高效液相色谱-超滤法测定常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷的蛋白结合率

目的建立毛蕊花糖苷血浆蛋白结合率的测定方法,比较常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷蛋白结合率 的异同。方法将大鼠置于低压低氧动物实验舱中,于海拨7 500 m 下缺氧暴露3 d 制备缺氧大鼠模型。采用 超滤法处理样品,结合高效液相色谱（HPLC）法测定常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷游离型药物浓度（Cf）和 总药物浓度（Ct）,并考察超滤膜非特异性结合率（NSB）,对Cf 进行矫正后,计算血浆蛋白结合率。结果大鼠 血浆中毛蕊花糖苷浓度为3、6、12 μg·mL-1 时,毛蕊花糖苷与常氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为（62.02± 8.51）%、（60.17±5.59）%和（62.60±3.77）%;与缺氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为（32.79±4.20）%、（33.16± 1.74）%和（32.72±2.20）%,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论毛蕊花糖苷与常氧大鼠血浆蛋白属于 中强度结合,且在研究的浓度范围内,不具浓度依赖性,而毛蕊花糖苷与缺氧大鼠血浆蛋白结合强度明显低于 常氧大鼠血浆。     

水杨酸血浆蛋白结合率测定方法的研究

目的:探讨水杨酸血浆蛋白结合率的测定方法。方法:以大鼠血浆、全血和家兔血浆为实验对象,采用平衡透析后用紫外分光光度法测定透析袋外游离水杨酸的浓度,计算血浆蛋白结合率。结果:用袋内加入标准品法时用大鼠血浆测得的水杨酸血浆蛋白结合率为23.2%,用袋外加入标准品法时用大鼠全血、大鼠血浆测得的水杨酸血浆蛋白结合率分别为23.1%、23.2%,用袋外加入标准品法时用家兔血浆为研究对象测得家兔的水杨酸血浆蛋白结合率为44.0%。结论:用大鼠血浆、全血和家兔血浆为研究对象,结果重复性好,可以用大鼠全血代替大鼠血浆,可以将水杨酸标准品加于透析袋外代替加于透析袋内。水杨酸血浆蛋白结合率在大鼠与家兔之间存在种属差异。     

牡荆素血浆蛋白结合率的测定

目的:建立血浆中牡荆素浓度的分析方法,测定牡荆素血浆蛋白结合率。方法:采用平衡透析法透析,利用HPLC测定血浆中牡荆素浓度,计算牡荆素与人血浆蛋白结合率,并比较大鼠和人血浆中牡荆素的血浆蛋白结合率。结果:在2～16 mg.L-1,药物浓度对血浆蛋白结合率无显著影响,但牡荆素在大鼠和人的血浆蛋白结合率存在显著性差异,牡荆素与人的血浆蛋白结合率高于与大鼠血浆蛋白结合率。结论:牡荆素与血浆蛋白具有较强的结合。     

蟾毒灵血浆蛋白结合率的测定

目的:建立血浆中蟾毒灵浓度的分析方法,测定蟾毒灵血浆蛋白结合率.方法:采用平衡透析法测定蟾毒灵血浆蛋白结合率,利用HPLC测定血浆中蟾毒灵浓度,测定并比较大鼠和人血浆中蟾毒灵的血浆蛋白结合率.结果:在0.1~1.0mg·L~(-1),药物浓度对血浆蛋白结合率无显著影响,蟾毒灵与大鼠和人的血浆蛋白结合率存在显著性差异,蟾毒灵与人血浆蛋白结合率高于与大鼠血浆蛋白结合率.结论:蟾毒灵与血浆蛋白具有较强的结合.     

HPLC法测定丁香酚与大鼠血浆蛋白的结合率

目的研究丁香酚与大鼠血浆蛋白的结合。方法采用大鼠血浆平衡透析法,HPLC法测定透析袋两侧溶液中丁香酚的质量浓度,计算丁香酚的血浆蛋白结合率。结果丁香酚在质量浓度为144.62、28.92、5.78μg/mL时与血浆蛋白结合率分别为52.43%、58.60%、61.49%。丁香酚具有中等强度的血浆蛋白结合率。结论HPLC法测定丁香酚与血浆蛋白结合率试验具有简便、快速、灵敏与选择性高的特点。     

高效液相色谱法研究蓝萼甲素与大鼠血浆蛋白的结合率

目的研究蓝萼甲素与大鼠血浆蛋白的结合。方法采用大鼠血浆平衡透析法，HPLC法测定透析袋两侧溶液中蓝萼甲素的质量浓度，计算蓝萼甲素的血浆蛋白结合率。结果蓝萼甲素在质量浓度为20、10、1μg／mL时与血浆蛋白结合率分别为74．46％、77．87％、75．29％。结论高效液相色谱法用于蓝萼甲素的生物样品测定具有简便、快速、灵敏与选择性高的特点。蓝萼甲素具有中等强度的血浆蛋白结合率。     

微透析法研究磷酸川芎嗪体外血浆蛋白结合率

 目的 测定磷酸川芎嗪的血浆蛋白结合率。 方法 采用微透析法测定磷酸川芎嗪的血浆蛋白结合率,用反透析法进行探针回收率校正。血浆蛋白结合率用 f =(<>ρ₀ - <> ρ _f )/<>ρ₀ 计算。 结果 磷酸川芎嗪与牛血清白蛋白、人血清白蛋白和人血浆、大鼠血浆的蛋白结合率分别为（ 79.51±1.66 ） % 、（ 68.34±1.43 ） % 、（ 56.17±1.44 ） % 和（ 70.97±2.19 ） % 。 结论 磷酸川芎嗪与血浆蛋白具有中等强度的结合,采用微透析进行血浆蛋白结合率研究可行。     

超滤法测定脱水穿心莲内酯的血浆蛋白结合率

目的:建立血浆中脱水穿心莲内酯的分析方法,测定脱水穿心莲内酯血浆蛋白结合率。方法:采用超滤法和高效液相法测定脱水穿心莲内酯在BSA、正常人血浆、大鼠血浆中的蛋白结合率。结果:脱水穿心莲内酯与BSA、正常人血浆、大鼠血浆中的蛋白结合率分别为(71.50±1.50)%,(79.91±2.51)%,(82.41±2.05)%。结论:脱水穿心莲内酯与血浆具有中等强度结合。     

超滤法测定丹酚酸A的血浆蛋白结合率

目的:建立血浆样品中丹酚酸A浓度的分析方法,并测定丹酚酸A的血浆蛋白结合率,为进一步展开丹酚酸A的代谢和药动学研究及指导临床用药提供参考。方法:采用超滤法和HPLC测定丹酚酸A在牛血清白蛋白(BSA),大鼠血浆,新西兰兔血浆和比格犬血浆中的蛋白结合率。结果:丹酚酸A在0.01～2.5 mg.L-1线性良好,标准曲线方程为Y=0.807 3X+0.013 2(r=0.999 4)。丹酚酸A与BSA,大鼠血浆,新西兰兔血浆和比格犬血浆在5.0,50.0,100.0 mg.L-1的含药血浆中其平均蛋白结合率分别为(99.79±0.02)%,(99.79±0.03)%,(99.73±0.06)%,(99.81±0.03)%。结论:所建立的方法灵敏度高,专属性和重复性好,操作简单,能够满足定量分析测试要求。丹酚酸A与血浆蛋白有很强的结合,且在已考察的血药浓度范围内其血浆蛋白结合率无明显浓度依赖性和种属差异性。     

平衡透析法测定大黄游离蒽醌大鼠血浆蛋白结合率的研究

目的:研究5种大黄游离蒽醌(FRAs)共存条件下的大鼠血浆蛋白结合率(PBR)。方法:以体外方式,用平衡透析法模拟5种大黄游离蒽醌体内与血浆蛋白结合的过程,并以高效液相色谱法测定低、中、高三个浓度混合大黄游离蒽醌在透析袋内血浆中的质量浓度与透析袋外缓冲液中的质量浓度,计算血浆蛋白结合率。结果:5种大黄游离蒽醌与大鼠血浆均呈现高蛋白结合率(>80%),且在实验浓度下,大黄酸和大黄素的血浆蛋白结合率与其浓度成反比,大黄素甲醚的血浆蛋白结合率与其浓度成正比。结论:5种大黄游离蒽醌成分间存在竞争性抑制,其竞争能力与化合物脂溶性和酸性有关。     

异亚丙基莽草酸血浆蛋白结合率的测定

目的:测定异亚丙基莽草酸的血浆蛋白结合率。方法:采用超滤法结合高效液相色谱法对异亚丙基莽草酸与犬血浆及人血浆的蛋白结合率进行测定。结果:异亚丙基莽草酸与犬血浆在0.3,0.15 g.L-1,0.5 mg.L-1下的血浆蛋白结合率分别为(4.36±0.02)%,(4.12±0.19)%,(2.23±0.59)%。异亚丙基莽草酸在以上3个浓度下与健康人血浆蛋白结合率分别为(11.23±0.01)%,(10.06±0.69)%,(9.72±0.59)%。结论:异亚丙基莽草酸与血浆蛋白的结合较弱。     

超滤法测定甲基原薯蓣皂苷的血浆蛋白结合率

目的：测定甲基原薯蓣皂苷的血浆蛋白结合率。方法：采用超滤法结合高效液相色谱-串联质谱联用法（HPLC-MS-MS）对甲基原薯蓣皂苷与大鼠血浆以及健康人血浆的蛋白结合率进行测定。结果：甲基原薯蓣皂苷与大鼠血浆在20.0，100，200 μg·mL^-1下的血浆蛋白结合率分别为（94.6±0.16）%，（91.6±0.35）%，（86.10±0.60）%。甲基原薯蓣皂苷在以上3个浓度下与健康人血浆的血浆蛋白结合率分别为(82.11±5.12)%，(84.54±0.32)% ，(88.52±1.02)%。结论：甲基原薯蓣皂苷与血浆蛋白具有较强的结合。     

超滤法测定牛蒡苷及牛蒡苷元的血浆蛋白结合率

目的:测定牛蒡苷及牛蒡苷元的血浆蛋白结合率.方法:采用超滤法结合高效液相色谱法对牛蒡苷及牛蒡苷元与大鼠血浆以及健康人血浆蛋白结合率进行测定.结果:牛蒡苷与大鼠血浆在64.29,32.14,16.07 mg·L-1-下的血浆蛋白结合率分别为(71.2±2.0)％,(73.4±0.61)％,(78.2±1.9)％,与健康人血浆的血浆蛋白结合率分别为(64.8±3.1)％,(64.5±2.5)％,(77.5±1.7)％;牛蒡苷元与大鼠血浆在77.42,38.71,19.36 mg·L-1下的血浆蛋白结合率分别为(96.7±0.41)％,(96.8±1.6)％,(97.3±0.46)％,与健康人血浆的血浆蛋白结合率分别为(94.7±3.1)％,(96.1±0.3)％,(97.9±1.3)％.结论:牛蒡苷与大鼠血浆蛋白有中等强度的结合,略高于与人血浆蛋白结合率;牛蒡苷元与大鼠血浆和健康人血浆均有很强的结合.     

红花黄色素粉针剂中羟基红花黄色素A血浆蛋白结合率的研究

目的 测定红花黄色素粉针剂中羟基红花黄色素A的血浆蛋白结合率.方法 采用超滤离心法除掉血浆蛋白,并用高效液相色谱法对低、中、高剂量静脉注射后的羟基红花黄色素A血药浓度进行测定.结果 低、中、高剂量羟基红花黄色素A的血浆蛋白结合率分别为77.22％、78.31％、78.10％.结论 羟基红花黄色素A血浆蛋白结合率较高,在静脉给予5～20 mg/kg范围内血浆蛋白结合率不具有质量浓度依赖性.     

马钱子生物碱血浆蛋白结合率的测定与比较

目的:测定马钱子总生物碱中主要有效成分马钱子碱和士的宁的血浆蛋白结合率,并与同浓度单成分的血浆蛋白结合率进行比较.方法:采用超滤法和高效液相色谱法对马钱子生物碱在大鼠血浆中的血浆蛋白结合率进行测定.结果.单成分的马钱子碱在0.520,1.300,2.600 mg·L-1下的血浆蛋白结合率分别为(65.60±3.01)%,(68.20±7.80)%,(59.58±3.78)%.单成分的士的宁在0.936,2.340,4.680 nag·L-1下的血浆蛋白结合率分别为(66.17±6.36)%,(67.10±2.52)%,(57.21±0.79)%.马钱子总生物碱中马钱子碱在0.519,1.288,2.607 nag·L-1下的血浆蛋白结合率分别为(62.19±2.45)%,(69.55±5.84)%,(61.76±3.68)%;马钱子总生物碱中士的宁在0.940,2.338,4.674 nag·L-1下的血浆蛋白结合率分别为(54.79±3.55)%,(57.13±4.49)%,(59.31±3.65)%.结论:马钱子碱和士的宁与血浆蛋白具有中等强度的结合,马钱子总生物碱中马钱子碱与同浓度单体相比,蛋白结合率差异不大;总碱中士的宁与同浓度单体相比,蛋白结合率有所降低.     

黄芩提取物中黄酮类成分血浆蛋白结合率的测定

目的:探讨黄芩提取物中黄酮类成分血浆蛋白结合率的测定法.方法:利用平衡透析法对大鼠血浆内药物浓度进行测定,以高丽槐素为内标,生物样本用甲醇沉淀蛋白预处理,采用HPIC法测定4种黄酮类成分在透析内、外液中的浓度.结果:在低、中、高3种浓度下,黄芩苷和汉黄芩苷的血浆蛋白结合率与给药浓度均呈负性关系;而汉黄芩素和千层纸素则呈现出非质量浓度依赖性,平均血浆蛋白结合率分别为(89.66±1.19)％和(88.56±1.87)％.结论:HPIC法测定具有简便、灵敏以及专属性高等特点,4种黄酮类成分在大鼠体外均有较高的血浆蛋白结合率.