聚丙烯酰胺凝胶银染技术改良

目的 :对变性及非变性聚丙烯酰胺凝胶银染方法最适条件进行探讨和改良。方法 :采用PCR 聚丙烯酰胺电泳、硝酸银染色检测 15 9～ 196bp及 336bpDNA片段 ,并对不同显影液浓度与显色温度下的结果进行比较。结果 :DNA分子经改良银染法检测均清晰可见 ,对比良好。结论 :聚丙烯酰胺凝胶电泳后采用银染技术分析 ,方便快捷 ,易长期保存 ,并减小了对人及环境的毒害作用     

诺氏疟原虫抗原的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉分析

本文用十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了诺氏疟原虫裂殖子可溶性抗原(Ⅲ号抗原)。该抗原有22条带,其中有2条带可能为来源于宿主细胞的污染物。动物实验表明诺氏原虫裂殖子Ⅲ号抗原无明显的保护作用。     

聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳技术

随着泳动距离增加而丙烯酰胺浓度也逐渐增加的梯度聚丙烯酰胺凝胶,目前已广泛用来代替单一浓度的凝胶。浓度梯度胶随浓度增加而孔径逐渐变小,这将对蛋白质组成的分析更为细致,同时能获得更清晰的蛋白质区带。现将我们用梯度胶和单一浓度胶对同一蛋白质组分进行比较的实验报告如下。     

聚丙烯酰胺凝胶银染技术改良

目的：对变性及非变性聚丙烯酰胺凝胶银染方法最适条件进行探讨和改良。方法：采用PCR－聚丙烯酰胺电泳、硝酸银染色检测159－196bp及336bpDNA片段，并对不同显影液浓度与显色温度下的结果进行比较。结果：DNA分子经改良银染法检测均清晰可见，对比良好。结论：聚丙烯酰胺凝胶电泳后采用银染技术分析，方便快捷，易长期保存，并减小了对人及环境的毒害作用。     

聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用

目的:探讨聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用.方法:提取正常组大鼠和链脲佐菌素致糖尿病模型组大鼠心肌组织总RNA,逆转录得到cDNA第一链,以此为模板进行PCR扩增,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA银染技术分析不同循环数及模板量与PCR产物量间的关系.结果:PCR扩增反应在第20～25个循环,起始模板量为0.8～2.4μg时,PCR产物量与起始模板量呈现较好的线性关系.结论:通过控制起始模板量,减少PCR循环数使目的基因的扩增处于PCR扩增指数期,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DM银染技术,可以通过比较PCR扩增产物量的变化以分析目的基因表达水平的差异.     

一种快速DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳与银染干胶技术

介绍快速、高效、高分辨率的DNA聚丙烯酰胺电泳、银染及干胶技术，采用本文介绍的配比灌制胶，浓缩效果和分离效果十分理想，无横向扩散；染色温度提高，缩短了银染的时间；双层玻璃纸干胶法简便易行。     

催化系统对聚丙烯酰胺凝胶聚合的影响

目的探讨不同的催化系统对不同酸碱条件下聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)凝胶聚合的影响。方法采用不同剂量的过硫酸铵(AP)四甲基乙二胺(TEMED)催化系统组合和过硫酸铵(AP)硫酸亚铁(FeSO4)-抗坏血酸(VC)催化系统组合,进行碱性PAGE和酸性PAGE,观察各组凝胶聚合所需时间。结果AP-TEMED在碱性电泳中应用,0.05%～0.1%的AP和0.1%的TEMED用量,凝胶聚合在0.5h内完成;在酸性电泳中应用时,0.2%的AP和0.3%～0.4%的TEMED用量,凝胶聚合在2h内完成。AP-VC-FeSO4催化系统应用于酸性电泳时设计的10组用量,48h均未发现凝胶形成。结论AP-TEMED催化系统在碱性PAGE中的效果好于酸性PAGE。在碱性电泳中,以0.05%～0.1%的AP和0.1%的TEMED为宜;在酸性电泳中,以0.2%的AP和0.3%～0.4%的TEMED为宜。     

DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法的选择

目的 比较4种聚丙烯酰胺凝胶银染方法，为初次使用者选择方法时提供参考。方法 用24mer的引物作为上样样本，分别采用氨水法、低浓度硝酸银法、0．1％及0.2％硝酸银法染色。后2种配合不同的显色剂显色。结果 前2种未显色，0.1％及0.2％硝酸银可显色。结论 0.2％的硝酸银与氢氧化钠显色剂相结合具有最高的灵敏度；0．2％的硝酸银与碳酸钠显色剂相结合具有最佳的显像效果。     

不同产地桔梗的聚丙烯酰胺凝胶电泳指纹图谱鉴别研究

目的 建立不同产地桔梗药材的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)指纹图谱鉴别方法.方法 蛋白质(Pro)、过氧化物酶同工酶(POD)、酯酶同工酶(EST)PAGE指纹图谱分析.结果 不同产地桔梗的Pro-PAGE图谱差异极小;POD-PAGE与EST-PAGE图谱在谱带分布及数量上均具有显著性差异,分别具有各自的鉴别谱带.结论 POD-PAGE与EST-PAGE指纹图谱可作为鉴别不同产地桔梗的有效方法.     

聚丙烯酰胺水凝胶在隆乳术中的应用

目的　总结聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳的临床经验。方法　1997年10月到2002年3月,采用乌克兰产聚丙烯酰胺水凝胶为800例乳房体积不足的女性进行注射隆乳,从乳房下皱襞处一点进针注射,注入乳腺后间隙。结果　术前与术后相比,隆乳外形及手感较满意,总体并发症为12％,经处理痊愈。结论　聚丙烯酰胺水凝胶是一种理想的隆乳材料,具有操作简单、安全可靠、痛苦小、表面不易留疤痕等优点,并可获得良好的效果。     

聚丙烯酰胺水凝胶在隆乳术中的应用

目的 总结聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳的临床经验。方法 1997年10月到2002年3月，采用乌克兰产聚丙烯酰胺水凝胶为800例乳房体积不足的女性进行注射隆乳，从乳房下皱壁处一点进针注射，注入乳腺后间隙，结果 术前与术后相比，隆乳外形及手感较满意，总体并发症为12%，经处理痊愈。结论 聚丙烯酰胺水凝胶是一种理想的隆乳材料，具有操作简单，安全可靠，痛苦小，表面不易留疤痕等优点。并可获得良好的效果。     

DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法的选择

目的 比较4种聚丙烯酰胺凝胶银染方法,为初次使用者选择方法时提供参考。方法 用24 mer的引物作为上样样本,分别采用氨水法、低浓度硝酸银法、0.1%及0.2%硝酸银法染色。后2种配合不同的显色剂显色。结果 前2种未显色,0.1%及0.2%硝酸银可显色。结论 0.2%的硝酸银与氢氧化钠显色剂相结合具有最高的灵敏度;0.2%的硝酸银与碳酸钠显色剂相结合具有最佳的显像效果。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质快速染色

聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的一种区带电泳 ,这种凝胶由丙烯酰胺 ( acrylamide,Acr)和交联剂 N,N-叉基 (亚甲基 )双丙烯胺 ( N,N- methy/ ene- bis- acrylamide,Bis)聚合而成。聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好、弹性大、透明、化学稳定性高、无电渗等特性。在盘状电泳过程中有 3种物理效应 :1样品的浓缩效应 ;2凝胶的分子筛效应 ;3一般电泳分离的电荷效应。由于这 3种物理效应 ,使样品分离效果好 ,分辨率高。如人血清用醋酸纤维膜电泳 ( p H8.6)可分成 5～ 7个成分 ,而用…     

桃仁蛋白梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳的研究

电泳作为一种分离蛋白质的手段已是含蛋白中药材鉴定的常用方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳( PAGE)是利用丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合形成的立体网状物作为载体对不同的带电物质进行分离的电泳方法。梯度 PAGE是 PAGE的改进方法 ,可用来将不同大小的蛋白质分开 ,配合标准相对分子质量蛋白可以对待测蛋白质进行相对分子质量测定。从已有的资料来看 ,用于鉴定的电泳方法有平板PAGE[1] ,圆盘 PAGE[2 ] ,SDS- PAGE[3] ,高效毛细管电泳 [4 ] ,同功酶等电聚焦 [5] ,醋酸纤维薄膜电泳 [6]等。到目前为止 ,还未见用梯度 PAGE法进行中药鉴定…     

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析小分子多肽

目的 研究ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＵＳ－ＰＡＧＥ）显示小分子多肽的方法。方法 观察不同方法处理的样品，上样量对电流晰影响及对分子量标准（Ｍ，２５１２＝１６９４９）进行直线回归分析，结果 样品和不同处理条件未见有差异；在该实验系统条件下上样样品为每孔５～１０μｇ较佳；分子量标准直线回归系数ｒ＝－０．９６２。结论 样品处理方便，上样量少，在１６０ｇ．Ｌ＾－１Ｔ，６０ｇ．ｋｇ＾－１Ｃ较低的丙烯酰胺     

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析壳寡糖

目的 研究一种快速准确的分析壳寡糖组成的定性测定方法.方法 通过连续电泳和不连续电泳对比实验确定壳寡糖的最佳分析条件.结果 浓缩胶浓度为3%,分离胶浓度为17.5%,上样量为10 μl,恒定电流为40 mA,电泳时间50 min条件下,获得最佳壳寡糖分析图谱. 结论 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析壳寡糖组成的方法的确是一种简单快速有效地定性检测方法.     

聚丙烯酰胺水凝胶软组织充填剂的临床应用

不可吸收注射用软组织充填剂 ,具有损伤较小、塑性良好等优点。本文详细介绍了近年来应用注射型聚丙烯酰胺水凝胶软组织充填剂的经验。本组 35 2例中 ,除 5例发生并发症外 ,其余均显示充填部位外形良好、质地柔软 ,经近期随访效果良好。该方法安全可靠、操作简便、痛苦小。注射聚丙烯酰胺水凝胶是目前较理想的填充材料。     

考马斯亮蓝染色在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的应用

在研究医学媒介节肢动物与宿主相互关系过程中，经常用到聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，以分析功能成分的变化及作用关系，通过分析蛋白凝胶电泳后的色带图谱，可识别不同的蛋白，或用凝胶电泳法分析DNA，其中的关键显色技术是考马斯亮蓝染色法。本文结合实际研究的经验，介绍一种快速显色的技术，供相关人员参考使用。本实验流程仅需三小时，且具有快速、安全、染色及观察（色带）简便等优点。