环核苷酸对心肌细胞bFGF与TGFβ_1基因表达的调控初探

目的 :探讨环核苷酸 (ｃＡＭＰ/ｃＧＭＰ)对心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)与转化生长因子 β1基因表达调节中的作用 ,为心肌肥大的防治提供一定的理论依据。方法 :将Ｗｉｓｔａｒ乳鼠无血清培养 2 4ｈ的心肌细胞分为对照组、ｃＡＭＰ组 (8 ＢｒｏｍｏｃＡＭＰ 0 .1ｍｍｏｌ/Ｌ)、ｃＧＭＰ组 [加入一氧化氮 (ＮＯ)的供体硝普钠 1ｍｍｏｌ/Ｌ ,借此升高心肌细胞内ｃＧＭＰ浓度 ],并在 30ｍｉｎ、3ｈ、2 4ｈ、48ｈ、72ｈ等 5个时相点检测如下指标 :(1)细胞生长代谢活性 (ＭＴＴ法 ) ;(2 )ｂＦＧＦ和ＴＧＦβ1的ｍＲＮＡ表达 (原位…     

012 环核苷酸对心肌细胞bFGF与TGFβ1基因表达的调控初探

目的: 探讨环核苷酸(cAMP/cGMP)对心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与转化生长因子β1基因表达调节中的作用, 为心肌肥大的防治提供一定的理论依据. 方法: 将Wistar乳鼠无血清培养24 h的心肌细胞分为对照组、 cAMP组(8-BromocAMP 0.1 mmol/L)、 cGMP组[加入一氧化氮(NO)的供体硝普钠1 mmol/L, 借此升高心肌细胞内cGMP浓度], 并在30min、 3 h、 24 h、 48 h、 72 h等5个时相点检测如下指标: (1) 细胞生长代谢活性(MTT法); (2) bFGF和TGFβ1的mRNA表达(原位杂交技术)及其蛋白表达水平(免疫细胞化学技术). 结果: (1) 与对照组比较cAMP组细胞代谢活跃程度增加, 尤以72 h明显(P<0.05); cGMP组细胞代谢受抑制, 尤以48 h明显(P<0.05). (2) 与对照组比较, cAMP组主要分布在心肌细胞浆及细胞膜的bFGF mRNA及其蛋白和主要分布在胞浆的TGFβ1蛋白水平表达均降低, 尤其在24 h(P<0.05)和48 h(P<0.01); cGMP组bFGF mRNA及其蛋白和TGFβ1蛋白表达水平均降低, 尤其在24 h(P<0.05). (3) 3H-leu掺入实验提示cAMP使细胞内RNA及蛋白质合成增加, 而cGMP可抑制细胞内RNA及蛋白质合成; 3H-TdR掺入实验提示cAMP和cGMP对培养的心肌细胞数量无显著影响(P<0.05). 结论: cAMP浓度增高使培养的心肌细胞代谢活跃、 bFGF mRNA及其蛋白和TGFβ1表达明显增加; cGMP浓度增高却使培养的心肌细胞代谢抑制、 bFGF mRNA及其蛋白和TGFβ1蛋白表达下降, 从而提示环核苷酸在心肌细胞肥大信号调控中, 起着重要的作用.     

当归及阿魏酸钠对内皮细胞中TGFβ_1及bFGF表达的影响

目的 :检测高脂血清对内皮细胞中转化生长因子 β1(ＴＧＦβ1)、碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)表达的影响 ,并观察当归、阿魏酸钠的作用。方法 :实验分四组 ,即 :正常对照组 ;高脂血清损伤组 ;当归 高脂血清组 ;阿魏酸钠 高脂血清组。用培养人脐静脉内皮细胞 (ＥＣＶ3 0 4 )为研究对象 ,以高脂血清为损伤因子 ,观察当归及阿魏酸钠的作用。实验中用扫描电镜观察内皮细胞形态变化 ,用免疫细胞化学方法观测培养细胞中ＴＧＦβ1及ｂＦＧＦ的表达改变。结果 :高脂血清能明显使内皮细胞的超微结构受损。细胞表面干裂 ,有孔隙 ;微绒毛分布不…     

血液动力学超负荷患者心肌肥大时bFGF、TGFβ_1的变化

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)和转化生长因子 (ＴＧＦβ1)在容量或压力超负荷患者心肌肥大发病机理中的作用。方法 :本项研究心肌肥大病人 32例 ,均经二维超声心动图和病理组织学检查证实 :容量超负荷组 (ＶＧ)均系 16例风心病二尖瓣闭锁不全伴狭窄的人工瓣膜置换术病人的左室肥大心肌 ,平均年龄 2 8± 5 (2 4～ 5 0 )岁 ;压力超负荷组 (ＰＧ)系 16例先心病法乐氏四联征或三联征病人的右室肥大心肌 ,平均年龄 14± 6 (5～ 2 3)岁 ;正常的左、右心室心肌 (ＮＧ)各 5例 ,平均年龄 2 2± 4(18～ 2 8)岁 ;均系无心脏疾病的意外…     

血液动力学超负荷患者心肌肥大时bFGF、TGFβ_1的变化

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)和转化生长因子 (ＴＧＦβ1 )在容量或压力超负荷患者心肌肥大发病机制中的作用。方法 :本项研究心肌肥大病人 32例 ,均经二维超声心动图和病理组织学检查证实 :容量超负荷组 (ＶＧ)均系风心病二尖瓣闭锁不全伴狭窄的人工瓣膜置换术病人 1 6例的左室肥大心肌 ,平均年龄 2 8± 5( 2 4～ 50 )岁 ,压力超负荷组 (ＰＧ)系先心病法乐氏四联征或三联征病人 1 6例的右室肥大心肌 ,平均年龄 1 4± 6( 5～ 2 3)岁 ,正常的左、右心室心肌 (ＮＧ)各 5例 ,平均年龄 2 2± 4( 1 8～ 2 8)岁 ,均系无心脏疾病的…     

肺泡Ⅱ型TGFβ_1和PDGF基因表达及其在肺纤维化中的意义

目的 :研究转化生长因子 β1(TGFβ1)和血小板源性生长因子 (PDGF)在肺泡Ⅱ型细胞中的表达及其在肺纤维化过程中的意义。方法 :分离培养正常成年大鼠肺泡Ⅱ型细胞 ,建立大鼠矽肺模型 ,用原位杂交和免疫组化技术检测体外培养的和矽肺病变中的肺泡Ⅱ型细胞TGFβ1和PDGF BmRNA和蛋白的表达。结果 :(1)体外培养的肺泡Ⅱ型细胞免疫组化染色TGFβ1强阳性 ,PDGF B弱阳性 ;原位杂交TGFβ1和PDGF BmRNA均为阳性。 (2 )大鼠矽肺实验组增生的肺泡Ⅱ型细胞明显表达TGFβ1和PDGF BmRNA和蛋白 ;对照组仅有部分正常肺泡Ⅱ型细胞TGFβ1mRNA呈弱阳性。结论 :增生的肺泡Ⅱ型细胞有TGFβ1和PDGF B基因表达 ,其在矽肺纤维化病变中可能起重要作用。     

TGF—β与细胞周期调控的研究进展

转化生长因子 β(TGF β)对上皮细胞的增殖抑制作用是它重要的生物学功能之一 ,对细胞周期的阻滞是它抑制细胞增殖的重要机制。TGF β可以调节细胞周期素 (cyclin)、细胞周期素依赖激酶 (CDK)、细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子 (CKI)以及c myc的表达水平及功能状态 ,使大量pRB去磷酸化而活化 ,活化的 pRB结合并抑制大量生长因子 ,导致细胞G1期阻滞。肿瘤细胞中细胞周期蛋白基因的突变或缺失是细胞对TGF β不应答的重要原因。     

043 当归及阿魏酸钠对内皮细胞中TGFβ1及bFGF表达的影响

目的: 检测高脂血清对内皮细胞中转化生长因子β1(TGFβ1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响, 并观察当归、阿魏酸钠的作用. 方法: 实验分四组, 即: 正常对照组; 高脂血清损伤组; 当归+高脂血清组; 阿魏酸钠+高脂血清组. 用培养人脐静脉内皮细胞(ECV304)为研究对象, 以高脂血清为损伤因子, 观察当归及阿魏酸钠的作用. 实验中用扫描电镜观察内皮细胞形态变化, 用免疫细胞化学方法观测培养细胞中TGFβ1及bFGF的表达改变. 结果: 高脂血清能明显使内皮细胞的超微结构受损. 细胞表面干裂, 有孔隙; 微绒毛分布不规则, 减少甚至消失. 细胞中TGFβ1的表达明显增高, 而bFGF的表达降低. 结论: 当归及阿魏酸钠对内皮细胞TGFβ1、 bFGF表达的影响可能为其抗动脉粥样硬化的机理之一; 阿魏酸钠可能为当归的有效成分之一.     

bFGF促进内皮细胞β_1整合素表达及其意义探讨

目的 :观察碱性成纤维细胞生长因子对血管内皮细胞 β1整合素表达的影响。方法 :采用WesternBlot法结合图像处理分析 ,检测bFGF作用前后培养血管内皮细胞 β1整合素的表达。结果 :bFGF处理组和对照组平均灰度值分别为 16 6 11± 9 86和 175 32± 5 12 ,两组免疫酶显色有显著差异。结论 :bFGF能够诱导内皮细胞膜表面β1整合素合成增加。推测bFGF通过上调内皮细胞 β1整合素表达 ,可能在促进血管生成方面有重要作用。     

TGFβ,ago基因与细胞周期调控

细胞周期是单个真核细胞生长和分裂成子细胞的过程,也是多阶段、多因子参与的精确而有序的调控过程(见图1)[1].细胞增殖是通过细胞周期实现的,癌细胞是细胞增殖失去正常调控的结果,所以研究如何控制癌细胞的增殖就必须深入地探讨癌细胞周期是如何调控的.     

丹参涂膜剂对肥厚性瘢痕细胞因子TGF-β_1、bFGF的影响

目的:通过丹参涂膜剂用于移植人体肥厚性瘢痕裸鼠模型,以观察对瘢痕内细胞因子TGF-β1和bFGF的影响,探讨丹参活血化瘀中药抗肥厚性瘢痕的作用机制,为临床中医预防和治疗瘢痕用药提供实验依据。方法:制作丹参涂膜剂,用于移植人体肥厚性瘢痕裸鼠模型,免疫组化EnVision法检测细胞因子TGF-β1、bFGF的表达。结果:丹参涂膜剂可促使瘢痕组织内细胞因子TGF-β1的表达明显下降,可增强瘢痕组织内细胞因子bFGF的表达。结论:丹参活血化瘀中药具有抑制瘢痕组织内细胞因子TGF-β1的表达和增强瘢痕组织内细胞因子bFGF的表达,从而具有抑制瘢痕的作用。     

多发性硬化患者血清TGF←β_1的检测及其临床意义

目的 :探讨转化生长因子 β1(TGF β1)在多发性硬化 (MS)发生、发展中的作用。方法 :采用酶联免疫吸附ELISA方法 ,对 45例MS患者血清TGF β1的含量进行了测定。结果 :与对照组和NIND组相比 ,MS患者血清TGF β1含量明显下降 (P <0 0 1) ;与StableMS组相比 ,RRMS组和CPMS组TGF β1含量亦明显下降 (P <0 0 5 ) ;动态观察显示 ,随着病情的好转 ,TGF β1含量亦逐渐升高。结论 :血清中TGF β1的检测对判断MS患者的病情变化具有重要的临床实用价值。     

正、反义TGFβ_1逆转录病毒载体的构建及鉴定

ＴＧＦβ１对肝纤维化起着明确作用，其在肝癌中的作用受到重视。以逆转录病毒作为介导基因转移的载体是目前广泛使用在基础和临床应用研究中的基因转移方法，国外学者构建的逆转录病毒载体较多，其中Ｍｉｌｅｒ教授所构建的系列载体受到大家一致公认［１］。本文报告我们...     

013 血液动力学超负荷患者心肌肥大时bFGF、 TGFβ1的变化

目的: 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子(TGFβ1)在容量或压力超负荷患者心肌肥大发病机理中的作用. 方法: 本项研究心肌肥大病人32例, 均经二维超声心动图和病理组织学检查证实: 容量超负荷组(VG)均系16例风心病二尖瓣闭锁不全伴狭窄的人工瓣膜置换术病人的左室肥大心肌, 平均年龄28±5(24～50)岁; 压力超负荷组(PG)系16例先心病法乐氏四联征或三联征病人的右室肥大心肌, 平均年龄14±6(5～23)岁; 正常的左、右心室心肌(NG)各5例, 平均年龄22±4(18～28)岁; 均系无心脏疾病的意外死亡者. 采用免疫组织化学及原位杂交技术结合彩色图像分析技术对VG和PG心肌肥大病人的心室乳头肌组织中bFGF、 TGFβ1的mRNA及其蛋白水平进行测定并与正常人心室乳头肌组织对照: 以HE染色及天狼星红染色分别检查肌细胞肥大和基质胶原Ⅰ、Ⅲ型变化情况. 结果: (1) 心肌纤维增粗、体积增大、排列紊乱, 细胞间质胶原纤维明显增多, 尤其Ⅲ型胶原增加更突出; (2) VG或PG病人的心肌肥大中bFGF和TGFβ1的mRNA表达及其蛋白水平均显著增加. 结论: (1) 容量或压力超负荷导致心肌重构(remodeling). 病理组织学研究的结果表明, 无论容量或压力超负荷均引起心肌细胞肥大, 即体积增加和细胞排列方向改变; 细胞间质胶原纤维, 尤其以Ⅲ型胶原纤维增加更明显, 这就是心肌对血液动力学超负荷的适应性重构. (2) bFGF和TGFβ1在心肌重构中的作用在血液动力学超负荷情况下, bFGF以自分泌及/或旁分泌方式, 亦可以通过胞内分泌的方式核转位直接发挥其基因调控作用, 最终导致心肌细胞肥大; TGFβ1是成纤维细胞的强效趋化因子, 能明显促进成纤维细胞对胶原及纤维连接蛋白合成, 同时对新合成基质的降解有明显的抑制作用, 从而使胶原纤维明显增加.     

TGF-β基因表达调控的新进展

许多纤维化疾病同I型胶原基因表达异常相关。TGF β信号通路在I型胶原基因表达调控中起重要作用 ,TGF β信号通路自身受许多正性、负性调节因子调控。     

cAMP、cGMP在大鼠心肌细胞bFGF基因表达调节中的作用

目的:研究cAMP、cGMP在心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达调节中的作用。方法:分离培养大鼠心肌细胞,加入8-溴-cAMP和硝普钠,升高细胞内cAMP、cGMP浓度,用原位杂交及免疫细胞化学的方法观察细胞内bFGF的表达,图象分析检测bFGF表达量的变化。结果:在培养中加8-溴-cAMP的心肌细胞,24h时bFGFmRNA及蛋白表达均明显高于对照组,48h、72h仍然较强表达(P＜0.05)。而加硝普钠的心肌细胞,bFGF表达明显低于对照组,以48h最为显著(P＜0.01)。结论:cAMP、cGMP可能与心肌细胞bFGF的表达调节有关。     

cAMP,cGMP在大鼠心肌细胞bFGF基因表达调节中的 …

目的：研究ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ在心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达调节中的作用。方法：分离培养大鼠心肌细胞，加入８－溴－ｃＡＭＰ的硝普钠，升高细胞内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ浓度，用原位杂交及免疫细胞化学的方法观察细胞内ｂＦＧＦ的表达，图象分析检测ｂＦＧＦ表达量的变化。结果：在培养中加８－溴－ｃＡＭＰ的心肌细胞，２４ｈ时ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ及蛋白表达均明显高于对照组，４８ｈ、７２ｈ仍然较强表达     

肺泡Ⅱ型TGFβ1和PDGF基因表达及其肺纤维化中的意义

目的：研究转化生长因子β1（TGFβ1）和血小板源性生长因子（PDGF）在肺泡Ⅱ型细胞中的表达及其在肺纤维化过程中的意义。方法：分离培养正常成年大鼠肺泡Ⅱ型细胞,建立大鼠矽肺模型,用原位杂交和免疫组化技术检测体外培养的和矽肺病变中的肺泡Ⅱ型细胞TGFβ1和PDGF-B mRNA和蛋白的表达。结果：（1）体外培养的肺泡Ⅱ型细胞免疫组化染色TGFβ1强阳性,PDGF-B弱阳性;原位杂交TGFβ1和PDGF-B mRNA均为阳性。（2）大鼠矽肺实验组增生的肺泡Ⅱ型细胞明显表达TGFβ1和PDGF-B mRNA和蛋白;对照组仅有部分正常肺泡Ⅱ型细胞TGFβ1 mRNA呈弱阳性。结论：增生的肺泡Ⅱ型细胞有TGFβ1和PDGF-B基因表达,其在矽肺纤维化病变中可能起重要作用。