抗菌抗内毒素多肽小鼠体内拮抗内毒素作用的研究

目的：观察抗菌抗内毒素多肽对内毒素(LPS)攻击小鼠死亡的保护作用。方法：以一个LD50的LPS(20mg/kg)静脉注射攻击小鼠,分别于LPS攻击后20S内静脉注射不同剂量的抗菌抗内毒素多肽;于LPS攻击前及攻击后不同时间内分别静脉注射5mg/kg和10mg／kg的抗菌抗内毒素多肽,以观察抗菌抗内毒素肽对LPS攻击所致小鼠死亡的保护作用、抗菌抗内毒素肽对LPS攻击小鼠死亡保护作用的时效关系及抗菌抗内毒素肽对LPS攻击小鼠死亡的预防作用。     

抗菌抗内毒素多肽拮抗内毒素作用的体内研究

目的：观察抗菌抗内毒素多肽对内毒素(LPS)攻击大鼠的保护作用。方法：以一个LD50的LPS(10mg/kg^-1)攻击大鼠,于LPS攻击后20秒内静脉注射抗菌抗内毒素多肽(5mg/kg^-1),在不同时相点采血,并测定大鼠血液中的TNT-α、IL-6浓度,以确定抗菌抗内毒素多肽对LPS攻击大鼠的保护作用。结果：抗菌抗内毒素多肽可明显降低LPS攻击大鼠血液中TNF-α、IL-6浓度。     

生物抗菌肽及其抗菌活性与中和内毒素作用

革兰阴性菌细胞外壁成分脂多糖／内毒素(lipoplysaccharide，LPS)能激活单核细胞／巨噬细胞产生大量的炎症介质，如TNF-α、IL-1、IL-6、NO等，触发一系列的病理反应过程，最终导致内毒素血症、脓毒症休克甚至死亡。其中TNF-α已被证实是导致内毒素诱导动物模型死亡最主要的致病炎症因子。     

拮抗内毒素的研究进展

由创伤及感染引起的脓毒症是导致临床病人死亡的主要原因.脓毒症的本质是机体对侵入机体的病原微生物所产生的过度炎症性反应,通常而言,内毒素与免疫炎症细胞,特别是巨噬细胞上相应的受体结合,是启动机体产生防御反应及由此而形成脓毒性反应或脓毒症的关键.研究内毒素介导脓毒症的分子病理学机制及近年有关拮抗内毒素措施的研究进展很重要.     

不同pH及封闭氨基端对甘氨酸拮抗内毒素作用的影响

目的和方法：用封闭群新西兰家兔５６只,分为７组,注射不同ｐＨ（４．０,６．０,７．４,１０．０）的甘氨酸和内毒素混合液,观察注射后体温变化,由此反映出不同ｐＨ对甘氨酸拮抗内毒素致热作用的影响。结果：甘氨酸的拮抗效果在碱性溶液中减弱、酸性溶液中增强,这种变化与ｐＨ对甘氨酸ＮＨ３＾＋端解离程度的影响是一致的。进一步用氯甲酸苄脂封闭甘氨酸的氨基端,通过鲎试验方法观察到,封闭氨基端后甘氨酸对内毒素的拮抗作     

以细菌内毒素为靶点应用生物传感器技术筛选拮抗内毒素中草药

目的 :以细菌内毒素 (lipopolysaccride,LPS)及其活性中心 (lipidA)为靶点 ,应用生物传感器技术 ,从 42种中草药水煎液中筛选具有拮抗内毒素作用的中药。方法 :将LPS/LipidA分别包被于生物传感器的疏水性样品池为固定相 ,以中药水煎液为流动相 ,通过生物传感器测定样品与LPS/LipidA的亲合力 ;对具有与内毒素高亲合力的中药与内毒素混合后孵浴 ,再次测定其与LPS/LipidA的亲合力。结果 :在筛选的 42种中草药中 ,观察到赤芍、大黄、青果、栀子等中药能与内毒素高亲合力结合 ;通过与内毒素孵浴后的二次检测 ,发现赤芍、大黄、青果等中草…     

生物传感器技术在筛选赤芍中抗内毒素有效部位的应用

目的 :以细菌内毒素为靶点 ,应用生物传感器技术 ,优选出赤芍中抗内毒素有效成份的提取方法。方法 :将LPS包被于生物传感器的疏水性样品池为固定相 ,三种方法 (水浸法、醇提法、石油醚法 )提取的赤芍样品为流动相 ,通过生物传感器测定样品与LPS的亲合力 ;同时进一步测定不同样品与 0 .2 5EU/ml内毒素混合孵育后 ,内毒素亲合力的变化。结果 :水浸法提取的赤芍样品与内毒素具有较高的亲合力 ,与内毒素孵育后仍有一定的亲合力 ,提示含有较高的与LPS结合的有效成份 ,醇提法与LPS的亲合力相对较小 ,石油醚提取样品基本上与LPS没有亲合力。…     

甘氨酸和多粘菌素B拮抗内毒素活性及其机制的研究

目的和方法：通过ＬＡＬ改良基质显色法和紫外学谱法观察甘氨酸/多粘菌素Ｂ（ＰＭＢ） 合剂体外拮抗内毒素的机制。结果：测定了各拮抗剂与内毒素中和后剩余内毒素的浓度（活性），结果表明甘氨酸/ＰＣＢ合剂组、ＰＭＢ组和甘氨酸组均显著低于内毒素组（Ｐ〈０．０１），并且甘氨酸/ＰＭＢ合剂组显著低于单独使用ＰＭＢ组和甘氨酸组（Ｐ〈０．０ １）。从紫我谱图上可看到两种拮抗剂中和内毒素的作用是明显不同的：ＰＭＢ可以降低内     

内毒素耐受的研究进展

巨噬细胞被少量内毒素多次刺激后则能引起内毒素耐受现象 ,主要机制为LPS信号转导功能障碍。全身性炎症反应综合征以及脓毒症患者均具有内毒素耐受的特征 ,可作为其免疫功能失调的重要标志。     

生物传感技术应用于中和内毒素活性物质的研究

目的 :探讨应用生物亲合传感技术测定中和内毒素活性物质。方法 :多粘菌素B与一定浓度的内毒素混合后 ,分别用生物亲合传感技术和鲎试验法 ,测定多粘菌素B中和内毒素的比值 ,同时用生物学方法对结果进行进一步验证。结果 :多粘菌素B中和内毒素的比值 ,生物传感器技术为 0 .3 5ug∶1ng、动态浊度法为 0 .5mg∶1、基质显色法为 1mg∶1 ,生物学测定结果与生物亲合传感技术测定结果相同。结论 :运用生物亲合传感技术测定中和内毒素活性物质的结果更为准确、方便、快速 ,值得进一步推广应用生物传感技术应用于中和内毒素活性物质的研究@吕根法$…     

内毒素对红细胞乙酰胆碱酯酶（AchE）活性作用的探讨

大鼠的红细胞在体外经内毒素处理后,其膜乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性显著降低,并发现血浆的存在可进一步加强内毒素降低AchE活性的作用。给大鼠体内注射内毒素同样可以降低AchE的活性。另外,内毒素还可降低狗红细胞膜上AchE的活性,但它对人红细胞膜上AchE影响甚微。凝胶电泳分析结果表明,不同种属的动物,其红细胞膜蛋白图谱不同,推测内毒素影响酶活性很可能与膜蛋白的差异有关。     

一种合成的新型内毒素结合肽突变体的体内外拮抗内毒素效应初步研究

目的设计构建新型内毒素结合肽突变体(mutant of endotoxin binding peptide,mEBP),并研究其体内外拮抗内毒素效应。方法采用F-moc固相合成法获得内毒素结合肽(endotoxin binding peptide,EBP)及其突变体mEBP;CCK-8法检测mEBP对RAW264.7细胞增殖的影响;ELISA法检测mEBP对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7细胞分泌TNF-α和IL-6的影响;Western blot法检测mEBP对LPS诱导的RAW264.7细胞表达p-p38 MAPK的影响;中性红法测定mEBP对LPS诱导的RAW264.7细胞吞饮功能的影响。复制烧伤合并内毒素血症小鼠模型;检测mEBP对建模后6 h小鼠血浆中TNF-α、ALT和AST浓度的影响;检测mEBP对模型小鼠48 h生存率的影响。结果 mEBP无可见的细胞毒性;mEBP可降低LPS诱导的RAW264.7细胞分泌TNF-α和IL-6(P<0.05);抑制p-p38 MAPK信号通路的激活;抑制RAW264.7细胞的吞饮功能(P<0.01);mEBP预处理可明显降低烧伤合并内毒素血症模型小鼠血浆中的TNF-α、ALT和AST浓度(P<0.05),提高模型小鼠48h生存率。结论 mEBP和EBP均具有明显的拮抗内毒素活性,其中mEBP拮抗活性更强。     

大蒜黄酮的分离及抗内毒素活性的评价

目的：筛选和评介大蒜提取成分的抗内毒素作用。方法：通过离子交换-高效液相色谱等方法从大蒜中筛选出2个成分(大蒜黄酮1、2)；采用动态浊度法测定其体外中和内毒素的能力；观察对内毒素(20mg/kg)攻击小鼠的保护作用。结果：大蒜黄酮2能直接中和内毒素，对内毒素攻击小鼠有显著的保护作用。结论：大蒜黄酮2具有显著的抗内毒素活性。     

钌红对内毒素多种生物活性的拮抗作用

钌红对内毒素的鲎试剂凝集反应、局部Shwartzman反应、降低外周血白细胞计数和血清锌的含量等效应均有拮抗作用。电镜下可见经钌红处理过的内毒素呈无规律絮状凝聚,正常网状结构被破坏。用三硝基苯磺酸法证实钌红与内毒素结合,使其氨基含量大增。以上结果提示:钌红的多阳离子氨基可能是对内毒素多种生物活性起拮抗作用的有效结构。     

中药抗突变实验研究

本文从1984年起分别以C57纯种小鼠的骨髓细胞和人外周血淋巴细胞为实验材料，用公认的诱变剂环磷酰胺(CPP)诱发的姐妹染色单体互换(SCE)，微核(MN)升高作指标，对大量中草药进行实验，已筛选出部分补气药或相关物以及各种人参的有效成分或单体具有抗突变作用。     

内毒素肺损伤肺淋巴变化的实验研究

本实验应用清醒绵羊内毒素肺损伤模型对内毒素致伤后肺淋巴液的变化作了研究。内毒素致伤后,肺动脉压(Ppa)、肺微血管压(PMV)、肺淋巴流量(QL),淋巴白蛋白/血浆白蛋白比值(LA/PA)、淋巴胶体渗透压(π_(i))和肺微血管滤过系数(Kf)均明显增加。压力和通透性变化对QL的影响之比,在Ⅰ期(0～2h)和Ⅱ期(2～6h)分别为1∶0.53和1∶2.31。提示了PMV增高为Ⅰ期肺水肿形成的主要因素,通透性增加为Ⅱ期的主要因素。     

中药赤芍对球囊损伤术后血管重构的干预研究

目的 观察中药赤芍防止球囊损伤术后血管重构作用。方法 新西兰白兔随机分为对照组、单纯高脂组、赤芍高剂量组、低剂量组。高脂喂养6周建立动脉粥样硬化模型,行颈动脉球囊损伤术,8周时取材作病理形态学检查。结果(1)与高脂组比较,赤芍高、低剂量组增生内膜面积、中层面积,内膜、中膜、外膜PCNA阳性着色均显著减少(P<0.05或P<0.01)。(2)各组内皮增生成分主要为平滑肌细胞;巨噬细胞阳性着色主要分布在外膜,与高脂组比较,赤芍高、低剂量组阳性着色较少。(3)高脂组动脉损伤侧外膜Ⅰ型胶原增多,赤芍组Ⅰ型胶原增加较少。结论 赤芍对高脂喂养兔颈动脉球囊损伤术后血管重构有显著防止作用。     

两种兔源内毒素结合蛋白的分离、纯化及其体外生物学活性的对比研究

目的　从烧伤合并内毒素血症致多器官损害家兔血清中分离纯化内毒素结合蛋白 ,并初步对比研究它们的生物学活性。方法　兔血清蛋白质通过二步离子交换层析 (Bio Rex 70Resin、Mono Q)及凝胶过滤分离纯化 ,并经流式细胞分析实验、绵羊红细胞凝聚实验、氨基末端氨基酸残基测序等方法鉴定 ,再将所获蛋白质作用于体外培养的人单核细胞 (U937) ,观测其分泌TNFα等细胞因子的生物效应。结果　获得两种具有促进内毒素 (LPS)与外周血单核细胞 (PBMC)结合的蛋白质 ,其中一种相对分子质量为 6 0× 10 4 ,其N端 10个氨基酸序列为TNPGLITRIT ,证实为兔内毒素结合蛋白 (LBP) ;另一种蛋白质相对分子质量为 4 8× 10 4 ,其N端 10个氨基酸序列为GSQGTFTSEE ,与NCBI蛋白质库中的氨基酸序列进行比较 ,未发现相同序列 ,命名为p48。结论　p48与LBP具有相似的生物学功能 ,p48的生物学活性稍弱于LBP。提示体内除LBP外 ,p48也同样起着介导LPS的毒性作用。这可能是近年国外研究中阻断LBP的活性后 ,机体毒性反应并无明显减轻的原因之一。     

内毒素的跨膜信号及其在失控性炎症反应发生中的作用

大约20年前,人们还曾认为LPS诱导宿主细胞的激活是由于其分子上的脂质A残基插入靶细胞浆膜内所致（2）,但这一观点随着近年来炎性细胞表面和血循环中能与LPS结合的蛋白质分子的发现已发生变化。目前普遍认为,LPS的作用是通过这些分子或受体介导的,现已发现单核/巨噬细胞表面存在多种LPS受体,如清道夫受体（scavengerreceptor,SR）、CD14、TLR2、TLR4、β2整合素、L－selectin等,这些受体构成了自身与非自身识别的重要分子基础,是机体调控LPS诱导炎症反应的始动环节。