温经通络散对奥沙利铂所致周围神经毒性大鼠作用机制研究

目的探讨温经通络散外用对奥沙利铂所致周围神经毒性大鼠的治疗作用及机制。方法采用腹腔注射奥沙利铂4 mg/kg建立标准奥沙利铂周围神经毒性大鼠模型。将雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药组,中药组予温经通络散浸泡大鼠四肢及尾部,模型组大鼠予去离子水浸泡作为对照,正常组大鼠腹腔注射等体积5%葡萄糖。检测温度和机械刺激下大鼠痛觉超敏和过敏反应,采用免疫组化方法检测大鼠L4~L6段脊髓背角GFAP表达,RT-PCR检测大鼠L4~L6段背根神经节谷氨酸转运体1(GLT-1)m RNA表达。结果模型组大鼠较正常组出现明显行为学改变(P0.05),中药组大鼠较模型组行为学明显改善(P0.01);模型组大鼠GFAP阳性细胞数较正常组明显升高(P0.05),中药组升高不明显;与正常组比较,模型组可见脊髓背角内星形胶质细胞胞体增大,突起增多、变粗及GLT-1 m RNA表达下降(P0.05,P0.01);与模型组比较,中药组活性细胞减少、突起减少及GLT-1 m RNA表达水平升高(P0.01)。结论温经通络散外用可显著改善奥沙利铂所致的神经病理性疼痛。其作用机制可能与抑制脊髓背角星形胶质细胞活化进而介导的伤害性信号传递有关。     

奥沙利铂神经毒性的机制及防治研究进展

奥沙利铂是继顺铂、卡铂后临床上使用的第三代化疗药,与前两者相比,疗效更好、毒副反应更轻是它的特点,目前奥沙利铂已逐渐发展为一线化疗用药,被广泛用于结直肠癌、胃癌等多种肿瘤的治疗,但是奥沙利铂引起的神经毒性(Oxaliplatin-induced Neurotoxicity OXiN)是应用时的一大难题,这使得患者对化疗的依从性大大降低,因此不能规范的完成整个化疗疗程,从而降低了患者的生活质量,但是由于目前其发生的机制尚不明确,所以对于OXiN尚没有标准的治疗方案,为了更好的防治OXiN,现将其研究进展综述如下。     

护理干预奥沙利铂化疗所致的神经毒性反应

目的:探讨护理干预对奥沙利铂化疗引起神经毒性反应的影响。方法:将73例奥沙利铂化疗患者随机分为观察组和对照组,对照组采用常规护理方法。观察组除采用常规护理外,通过健康教育及心理支持,化疗前、化疗中、化疗后采取一系列的措施,配合中药浸泡四肢末梢,比较两组神经毒性反应发生率的差异。结果:观察组与对照组比较,神经毒性反应发生率低,具有统计学差异。结论:通过恰当的护理干预,患者神经毒性反应轻微,病人能完成全程化疗。     

中药防治奥沙利铂神经毒性的作用及机制研究进展

奥沙利铂是第3代铂类抗肿瘤药物,具有疗效好、抗癌谱广泛等优点。但周围神经病变是其主要的剂量限制性毒性,影响患者的治疗进程和生活质量。以中医理论为指导的益气活血、温阳通络等传统中药在治疗此症上取得一定进展。从中药复方及活性成分两方面对国内外研究进展予以综述,为临床医师治疗奥沙利铂神经毒性提供依据。     

肉桂醛对0℃冷应激大鼠背根神经节神经细胞胞浆内Ca2+变化及TRPA1和TRPM8 mRNA表达的影响

目的:观察肉桂醛对0℃冷应激大鼠背根神经节神经细胞胞浆内Ca~(2+)浓度变化,并探讨其对瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)和M8(TRPM8)mRNA表达的影响。方法:取大鼠原代背根节神经细胞置于0℃冷应激状态,噻唑蓝(MTT)法检测不同时长冷应激状态下细胞的活性;加入肉桂醛,采用激光共聚焦显微镜观察细胞内外Ca~(2+)分布的变化;另以实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测其TRPA1,TRPM8 mRNA的表达。结果:不同时长的冷应激状态下,细胞存活度无明显差异;冷应激可降低背根神经节(DRG)神经细胞胞浆内Ca~(2+)浓度(P0.05),一定量的肉桂醛则能使Ca~(2+)浓度显著升高(P0.01)。Real-time PCR检测显示,长时间冷应激TRPA1 mRNA表达上调(P0.05);长时间冷应激TRPM8 mRNA表达明显要高于短时冷应激(P0.05);适当浓度的肉桂醛使冷应激大鼠DRG神经细胞TRPA1 mRNA表达升高(P0.05,P0.01),对TRPM8 mRNA的影响尚不明显。结论:冷应激能影响TRPA1,TRPM8 mRNA的表达,降低胞浆内Ca~(2+)浓度,作用机制可能为肉桂醛通过活化TRPA1通道,升高细胞浆内Ca~(2+)浓度。     

中药外用对奥沙利铂致神经毒性的减毒作用

目的:研究自制中药方剂浸泡四肢末端对减弱奥沙利铂诱发神经毒性的疗效观察.方法:将79例使用含奥沙利铂化疗方案的肿瘤患者,随机分为对照组和中药组,分别用安慰剂(40℃温水)和自制中药方(40℃)浸泡四肢末端,观察、比较两组的疗效.结果:中药组肿瘤患者神经毒性发生率、分级均低于对照组,具有统计学意义.结论:自制外用中药方能有效减弱奥沙利铂所致的神经毒性.     

治伤巴布剂的镇痛作用及对大鼠背根神经节辣椒受体表达的影响

目的：探讨治伤巴布剂对福尔马林足底炎性疼痛大鼠模型背根神经节中辣椒素受体水平的影响,研究治伤巴布剂对大鼠炎性疼痛是否有镇痛作用。方法：SD大鼠36只,随机分为空白对照组（n=12）、模型组（n=12）及治疗组（n=12）;空白对照组大鼠不予任何处理,模型组左后足底注射0.1 mL5%福尔马林,治疗组大鼠造模前1 d于左后足外敷治伤巴布剂,然后左后足底注射0.1 mL5%福尔马林,再一直外敷治伤巴布剂,观察造模后大鼠疼痛行为学反应,并以Dubuisson评分方法进行记录比较。各组大鼠在指定时间点取出L3-6节段背根神经节,运用实时荧光定量（RT-PCR）、蛋白质印迹（Western blot）检测辣椒素受体在大鼠背根神经节中的表达水平。结果：模型组及治疗组呈典型的双相伤害性行为反应,但治疗组大鼠疼痛反应积分低于模型组,差异有统计学意义（P〈0.05﹚;实时荧光定量检查结果显示模型组辣椒素受体mRNA相对表达量大于治疗组,治疗组辣椒素受体mRNA相对表达量大于空白对照组,3组比较,差异有统计学意义（P〈0.05﹚,3组组内3个时相点的相对表达量差异均无统计学意义（P〉0.05）;蛋白质印迹法灰度扫描显示模型组辣椒素受体相对表达量大于治疗组,治疗组辣椒素受体相对表达量大于空白对照组,3组比较,差异有统计学意义（P〈0.05﹚,3组组内3个时相点的相对表达量差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：治伤巴布剂能缓解大鼠炎性疼痛反应,对大鼠炎性疼痛具有一定的镇痛作用,可降低福尔马林足底炎性疼痛大鼠模型背根神经节中辣椒素受体的表达水平。     

祛风宣肺方通过背根神经反射降低咳嗽敏感性的作用机制研究

目的：探讨祛风宣肺方对咳嗽敏感性增高豚鼠背根神经节中瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）、P物质（SP）、降钙素基因相关肽（CGRP）蛋白及基因的作用，进一步研究祛风宣肺方在慢性咳嗽中的作用机制。方法：将48只SPF级雄性健康豚鼠随机分为正常对照组（生理盐水）、模型组（生理盐水）、西药组（Capsazepine）、中药组（祛风宣肺方），采用卵蛋白致敏的方法建立咳嗽敏感性增高豚鼠模型。药物干预1周后辣椒素雾化法测定各组豚鼠的咳嗽次数，实时PCR法测定背根节中TRPV1、SP、CGRP mRNA水平，蛋白印迹法测定背根节中TRPV1、NK1-R、CGRP蛋白表达。结果：与正常对照组比较，模型组咳嗽次数增加，背根节中TRPV1、SP、CGRP mRNA表达增加，TRPV1、NK-1R、CGRP蛋白表达升高（均P<0.01）。与模型组比较，西药组、中药组咳嗽次数降低（P<0.05），背根节中TRPV1、SP、CGRP mRNA表达下降（P<0.01），西药组背根节中TRPV1、NK-1R、CGRP蛋白表达下降（P<0.05），中药组背根节中NK-1R、CGRP蛋白表达下降（P<0.05），TRPV1蛋白表达与模型组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：抑制TRPV1通道，抑制背根神经反射进而降低气道神经源性炎症可能是祛风宣肺方的重要疗效机制之一。     

中医药防治奥沙利铂神经毒性的研究进展

奥沙利铂（Oxaliplatin,L—OHP）是继顺铂、卡铂之后一种常用的第三代铂类抗肿瘤化疗药物,抗肿瘤谱广,临床主要用于晚期癌症,与氟尿嘧啶联合应用于消化道肿瘤的治疗,疗效显著,但高神经毒性限制了其在临床中的应用。奥沙利铂的毒性与顺铂不同,无肾、耳和血液的剂量限制性毒性,最常见的毒性是神经毒性。_20欧洲Ⅲ期临床报道奥沙利铂联合5-FU／CF的神经毒性发生率高达68％,国内文献也有报道发生率高达90．5％。因此,了解奥沙利铂的神经毒性及防治显得尤为重要。现就近5年中医药防治奥沙利铂致神经毒性做一综述。     

益气活血对奥沙利铂神经毒性的干预作用

目的观察益气活血中药对奥沙利铂神经毒性的拮抗作用。方法对接受奥沙利铂化疗的54例肿瘤患者,分为治疗组和对照组。治疗组在应用奥沙利铂化疗的同时配合益气活血中药治疗,对照组单用化疗。结果治疗组与对照组比较,两组临床疗效相似,但治疗组神经毒性的发生数以及发生程度明显低于对照维。结论益气活血中药能有效的干预和拮抗奥沙利铂的神经毒性。     

加味盆痛灵对子宫内膜异位症疼痛大鼠背根神经节神经元动作电位的影响

目的 观察加味盆痛灵对子宫内膜异位症（EMs）模型大鼠背根神经节（DRG）神经元动作电位的影响，以探讨其抗EMs疼痛的作用机制。方法 采用自体内膜移植法构建SD大鼠EMs模型，将造模成功的大鼠随机分为模型、加味盆痛灵组，每组8只。另设假手术组8只。加味盆痛灵组大鼠每天给予加味盆痛灵（7.77g/kg）直肠给药，连续4周。模型组和假手术组直肠给予等体积生理盐水。分别于不同时间点测定大鼠50%缩足阈值（PWT）；运用全细胞电流钳技术记录加味盆痛灵对EMs疼痛大鼠DRG神经元兴奋性的影响。结果 与假手术组比较，模型组痛阈值降低，动作电位爆发阈值下降，动作电位半峰时程（APD50）延长，300pA去极化电流诱发的动作电位发放频率增加（P<0.01）。与模型组比较，加味盆痛灵组痛阈值上调，动作电位爆发阈值升高，APD50缩短，300pA去极化电流诱发的动作电位发放频率减少（P<0.01）。3组间静息电位水平和动作电位峰值比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 加味盆痛灵抗EMs疼痛的机制可能与抑制DRG神经元的兴奋性相关。     

延胡索乙素对大鼠慢性压迫背根节神经元自发放电的影响

目的观察延胡索乙素(l-THP)对大鼠慢性压迫背根节神经元A类纤维自发放电的影响。方法采用单纤维记录大鼠慢性压迫背根节神经元自发放电的方法,观察l-THP对自发放电的影响,以及浓度-效应关系。结果实验中记录到单纤维A类神经元自发放电84根。在A类神经元自发放电中有25根自发放电为周期节律,59根为非周期节律。l-THP(100μmol/L)分别引起16.0%(4/25)的周期节律放电神经元和67.8%(40/59)非周期节律放电神经元放电减少(P0.01,l-THP干预前后配对t检验)。l-THP对受损背根节(DRG)神经元自发放电的抑制作用具有剂量依赖关系,随着浓度的增大抑制神经元自发放电的时间越快,自发放电恢复所需的时间也越长。其中有57.1%(24/42)的DRG神经元自发放电在洗脱后20 min内可以恢复,42.8%(18/42)的DRG神经元自发放电在洗脱后经过3 h始终没有恢复。结论l-THP对大鼠慢性压迫背根节神经元A类纤维的自发放电有抑制作用。     

木丹颗粒对STZ诱导糖尿病大鼠背根神经节神经元细胞凋亡的影响

目的:探究木丹颗粒对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠背根神经节神经元细胞凋亡的影响。方法:将50只大鼠随机分为正常对照组(11只)、模型组(13只)、甲钴胺片组(13只)和木丹颗粒组(13只),采用STZ诱导复制糖尿病模型,正常对照组和模型组灌胃生理盐水,甲钴胺片组和木丹颗粒组分别灌胃甲钴胺片和木丹颗粒,观察各组大鼠血糖变化、背根神经节细胞凋亡阳性百分比、背根神经节形态。结果:血糖水平模型组给药后显著高于给药前(P0.05),甲钴胺片组和木丹颗粒组给药前后无明显变化(P0.05);模型组、甲钴胺片组和木丹颗粒组大鼠给药后背根神经节凋亡细胞阳性率小于正常对照组(P0.05);木丹颗粒组和甲钴胺片组大鼠给药后背根神经节凋亡细胞阳性率小于模型组(P0.05);木丹颗粒组和甲钴胺片组大鼠背根神经节形态结构虽然出现了和模型组相似的损伤,但损伤程度小于模型组(P0.05)。结论:木丹颗粒对STZ诱导糖尿病大鼠背根神经节神经元细胞凋亡具有保护作用。     

电针对慢性坐骨神经压迫性损伤大鼠神经病理学及背根神经节P2X_3受体表达的影响

目的：观察EA对CCI大鼠坐骨神经组织病理学及DRG P2X3受体表达的影响,探讨电针对神经组织学的影响及P2X3受体在电针镇痛效应中的作用。方法：将32只成年雄性SD大鼠,分为假模组、模型对照组、健侧EA组、患侧EA组,每组8只,模型对照组及EA组结扎坐骨神经造成CCI疼痛模型。各组于术前（0天）及术后3、57、1、01、2、14天分别测量大鼠患侧足MWT和TWL,EA组于术后第8天电针＂足三里＂-＂阳陵泉＂连续7天,每天1次。术后14天对坐骨神经标本行组织学观察,采用Estebe评分方法行组织学评分,免疫荧光组织化学检测患侧L5背根神经节中P2X3受体的表达情况。结果：与术前比较,CCI各组大鼠痛阈明显降低,出现痛觉过敏（P〈0.01）,而电针干预后EA组较CCI模型组痛阈明显增加（P〈0.05）但仍低于假模组。各组大鼠坐骨神经组织学观察无明显差异,各组评分差异无统计学意义（P〉0.05）。术后14天EA组较模型对照组患侧DRG L5中P2X3受体表达显著减少（P〈0.05）,并且患侧EA组较健侧EA组减少明显。结论：电针对坐骨神经压迫性损伤的镇痛效果可能是通过抑制大鼠DRG中P2X3受体的表达产生作用;患侧电针较健侧电针镇痛效果明显;电针后坐骨神经未见明显的病理组织学改变。     

Pine Oil Effects on Chemical and Thermal Injury in Mice and Cultured Mouse Dorsal Root Ganglion Neurons

A commercial resin‐based pine oil (PO) derived from Pinus palustris and Pinus elliottii was the major focus of this investigation. Extracts of pine resins, needles, and bark are folk medicines commonly used to treat skin ailments, including burns. The American Burn Association estimates that 500,000 people with burn injuries receive medical treatment each year; one‐half of US burn victims are children, most with scald burns. This systematic study was initiated as follow‐up to personal anecdotal evidence acquired over more than 10 years by MH Bhattacharyya regarding PO's efficacy for treating burns. The results demonstrate that PO counteracted dermal inflammation in both a mouse ear model of contact irritant‐induced dermal inflammation and a second degree scald burn to the mouse paw. Furthermore, PO significantly counteracted the tactile allodynia and soft tissue injury caused by the scald burn. In mouse dorsal root ganglion neuronal cultures, PO added to the medium blocked adenosine triphosphate‐activated, but not capsaicin‐activated, pain pathways, demonstrating specificity. These results together support the hypothesis that a pine‐oil‐based treatment can be developed to provide effective in‐home care for second degree burns. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.     

电针对慢性坐骨神经压迫性损伤大鼠神经病理学及背根神经节P2X3受体表达的影响

目的:观察EA对CCI大鼠坐骨神经组织病理学及DRG P2X3受体表达的影响,探讨电针对神经组织学的影响及P2X3受体在电针镇痛效应中的作用。方法:将32只成年雄性SD大鼠,分为假模组、模型对照组、健侧EA组、患侧EA组,每组8只,模型对照组及EA组结扎坐骨神经造成CCI疼痛模型。各组于术前(0天)及术后3、57、1、01、2、14天分别测量大鼠患侧足MWT和TWL,EA组于术后第8天电针"足三里"-"阳陵泉"连续7天,每天1次。术后14天对坐骨神经标本行组织学观察,采用Estebe评分方法行组织学评分,免疫荧光组织化学检测患侧L5背根神经节中P2X3受体的表达情况。结果:与术前比较,CCI各组大鼠痛阈明显降低,出现痛觉过敏(P<0.01),而电针干预后EA组较CCI模型组痛阈明显增加(P<0.05)但仍低于假模组。各组大鼠坐骨神经组织学观察无明显差异,各组评分差异无统计学意义(P>0.05)。术后14天EA组较模型对照组患侧DRG L5中P2X3受体表达显著减少(P<0.05),并且患侧EA组较健侧EA组减少明显。结论:电针对坐骨神经压迫性损伤的镇痛效果可能是通过抑制大鼠DRG中P2X3受体的表达产生作用;患侧电针较健侧电针镇痛效果明显;电针后坐骨神经未见明显的病理组织学改变。     

糖络宁减轻大鼠背根神经节细胞炎症反应的作用机制研究

目的：以施万细胞外泌体为切入点,观察糖络宁含药血清对体外高糖诱导的大鼠背根神经节细胞炎症反应的影响。方法：采用糖络宁含药血清干预高糖培养的施万细胞,分为正常组、高糖组、糖络宁组,干预48 h后,提取各组细胞上清液中外泌体,将各组外泌体分别干预正常糖和高糖条件培养的大鼠背根神经节细胞,分为无外泌体-正常糖组,正常外泌体-正常糖组、高糖外泌体-正常糖组、糖络宁外泌体-正常糖组、无外泌体-高糖组、正常外泌体高糖组、高糖外泌体-高糖组、糖络宁外泌体-高糖组8个组,48 h后,收集各组细胞并进行相关检测。CCK-8法检测各组细胞活力,酶联免疫法检测各组细胞上清液中炎症介质（TNF-α、IL-6、IL-1β）的蛋白表达情况,实时荧光定量PCR检测各组细胞炎症介质的表达情况。结果：与正常外泌体-正常糖组比较,高糖外泌体-正常糖组细胞活力下降（P<0.05）,炎症介质的基因和蛋白表达均增加（P<0.05）;而与高糖外泌体-正常糖组比较,糖络宁外泌体-正常糖组细胞活力有所升高（P<0.05）,各炎症介质的基因和蛋白表达均有所下调（P<0.05）。高糖条件培养的背根神经节细胞中,不同组外泌体干预表现出类似的作用效果;结论：糖络宁能通过调控施万细胞外泌体减轻大鼠背根神经节细胞炎症反应。     

藻酸双酯钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑环境的影响及对鸡胚背根神经节的促生长作用

 目的观察藻酸双酯钠(PSS)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑环境的影响及对培养的鸡胚背根神经节的促生长作用。方法采用大鼠大脑中动脉结扎模型研究PSS对局灶性脑缺血再灌注后脑环境的影响;采用鸡胚背根神经节体外培养模型研究PSS对培养的鸡胚背根神经节的促生长作用。结果在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型中,PSS可呈剂量依赖性阻止大脑皮质Ca²⁺释放,降低脑组织Na⁺,NO,丙二醛(MDA)浓度,抑制一氧化氮合酶(NOS),增强超氧化物歧化酶(SOD),Na⁺-K⁺- ATPase,Ca²⁺-ATPase活性,提高K⁺浓度;在鸡胚背根神经节体外培养模型中,PSS可呈剂量依赖性促进鸡胚背根神经节生长。结论 PSS能改善大鼠局灶性脑缺血再灌注后的损伤脑环境,促进鸡胚背根神经节生长,对局灶性脑缺血有保护作用。     

Neuro‐Protective Effects of Resveratrol on Carbon Monoxide‐Induced Toxicity in Male Rats

Acute carbon monoxide (CO) poisoning causes neurotoxicity through induction of necrosis, apoptosis, lipid peroxidation and oxidative stress. Resveratrol (RES) is a natural polyphenolic phytoalexin that exhibits neuroprotective effects in ischemia/reperfusion due to its anti‐apoptotic, anti‐necrotic and strong anti‐oxidant properties as well as its ability to activate pro‐survival pathways. In this study, rats were exposed to CO 3000 ppm for 1 h. Immediately after poisoning and on the next four consecutive days, RES (1, 5 and 10 mg/kg) was administered intraperitoneally. On the fifth day, animals' brains were excised, and necrosis, lipid peroxidation level and the level of Akt, BAX and BCL2 expression were evaluated. The results showed that RES 10 mg/kg significantly reduced lipid peroxidation, but RES 1 and 5 mg/kg had no significant effect on this parameter. Furthermore, RES 5 and 10 mg/kg significantly increased Akt expression level, while BAX/BCL2 ratio was reduced by RES 1, 5 and 10 mg/kg. Moreover, RES reduced necrotic foci in the brain, but the best results were seen following treatment with RES 10 mg/kg. In summary, RES showed neuroprotective effect in CO‐poisoned rats as it decreased necrosis and BAX/BCL2 ratio and increased Akt expression levels. Copyright © 2017 John Wiley & Sons, Ltd.     

Effects of Zhengtian Pills on Migraine Headache in Rats via Transient Receptor Potential Vanilloid 1

Objective To investigate the effects and molecular mechanism of Zhengtian Pills(ZTP) on migraine headache. Methods All rats were randomly divided into control, positive control, migraine model, low- and high-dose ZTP groups, and glyceryl trinitrate was injected to induce migraine headache. The time of ears turning red, frequency of scratching head, climbing the cage, and head-twitching were used to evaluate rat behaviors. After 10 d administration of ZTP, the expression levels of transient receptor potential vanilloid 1(TRPV1) both in cortex and hippocampus were determined by Western blotting. Results After 2 min of glyceryl trinitrate injection, rats showed headache phenomena that parallels the clinical symptoms of migraine, which peaked in 30 min, and lasted for 60 min. Frequency of head-twitching and numbers of scratching head in glyceryl trinitrate(GTN) group were significantly increased. In contrast, after ZTP(1.08 g/kg, ig) treatment, the numbers of scratching head with fore-limb, hind-limb and the frequency of head-twitching were significantly decreased. Flunarizine(FLU) and low-dose ZTP(0.54 g/kg) also showed a trend to decrease the numbers of scratching head and head-twitching frequency, but no significant difference. Besides, ZTP significantly decreased the up-regulated TRPV1 protein expression level both in cortex and hippocampus. Conclusion The present study shows that ZTP could significantly improve the migraine symptoms of headache in rats and TRPV1 might be one of the important molecular mechanisms. This is the first report about the effect of ZTP on TRPV1 protein expression level both in cortex and hippocampus of rats.