 目的 探讨高效快速分离培养人腋窝毛乳头细胞的方法。方法 收集2015年10月至2016年5月陆军军医大学第一附属医院皮肤科腋臭术后含毛皮肤标本,分别用改良二步酶消化法、一步酶消化法和显微解剖法分离腋窝毛乳头,比较3种方法操作过程差异以及毛乳头分离效率、贴壁率、细胞迁出时间、总操作时间、实际操作时间的差异,并鉴定培养的腋窝毛乳头细胞。结果 与一步酶消化法和显微解剖法相比,改良二步酶消化法操作更简单,分离效率可达30%以上,1周后毛乳头贴壁率高达96%,细胞迁出时间缩短3 ~ 4 d,总耗时长于一步酶消化法和显微解剖法,但实际操作时间短于一步酶消化法和显微解剖法,且污染率低于显微解剖法。培养的腋窝毛乳头细胞早期可呈凝集性生长,6代以后的细胞呈非凝集性生长。免疫荧光结果示腋窝毛乳头细胞层黏连蛋白和Ⅳ型胶原阳性。结论 改良二步酶消化法是一种简单﹑高效﹑快速分离人腋窝毛乳头细胞的方法,少量标本即可培养出腋窝毛乳头细胞。     

人毛乳头细胞体外培养生长曲线观察

目的：观察人正常头皮毛囊真皮成分的细胞体外培养的生长繁殖曲线及表皮细胞生长因子对它们的影响。方法：采用胶原酶消化法培养毛乳头细胞作真皮鞘细胞，在4种培养基中进行传代培养，并在基础培养基、常规培养基＋表皮细胞生长因子中进行^3H－TdR掺入，测定细胞代谢情况。结果：毛乳头细胞和真皮鞘细胞、成纤维细胞的生长呈现三个时相，停滞期、对数生长期和缓慢生长期，表皮细胞生长因子对3种细胞的生长具有显著的促进作用，尤其是对真皮鞘细胞的作用最为显著。结论：常规培养基＋表皮细胞生长因子对3种间质细胞的促生长作用表明，在器官型培养中对毛囊上皮细胞和真皮成分的细胞也会有促生长作用，为毛囊器官型培养和人工皮肤研究采用此培养基提供了实验依据。     

咖啡因对体外培养人毛囊及毛乳头细胞的影响

目的:研究咖啡因对人毛囊及毛乳头细胞体外培养的影响.方法:选择不同浓度咖啡因作用于体外培养的人毛囊及毛乳头细胞,记录6 d内毛囊的生长速度和毛球部形态学改变,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定毛乳头细胞增殖活性;流式细胞技术测定细胞凋亡;RT-PCR技术进行血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、雌激素受体(ER)、雄激素受体(AR)及5α-还原酶(SRD5A)的mRNA定量.结果:与对照组相比,0.005%咖啡因明显促进毛囊生长,0.000 5%咖啡因促进毛乳头细胞增殖、抑制凋亡,并促进毛发生长正性相关因子表达,抑制负性相关因子表达.结论:在有效浓度范围内,咖啡因可以促进人毛发生长,高浓度咖啡因抑制毛发生长.     

干细胞因子对体外培养毛乳头细胞生长特性的影响

目的观察体外培养传代的毛乳头细胞表达干细胞因子(stem cell factor,SCF)情况;并观察SCF对体外培养的毛乳头细胞生长曲线的影响。方法应用免疫组化及流式细胞技术测量不同代次的毛乳头细胞SCF的表达变化情况,采用MTT比色法观察SCF对毛乳头细胞生长增殖的影响。结果低传代培养的毛乳头细胞SCF的表达较强,随着传代次数的增多,表达逐渐减弱。SCF组与对照组相比,细胞生长曲线的停滞期减少,提前进入对数生长期,并且OD值与对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 SCF可以促进体外培养的人毛乳头细胞的增殖。     

毛乳头细胞生物学特性和功能研究进展

毛乳头细胞在毛囊形态发生、生长周期调控及维持毛发生长发育中起重要作用,并具有在体内外条件下重建毛囊的功能.同时,毛乳头细胞具有明显的成体干细胞特性.毛乳头细胞生物学特性和功能是毛囊细胞生物学研究的重要内容,可为脱发性疾病的诊治、含有毛囊等附件的全功能组织工程皮肤的构建及干细胞组织工程研究提供理论基础.     

毛乳头细胞在毛囊形态学发生和生长调控中的作用

毛乳头细胞是一群特异的间质细胞 ,位于毛囊底部。在毛囊的胚胎发育过程中 ,这些细胞起源于真皮成纤维细胞。通过细胞外基质的变化 ,毛乳头细胞在毛囊的形态学发生和成年毛囊的周期性生长过程中具有重要的作用     

毛乳头细胞在毛囊形态学发生和生长调控中的作用

毛乳头细胞是一群特异的间质细胞，位于毛囊底部。在毛囊的胚胎发育过程中，这些细胞起源于真皮成纤维细胞。通过细胞外基质的变化，毛乳头细胞在毛囊的形态学发生和成年毛囊的周期性生长过程中具有重要的作用。     

毛乳头细胞与毛发上皮细胞相互作用的研究

目的探讨人毛乳头细胞和毛发上皮细胞间的相互作用,了解毛发生长周期的调控,寻找体内外毛囊重建的途径。方法人毛乳头细胞和毛发上皮细胞分室和共同培养于 DMEM培养基中,在不同时相计数两种细胞,并观察细胞的生长方式。结果毛乳头细胞和毛发上皮细胞的生长能相互促进,毛发上皮细胞能诱导培养的毛乳头细胞形成毛乳头样结构。结论毛囊真－表皮间的作用是双向的,它们共同控制着毛囊的生长和发育。     

毛乳头细胞对毛囊前体黑素细胞作用的评价

目的：确定毛乳头细胞（DPC）对毛囊前体黑素细胞（MP）的激活和趋化作用。方法：采用三维分离式共培养体系,将MP与毛囊外毛根鞘角质形成细胞（KC）以1：10比例于6孔培养板中接触式共培养,DPC以1×10^6个／孔分离培养于Transwell inserts。检测DPC对MP的趋化作用。MP内黑素小体、酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相关蛋白1（TRP-1）和酪氨酸酶相关蛋白2（TRP-2）的表达。结果：MP与KC共培养后MP内出现Ⅲ期黑素小体,当三种细胞共培养后MP内主要为Ⅲ和Ⅳ期黑素小体。DPC可促进MP中TYR和TRP-1的表达,但对TRP-2的表达无明显影响,对MP具有明显趋化作用。结论：构建了MP、KC和DPC的三维培养体系,发现DPC对MP具有明显激活和趋化移行作用。     

HSPC011基因在毛乳头细胞的表达及其cDNA克隆

目的 确定HSPC011基因在毛乳头细胞的表达,并克隆其cDNA.方法 原位杂交技术证实HSPC011基因在毛乳头细胞表达;RT-PCR扩增目的基因并构建重组真核表达质粒pCI-neo/HSPCO11.结果 细胞内mRNA原位杂交证实HSPC011基因在凝集性生长的毛乳头细胞表达,而在非凝集性生长的毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞不表达;RT-PCR从毛乳头细胞RNA中扩增到约430bp目的基因片段;构建了重组质粒pCI-neo/HSPCO11,酶切分析和测序结果均表明目的片段与HSPC011基因相应序列完全一致.结论 HSPC011基因在毛乳头细胞表达,其表达可能与毛乳头细胞的分化和功能状态有关.     

Effect of Chrysanthemum zawadskii Extract on Dermal Papilla Cell Proliferation and Hair Growth

BackgroundChrysanthemum zawadskii (CZ) belongs to the genus Chrysanthemum, also known as ‘Gu-Jeol-Cho’ in Korea. CZ has been used as herbal remedy to manage cough, hypertensive disorders, pharyngitis, bronchitis, gastroenteritis, pneumonia, bladder diseases and common cold. However, its effect on hair growth has not been documented.ObjectiveThe aim of present study was to elucidate the beneficial effects of CZ on hair growth.MethodsProliferation of follicular dermal papilla (DP) cells from human scalp skin was evaluated by MTT assay. The expression of various molecules in DP cells was checked by western blot assay. Effect of CZ extract on the hair growth was evaluated by hair organ culture and C57BL/6 mice model.ResultsCultivation of DP cells with CZ extract increased cellular proliferation, increased expression of phosphorylated protein kinase B (p-Akt), p-ERK, B-cell lymphoma 2, and decreased expression of Bax. Treatment of human hair follicles with CZ extract significantly enhanced hair growth. Additionally, CZ markedly shortened telogen period, increased anagen transformation and stimulated hair growth in the animal study.ConclusionThese results suggest that CZ extract has an effect of promoting hair growth and may therefore be a useful a therapeutic remedy for preventing hair loss.     

重组腺病毒载体转染 CTLA4Ig基因在毛乳头细胞中的表达

目的：探讨免疫耐受基因（CTLA4Ig）在毛乳头细胞中的表达,为毛乳头细胞移植后产生免疫耐受提供理论和实验依据。方法：通过构建的重组腺病毒载体将免疫耐受基因（CTLA4Ig）cDNA导入培养的毛乳头细胞中,并将体外基因转染的毛乳头细胞移植到小鼠体内,通过组织学和免疫组化检测目的基因在体内和体外的表达。结果CTLA4Ig蛋白在基因转染6h后即在细胞浆中表达,随着转染时间的延长其表达逐渐增加;基因转染的毛乳头细胞移植到小鼠体内,目的基因在24h开始表达,能持续表达2周;移植细胞未受到免疫排斥。结论：带有CTLA4Ig基因的毛乳头细胞在体外和小鼠体内能较长时间存活并表达CTLA4Ig。     

永生化人毛乳头细胞系体内诱导毛囊的形成

目的研究永生化人毛乳头细胞(DPC)系DPC-hTERT在体内诱导毛囊形成的能力。方法将第30代DPC-hTERT与刚分离的毛囊上皮细胞混合后直接注射到裸鼠背部皮下,观察毛囊形成情况。结果 DPC-hTERT与刚分离的毛囊上皮细胞混合后注射到裸鼠背部皮下后,可见毛囊样结构形成,且此结构表达毛囊特有的角蛋白。结论 DPC-hTERT具有正常DPC的功能,具备在体内诱导毛囊样结构的能力。     

条件培养基对高传代人毛乳头细胞生长的影响

目的 研究人毛乳头细胞条件培养基的生物学活性。方法 通过体外培养低传代人毛乳头细胞,收集其基础培养基的上清液配制成条件培养基,用于培养高传代人毛乳头细胞,观察细胞形态及细胞生长曲线的变化;同时观察高传代人毛乳头细胞与低传代人毛乳头细胞共培养情况。结果 低传代条件培养基使高传代人毛乳头细胞出现了凝集生长现象,其生长曲线显著优于基础培养基培养的高传代毛乳头细胞(P<0.01),其细胞的3H鄄TdR测定值亦显著升高(P<0.01)。高传代人毛乳头细胞与低传代人毛乳头细胞共培养后出现凝集性生长趋势。结论 低传代人毛乳头细胞在培养状态下可分泌具有明确生物学活性的物质。