012 环核苷酸对心肌细胞bFGF与TGFβ1基因表达的调控初探

目的: 探讨环核苷酸(cAMP/cGMP)对心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与转化生长因子β1基因表达调节中的作用, 为心肌肥大的防治提供一定的理论依据. 方法: 将Wistar乳鼠无血清培养24 h的心肌细胞分为对照组、 cAMP组(8-BromocAMP 0.1 mmol/L)、 cGMP组[加入一氧化氮(NO)的供体硝普钠1 mmol/L, 借此升高心肌细胞内cGMP浓度], 并在30min、 3 h、 24 h、 48 h、 72 h等5个时相点检测如下指标: (1) 细胞生长代谢活性(MTT法); (2) bFGF和TGFβ1的mRNA表达(原位杂交技术)及其蛋白表达水平(免疫细胞化学技术). 结果: (1) 与对照组比较cAMP组细胞代谢活跃程度增加, 尤以72 h明显(P<0.05); cGMP组细胞代谢受抑制, 尤以48 h明显(P<0.05). (2) 与对照组比较, cAMP组主要分布在心肌细胞浆及细胞膜的bFGF mRNA及其蛋白和主要分布在胞浆的TGFβ1蛋白水平表达均降低, 尤其在24 h(P<0.05)和48 h(P<0.01); cGMP组bFGF mRNA及其蛋白和TGFβ1蛋白表达水平均降低, 尤其在24 h(P<0.05). (3) 3H-leu掺入实验提示cAMP使细胞内RNA及蛋白质合成增加, 而cGMP可抑制细胞内RNA及蛋白质合成; 3H-TdR掺入实验提示cAMP和cGMP对培养的心肌细胞数量无显著影响(P<0.05). 结论: cAMP浓度增高使培养的心肌细胞代谢活跃、 bFGF mRNA及其蛋白和TGFβ1表达明显增加; cGMP浓度增高却使培养的心肌细胞代谢抑制、 bFGF mRNA及其蛋白和TGFβ1蛋白表达下降, 从而提示环核苷酸在心肌细胞肥大信号调控中, 起着重要的作用.