基于TLR4/NF-κB信号通路探讨银杏二萜内酯对糖尿病大鼠视网膜病变的影响

[目的]研究银杏二萜内酯（GDL）对糖尿病大鼠视网膜病变的影响,并基于Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路探索其可能的作用机制。[方法]采用高糖高脂饮食加腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素（STZ）的方法构建糖尿病视网膜病变大鼠模型,设模型组、GDL(2.3 mg/kg)组、TAK242(TLR4抑制剂,3 mg/kg)组、GDL+TAK242(2.3 mg/kg+3 mg/kg)组;另设正常对照组。各组分别每日1次腹腔注射给药治疗14 d后,测定空腹血糖（FBG）水平、视网膜厚度和视网膜血管通透性,通过苏木精-伊红（HE）染色、TUNEL染色观察视网膜病理改变和细胞凋亡,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测视网膜炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]含量,Western blot法检测视网膜TLR4、NF-κB、p-NF-κB、NF-κB抑制因子（IκBα）、p-IκBα、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达。[结果]与模型组相比,GD...     

三七总皂苷对自然衰老大鼠睾丸炎症反应和生殖细胞凋亡的影响北大核心CSCD

目的探讨三七总皂苷(PNS)对自然衰老大鼠睾丸炎症反应和生殖细胞凋亡的影响。方法将SPF级SD大鼠随机分为9月龄组(9M),24月龄组(24M),PNS低、中、高剂量组,每组10只。大鼠从18个月开始,PNS低、中、高剂量组分别灌胃给予PNS 10,30,60 mg·kg^(-1),灌胃至24个月,每周灌胃6 d,周日停1 d,连续灌胃6个月。末次给药并禁食不禁水12 h后,处死大鼠,迅速取出睾丸组织。苏木精-伊红(HE)染色法观察睾丸组织形态学变化,Western Blot检测睾丸组织中P21^(WAF1/CIP1)(P21)、核转录因子(NF-κB)以及下游炎症因子白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧化酶2(COX2)蛋白的表达和凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)的表达,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸生殖细胞凋亡。结果 HE染色观察发现,与9M比较,24M大鼠睾丸生精小管形态结构发生明显变化,生精细胞层数减少,细胞稀疏,各级生精细胞脱落。与24M比较,PNS低、中、高剂量组均能在一定程度上改善睾丸组织生精小管结构形态。与9M比较,24M大鼠睾丸组织P21、NF-κB及其下游炎症因子IL-1β、TNF-α、COX2的表达显著上调(P<0.01),PNS低、中、高剂量组可显著下调其表达(P<0.05,P<0.01)。24M大鼠睾丸组织抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著降低(P<0.01),促凋亡蛋白Bax显著升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.01),PNS可显著升高Bcl-2的表达,降低Bax的表达,升高Bcl-2/Bax比值(P<0.05,P<0.01);与9M比较,24M大鼠睾丸内凋亡阳性细胞数显著增多,PNS低、中、高剂量组可明显减少凋亡的阳性细胞数。结论 PNS能够抑制自然衰老大鼠睾丸炎症反应,显著减少睾丸生殖细胞凋亡。     

红景天苷对急性心肌梗死大鼠心肌相关凋亡因子及Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的影响

目的：探讨红景天苷对急性心肌梗死（AMI） 大鼠心肌相关凋亡因子及B 淋巴细胞瘤-2 基因（Bcl-2）、Bcl-2 相关X 蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3） 表达的影响。方法：75 只健康SPF 级SD 大鼠,随机选择10 只作为假手术组,仅进行开胸、缝合处理;剩余65 只采用冠脉结扎诱导建立大鼠AMI 模型,剔除不合格模型后共有50 只标准大鼠AMI 模型,随机分为模型组、阳性对照组及红景天苷低、中、高剂量组,每组10 只。阳性对照组按10 mg/kg 的剂量给予卡维地洛;红景天苷低、中、高剂量组分别按12、24、36 mg/kg 的剂量给予红景天苷,均溶于10 mL 生理盐水灌胃给药;假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃。模型制备成功后次日开始灌胃,持续8 周。原位末端凋亡检测（TUNEL） 法检测心肌细胞凋亡情况,苏木精-伊红（HE） 染色法测定梗死面积,BCA 法测定Bcl-2、Bax、Caspase-3 蛋白表达,荧光定量PCR 法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 相对表达。结果：与假手术组比较,模型组大鼠心肌细胞凋亡指数（AI）、心肌梗死面积、Bax、Caspase-3蛋白及mRNA 相对表达均增加（P＜0.05）,Bcl-2 蛋白及mRNA 相对表达均降低（P＜0.05）。与模型组比较,阳性对照组及红景天苷低、中、高剂量组大鼠心肌细胞AI、心肌梗死面积、Bax、Caspase-3 蛋白及mRNA 相对表达均降低（P＜0.05）,Bcl-2 蛋白及mRNA 相对表达均升高（P＜0.05）。与阳性对照组比较,红景天苷低、中剂量组大鼠心肌细胞AI、心肌梗死面积、Bax、Caspase-3 蛋白及mRNA 相对表达升高（P＜0.05）;Bcl-2 蛋白及mRNA 相对表达降低（P＜0.05）。结论：红景天苷可通过下调Bax、Caspase-3 的表达,上调Bcl-2 的表达,来减少细胞凋亡,缩小大鼠AMI 模型梗死面积。     

三七总皂苷对自然衰老大鼠睾丸炎症反应和生殖细胞凋亡的影响

目的探讨三七总皂苷(PNS)对自然衰老大鼠睾丸炎症反应和生殖细胞凋亡的影响。方法将SPF级SD大鼠随机分为9月龄组(9M),24月龄组(24M),PNS低、中、高剂量组,每组10只。大鼠从18个月开始,PNS低、中、高剂量组分别灌胃给予PNS 10,30,60 mg·kg~(-1),灌胃至24个月,每周灌胃6 d,周日停1 d,连续灌胃6个月。末次给药并禁食不禁水12 h后,处死大鼠,迅速取出睾丸组织。苏木精-伊红(HE)染色法观察睾丸组织形态学变化,Western Blot检测睾丸组织中P21~(WAF1/CIP1)(P21)、核转录因子(NF-κB)以及下游炎症因子白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧化酶2(COX2)蛋白的表达和凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)的表达,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸生殖细胞凋亡。结果 HE染色观察发现,与9M比较,24M大鼠睾丸生精小管形态结构发生明显变化,生精细胞层数减少,细胞稀疏,各级生精细胞脱落。与24M比较,PNS低、中、高剂量组均能在一定程度上改善睾丸组织生精小管结构形态。与9M比较,24M大鼠睾丸组织P21、NF-κB及其下游炎症因子IL-1β、TNF-α、COX2的表达显著上调(P0.01),PNS低、中、高剂量组可显著下调其表达(P0.05,P0.01)。24M大鼠睾丸组织抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著降低(P0.01),促凋亡蛋白Bax显著升高(P0.05),Bcl-2/Bax比值显著降低(P0.01),PNS可显著升高Bcl-2的表达,降低Bax的表达,升高Bcl-2/Bax比值(P0.05,P0.01);与9M比较,24M大鼠睾丸内凋亡阳性细胞数显著增多,PNS低、中、高剂量组可明显减少凋亡的阳性细胞数。结论 PNS能够抑制自然衰老大鼠睾丸炎症反应,显著减少睾丸生殖细胞凋亡。     

红芪总黄酮对离心运动大鼠骨骼肌细胞NF-κB信号通路相关凋亡蛋白表达的影响

目的:探讨红芪总黄酮对离心运动大鼠骨骼肌细胞NF-κB信号通路相关凋亡蛋白表达的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠随机分为3组:安静对照组(CG)、离心运动组(EG)和离心运动+药物预处理组(DPG),每组8只。DPG组在离心运动前3 d给予红芪总黄酮灌胃,CG组、EG大鼠给予等量生理盐水灌胃。EG组、DPG组大鼠均采用恒定速度20 m/min,-16°下坡跑台离心运动,持续运动至力竭。RT-qPCR法检测骨骼肌细胞核转录因子kappa B(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,bcl-2)、Bcl-2相关X基因(Bcl-2 Associated X Protein,bax)、细胞色素C(cyt c)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)mRNA表达的影响,Western blotting法检测骨骼肌细胞pNF-κB、Bcl-2、Bax、Cyt c、Caspase-3蛋白的表达,TUNEL法检测骨骼肌细胞凋亡率。结果:EG组和DPG组NF-κB、Bax、Cyt c、Caspase-3 mRNA和蛋白的表达明显高于CG组(P<0.05),DPG组及EG组的Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著低于CG组(P<0.05),Bcl-2/Bax比值也显著低于CG组(P<0.05);与EG组比较,DPG组NF-κB、Bax、Cyt c、Caspase-3 mRNA和蛋白的表达明显降低(P<0.05),DGP组的Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著高于EG组(P<0.05),DGP组Bcl-2/Bax比值较EG组也显著增高(P<0.05)。TUNEL染色结果显示,与CG组比较,EG组、DPG组大鼠骨骼肌细胞凋亡指数显著升高(P<0.01);与EG组比较,DPG组大鼠骨骼肌细胞凋亡指数明显降低(P<0.05)。结论:一次离心力竭运动可激活大鼠骨骼肌细胞NF-κB信号分子,启动细胞的凋亡程序;红芪总黄酮能够降低高强度运动引发的应激反应,从而延缓离心运动后骨骼肌疲劳和损伤的发生,其机制可能与降低骨骼肌组织NF-κB、Bcl-2/Bax、Cyt c、Caspase-3表达水平、抑制骨骼肌细胞凋亡有关。     

脑泰通组方对局灶性脑缺血再灌注大鼠模型的影响及保护机制

目的：观察脑泰通组方对局灶性脑缺血再灌注大鼠模型的影响及保护机制。方法：构建局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,成模后随机分为模型对照组、阳性药物组、中药组、联合用药组,另选取健康斯泼累格·多雷（SD）大鼠作为假手术组。观察并评估各组大鼠的美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分、脑组织含水量、脑梗死体积百分比,免疫组织化学法检测脑组织Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）的平均光密度值,蛋白质免疫印迹法、实时定量PCR（QT-PCR）检测脑组织叉头框转录因子3a（FoxO3a）基因、低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、核因子κB（NF-κB）、脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白及mRNA的表达水平。结果：与假手术组比较,模型对照组NIHSS评分,脑组织含水量,脑组织缺血体积百分比,脑组织FoxO3a、HIF-1α、NF-κB、BDNF蛋白和mRNA的表达水平,Bax、Bcl-2平均光密度值以及Bax/Bcl-2值均显著升高（均P<0.05）;与模型对照组比较,药物干预各组的NIHSS评分、脑组织含水量、脑梗死体积百分比、Bax平均光密度值、Bax/Bcl-2值、脑组织NF-κB蛋白和mRNA的表达水平显著降低（均P<0.05）,其中联合用药组的降低程度最大（均P<0.05）,Bcl-2平均光密度值,脑组织FoxO3a、HIF-1α、BDNF蛋白和mRNA的表达水平显著升高（均P<0.05）,其中联合用药组的升高程度最大（均P<0.05）。结论：脑泰通组方能有效保护局灶性脑缺血再灌注大鼠模型脑组织损伤,改善局部脑缺血,其作用机制可能与脑泰通组方调控FoxO3a/HIF-1α/NF-κB信号通路相关。     

血必净注射液通过调控p38 MAPK/NF-κB通路对百草枯中毒大鼠急性肺损伤保护作用的研究

目的观察血必净注射液通过调控p38 MAPK/NF-κB通路对百草枯中毒大鼠急性肺损伤的保护作用。方法选取SPF级Wistar雄性大鼠,分为5组,除正常组外,其他各组大鼠一次性灌胃百草枯(PQ)溶液染毒。染毒1 h后血必净低、中、高剂量组大鼠分别经尾巴静脉注射含生药0.43、0.86、1.72 g/kg的血必净注射液2 mL,模型组和正常组大鼠注射等剂量0.9%氯化钠注射液。观察大鼠饮食、活动、病理状况,肺组织Bax、Bcl-2和p38-MAPK蛋白及NF-κB及IκB mRNA相对表达量。结果与正常组相比,模型组大鼠肺组织内Bax及Bcl-2蛋白表达上升;与模型组相比,血必净中、高剂量组大鼠肺组织内Bax蛋白表达下降,Bcl-2蛋白表达上升,差异有统计学意义(P 0.05);与正常组相比,模型组大鼠NF-κB m RNA、p38-MAPK蛋白表达上升,IκB mRNA表达下降;和模型组相比,血必净中、高剂量组大鼠NF-κB m RNA、p38-MAPK蛋白表达下降,IκB mRNA表达上升,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论血必净注射液通过调控p38 MAPK/NF-κB通路,降低PQ中毒大鼠炎症反应程度,对受损肺组织起到保护作用。     

痰瘀同治方对心肌缺血再灌注损伤大鼠核因子-κB通路及心肌自噬、凋亡的影响

目的观察痰瘀同治方对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠核因子(NF)-κB通路及心肌自噬、凋亡的影响,探讨该方抗MI/RI作用机制。方法 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)干预组及痰瘀同治组。可逆性冠脉左前降支结扎缺血30 min、再灌注2 h复制MI/RI模型。造模前,痰瘀同治组每日予痰瘀同治方水煎液灌胃,其他各组给予生理盐水灌胃,连续3周。RT-PCR检测各组大鼠心肌NF-κB、自噬基因Beclin-1表达,Western blot检测心肌促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠心肌NF-κB、Beclin-1 m RNA及Bax蛋白表达均显著增强,且Bcl-2蛋白降低(均P0.01);与模型组比较,痰瘀同治组能抑制再灌注后NF-κB、Beclin-1 m RNA及Bax蛋白高表达(均P0.01),且作用与PDTC干预组相当(P0.05),痰瘀同治组能显著上调心肌Bcl-2表达,且作用优于PDTC干预组(P0.01)。结论痰瘀同治方通过抑制NF-κB活化,改善心肌细胞凋亡,抑制自噬而达到保护心肌的作用。     

参芪止血胶囊对大鼠增生型子宫内膜Bcl-2,Bax表达的影响

目的：观察参芪止血胶囊（SQZC）对大鼠增生型子宫内膜中凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax表达的影响,探讨其治疗功能性子宫出血病的作用机制。方法：以乙烯雌酚（1 mg/kg）给大鼠灌胃,连续10天,建立大鼠子宫内膜增生模型。造模后大鼠随机分为模型对照组,参芪止血胶囊高、中、低剂量组（360,180,90 mg/kg）,连续给药14天。采用免疫组化SP法检测各组大鼠子宫内膜中Bcl-2和Bax的表达水平。结果：SQZC各剂量组子宫内膜中Bax的表达水平均明显高于模型对照组（P〈0.05）,与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;SQZC各剂量组Bcl-2表达水平均明显低于模型对照组（P〈0.05）,SQZC高、中剂量组与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：SQZC对大鼠子宫内膜Bcl-2和Bax的表达有调节作用。     

加味小陷胸汤基于核因子-κB信号通路对非小细胞肺癌荷瘤小鼠的影响实验研究

目的:探讨加味小陷胸汤基于核因子κB(NF-κB)信号通路对非小细胞肺癌荷瘤小鼠的影响。方法:选取SPF级健康雄性C57BL/6小鼠75只,分为对照组15只和造模组60只。造模组采用人非小细胞肺癌A549细胞株右腋下接种建立非小细胞肺癌荷瘤模型,对照组给予等量生理盐水右腋下皮下注射。造模成功后,将造模组小鼠随机分为模型组、加味小陷胸汤低、高浓度组及顺铂组,各15只。模型组和对照组分别予以无菌生理盐水5 ml/kg,腹腔注射,1次/d +蒸馏水5 ml/kg,灌胃,1次/d; 加味小陷胸汤低、高浓度组分别予以无菌生理盐水5 ml/kg,腹腔注射,1次/d +8 mg/ml、16 mg/ml加味小陷胸汤药液5 ml/kg,灌胃,1次/d; 顺铂组予以0.4 mg/ml顺铂溶液5 ml/kg,腹腔注射,1次/d +蒸馏水5 ml/kg,灌胃,1次/d。所有小鼠均连续给药14 d。对小鼠肿瘤体积、瘤重和生长抑制率、肿瘤组织细胞凋亡率、肿瘤组织含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、NF-κB、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平进行检测。结果:治疗后,与模型组比较,各组小鼠肿瘤体积、瘤重较低,肿瘤组织NF-κB、Bcl-2表达水平较低,且加味小陷胸汤低浓度组>加味小陷胸汤高浓度组和顺铂组,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,各组小鼠肿瘤生长抑制率较高,肿瘤组织细胞凋亡率较高,肿瘤组织Bax、Caspase-3表达水平较高,且加味小陷胸汤低浓度组<加味小陷胸汤高浓度组和顺铂组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:加味小陷胸汤能剂量依赖性抑制非小细胞肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长,促进肿瘤细胞凋亡,其作用可能与抑制NF-κB信号通路,调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达有关。     

黄芪预处理对大鼠肠系膜缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响及其机制研究

目的:研究黄芪预处理对大鼠肠系膜缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:选取120只实验用大鼠随机分假手术组、模型组、银杏叶提取物(3.15 mg/kg)预处理组与黄芪(5、10和20 g/kg)预处理组;术前7天开始腹腔注射给药(1次/d),假手术组和模型组给予等体积生理盐水。采用剥离并夹闭肠系膜上动脉45min的方法建立大鼠肠系膜缺血再灌注损伤模型;再灌注2 h后,测定肠组织含水量,TUNEL法观察肠系膜细胞凋亡状况并计算凋亡指数(Apoptosis Index,AI);RT-PCR法测定肠组织中AKT m RNA、Bcl-2 m RNA、Bax m RNA表达;测定肠组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性与丙二醛(MDA)含量,Western blot法测定肠组织中NF-κB蛋白表达并进行半定量分析。结果:与模型组比较,黄芪(10、20 g/kg)预处理组大鼠肠组织含水量显著降低;黄芪预处理组大鼠肠细胞凋亡状况较模型组均明显改善,其中10、20 g/kg预处理组AI显著降低;黄芪(10、20 g/kg)预处理组大鼠肠组织中Bcl-2 m RNA表达显著升高而Bax m RNA显著降低、Bcl-2/Bax比值显著升高,SOD和CAT活性显著升高、MDA含量显著降低,NF-κB蛋白表达显著上调;黄芪(20g/kg)预处理组AKT m RNA表达显著升高;上述差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:黄芪预处理可能通过调节凋亡相关基因(AKT、Bcl-2、Bax)和蛋白(NF-κB)表达而对肠系膜缺血再灌注损伤后细胞凋亡具有一定的抑制作用。     

三七总皂苷与淫羊藿总黄酮联合对自然衰老大鼠睾丸生殖功能衰退的影响

目的观察三七总皂苷(PNS)与淫羊藿总黄酮(TFE)联合对自然衰老大鼠睾丸生殖功能衰退的影响,探讨其作用机制。方法将30只18月龄SD大鼠随机分为自然衰老组和PNS+TFE低、高剂量组,每组10只。另取10只2月龄大鼠为青年对照组。PNS+TFE低、高剂量组大鼠分别给予10 mg/kg PNS、TFE和20 mg/kg PNS、TFE灌胃,自然衰老组和青年对照组大鼠给予生理盐水灌胃。每周连续给药6 d,共4个月。末次给药后24 h,大鼠称重后处死,取睾丸组织,称取质量,计算睾丸指数。HE染色观察睾丸组织形态,TUNEL法检测大鼠生殖细胞凋亡,Western blot检测睾丸组织抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax和DNA损伤蛋白γ-H2AX的表达。结果与自然衰老组比较,PNS+TFE低、高剂量组衰老大鼠睾丸质量和睾丸指数均明显升高,生精小管组织形态明显改善,睾丸生精细胞凋亡数量明显减少,睾丸组织Bcl-2蛋白表达显著上调,Bax和γ-H2AX蛋白表达显著下调,Bax/Bcl-2比值降低。结论 PNS与TFE联合给药可延缓自然衰老大鼠生殖功能衰退,其机制可能与抑制睾丸生殖细胞的凋亡和DNA损伤有关。     

天麻素对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠TLR4/NF-κB信号通路影响的研究

目的:探讨天麻素对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠的脑保护作用及其作用机制。方法:72只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、天麻素组、Toll样受体4 (TLR4)激活剂脂多糖(LPS)组、天麻素+LPS组,每组12只。采用腹腔注射毛果芸香碱建立癫痫大鼠模型。双抗体夹心酶联免疫法检测大鼠血清和海马组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-1β(IL-1β)水平,TUNEL染色法检测海马组织细胞凋亡数,Western blot分别检测海马组织活化半胱氨酸基天冬氨酸酶-3 (CleavedCaspase-3)、B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、兔抗大鼠p-核因子-κB亚基p65亲和肽(p-NF-κBp65)和磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκB-α)表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠脑电频率显著降低(P<0.05),波幅显著升高(P<0.05);血清和海马组织TNF-α和IL-1β水平,海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4和p-NF-κBp65蛋白明显升高(P<0.05);IL-10水平,Bcl-2和p-IκB-α蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,阳性药组、天麻素组和天麻素+LPS大鼠脑电频率显著升高(P<0.05),波幅显著降低(P<0.05),血清和海马组织TNF-α和IL-1β水平,海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4和p-NF-κBp65蛋白明显降低(P<0.05),IL-10水平,Bcl-2和p-IκB-α蛋白表达显著升高(P<0.05);LPS组大鼠脑电频率、血清及海马组织IL-10水平、Bcl-2蛋白显著降低(P<0.05),血清与海马组织TNF-α与IL-1β水平、海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4、p-NF-κBp65和p-IκB-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。与LPS组比较,天麻素+LPS组大鼠脑电频率显著升高(P<0.05),波幅显著降低(P<0.05);血清及海马组织TNF-α与IL-1β水平、海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4、p-NF-κBp65蛋白表达均明显降低(P<0.05),IL-10水平、Bcl-2及p-IκB-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:天麻素可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠发挥脑保护作用。     

竹节参总皂苷通过调节AMPK/Sirt1/NF-κB通路抑制衰老大鼠心肌细胞凋亡的作用研究

研究竹节参总皂苷(saponins extracted from Panax japonicus,SPJ)对自然衰老大鼠心肌细胞凋亡的调节作用及其作用机制。将SD雄性大鼠随机分为青年对照组、自然衰老组、SPJ低剂量组、SPJ高剂量组,每组10只。自然衰老组、SPJ低、高剂量组从18月龄开始分别灌胃给予生理盐水、SPJ 10,60 mg·kg~(-1)·d-1,每周灌胃6 d,持续6个月至24月龄处理动物。HE染色观察各组大鼠心肌形态;Tunel法检测心肌细胞凋亡;Western blot检测各组大鼠心肌组织中Bcl-2,Bax,IL~(-1)β,TNF-α,AMPK,p-AMPK,Sirt1,Ac-NF-κB p65蛋白表达。SPJ能有效改善自然衰老大鼠心肌纤维的排列紊乱,减少炎性细胞浸润,抑制心肌细胞凋亡。同时,SPJ能明显抑制自然衰老过程中心脏组织Bax,IL~(-1)β,TNF-α,Ac-NF-κB p65的表达,促进Bcl-2,Bcl-2/Bax,p-AMPK/AMPK,Sirt1蛋白表达。SPJ可有效抑制自然衰老大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调节AMPK/Sirt1/NF-κB通路介导的炎症反应有关。     

去甲斑蝥素抗骨髓瘤作用及其机制研究

目的 探讨去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)抗骨髓瘤作用及其相关机制.方法 MTT法检测NCTD对人骨髓瘤细胞株RPMI 8226增殖的抑制作用,并观察其对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting 检测核因子-κB (NF-κB) p65、磷酸化NF-κB p65 (p-NF-κB p65)、NF-κB抑制因子IkBα、磷酸化IkBα(p-IkBα)、IkB激酶α(IKKα)以及Survivin、Bcl-2、Bax蛋白表达水平,分光光度法检测Caspase-3活性,RT-PCR检测NF-κB mRNA表达.结果 NCTD抑制RPMI 8226细胞增殖,促进其凋亡;其剂量为20、40 mg/kg时对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为29.8％、53.5％.NCTD抑制胞核NF-κB p65、p-NF-κB p65以及胞浆p-IkBα、IKKα的表达,增加胞浆IkBα的表达,对胞浆NF-κB p65的表达无显著影响.NCTD还抑制Survivin、Bcl-2蛋白的表达,促进Bax的表达和RPMI 8226细胞Caspase-3的活化,Caspase-3抑制剂能部分拮抗NCTD引起的RPMI 8226细胞凋亡(P＜0.05).结论 NCTD对RPMI 8226细胞有抗增殖和促凋亡作用,其机制可能与NF-κB信号通路有关.     

丹葛解酲汤对酒精性肝损害大鼠肝细胞中Bcl-2和NF-kB表达的影响

目的 通过观察肝组织病理形态学改变,来探讨丹葛解酲汤对酒精性肝损害大鼠肝细胞中Bcl-2和NF-κB表达的影响.方法 将90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、丹葛解酲汤组,采用白酒灌胃的方法建立大鼠酒精性肝损伤模型,12周后,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡指数并观察肝脏的病理学形态;用免疫组化法测定Bcl-2和NF-κB在肝细胞中的表达.结果 丹葛解酲汤组就细胞凋亡指数低于模型组,差别有统计学意义(P＜0.01);肝组织病理结果提示丹葛解酲汤对酒精性肝损伤大鼠具有保护作用.模型组Bcl-2和NF-kB表达强度均明显高于正常对照组(P＜0.01),丹葛解酲汤组Bcl-2表达强度高于模型组(P＜0.05),丹葛解酲汤组NF-κB表达强度低于模型组(P＜0.01).结论 丹葛解酲汤对酒精性肝损伤大鼠肝细胞具有保护作用;通过影响大鼠肝组织中Bcl-2和NF-κB表达,推测丹葛解酲汤有减少肝细胞凋亡而起到保护肝细胞作用的可能机制.     

大蒜素对慢性肾衰大鼠肾组织细胞凋亡的抑制作用与机制研究

目的观察大蒜素对慢性肾衰(CRF)大鼠肾脏组织细胞凋亡的影响并初探其机制。方法100只实验用大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、大蒜素[5、10、20 mg/(kg·d)]组,采用腺嘌呤溶液[250 mg/(kg·d)]灌胃21 d的方法建立CRF大鼠模型,大蒜素[5、10、20 mg/(kg·d)]组腹腔注射给药治疗,疗程28 d。测定24 h尿量、24 h尿蛋白量及血清肾功能指标(BUN、SCr、UA含量),HE染色法观察肾脏组织病理变化;TUNEL染色法观察肾脏组织细胞凋亡状况,Western blotting法检测Bcl-2、Bax、NF-кB表达并进行半定量分析,化学比色法检测肾脏组织抗氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量。结果与模型对照组比较,大蒜素10、20 mg/(kg·d)组24 h尿量显著减少,24 h尿蛋白量显著降低(P0.05或P0.01),血清BUN、SCr、UA含量显著降低(P0.05或P0.01);经大蒜素治疗28 d能够明显改善CRF大鼠肾脏组织病变及细胞凋亡状况,大蒜素10、20 mg/(kg·d)组凋亡指数(AI)显著降低(P0.01),Bcl-2蛋白表达显著上调、Bax显著下调且Bcl-2/Bax表达比值显著升高(P0.05或P0.01),NF-κB表达显著下调(P0.05或P0.01),抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)]活性显著升高且MDA含量显著降低(P0.05或P0.01),其中大蒜素20 mg/(kg·d)组过氧化氢酶(CAT)活性显著升高(P0.05)。结论大蒜素可能通过抑制肾脏组织细胞凋亡而对CRF大鼠起到一定的保护作用,可能与其调节凋亡相关蛋白表达及抑制氧化应激损伤有关。     

山精胶囊对心肌缺血大鼠NF-κB信号通路相关凋亡蛋白表达的影响

目的:研究山精胶囊对心肌缺血大鼠核转录因子-κB(NF-κB)信号通路相关凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),抗细胞凋亡B细胞淋巴瘤/白血病2基因(Bcl-2),促细胞凋亡Bcl-2相关X蛋白基因(Bax)表达的影响,探讨其对心肌缺血的保护作用和机制。方法:采用冠状动脉结扎法造模,4周后进行心电图检测,提示慢性心肌缺血模型成功,并筛选分组。山精胶囊低、中、高剂量组ig给药剂量分别为283.5,850.5,1 701.0 mg·kg-1;阳性药心安胶囊ig给药剂量为324.0mg·kg-1。假手术组和模型组ig给予同等剂量的0.9%的氯化钠注射液。每日ig给药1次,连续给药10 d。以心电图法观察其对大鼠心电图ST段的影响,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK),天冬氨酸转氨酶(AST)的含量,免疫组化法检测心肌组织中NF-κB,Caspase-3,Bax,Bcl-2蛋白的表达。结果:与假手术组相比,模型组ST段显著抬高(P0.05),LDH,CK和AST活性显著升高(P0.05),心肌组织中的NF-κB,Caspase-3,Bax的蛋白表达水平显著增高(P0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P0.05);与模型组比较山精胶囊能明显抑制心肌缺血大鼠的ST段抬高,降低血清心肌酶LDH,CK,AST的活性(P0.05),显著降低NF-κB,Caspase-3,Bax蛋白表达(P0.05),提高Bcl-2的蛋白表达(P0.05)。结论:山精胶囊可能是通过调控NF-κB信号通路相关凋亡蛋白的表达,抑制心肌细胞凋亡,减少缺血缺氧对心肌细胞的病理损害,起到对心肌的保护作用。     

基于Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路探讨三七总皂苷对自身免疫性心肌炎模型大鼠心肌凋亡影响的研究

目的:探讨三七总皂苷通过B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)/ Bcl-2相关x蛋白(Bax)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)信号通路对自身免疫性心肌炎(EAM)模型大鼠心肌凋亡的影响。方法:55只Lewis大鼠被分成对照组(n=11)和造模组(n=44)。造模组采用猪心肌肌球蛋白乳浊液后足垫皮下注射建立EAM模型,对照组大鼠给予等体积完全弗氏佐剂后足垫皮下注射。成功建立EAM模型的大鼠被分成模型组、三七总皂苷低、高剂量组和甲氨蝶呤组各11只。模型组、对照组通过灌胃给予蒸馏水10 ml/kg,每日1次; 三七总皂苷低、高剂量组分别灌胃给予10、20 mg/ml三七总皂苷溶液10 ml/kg,每日1次; 甲氨蝶呤组灌胃给予0.1 mg/ml甲氨蝶呤混悬液10 ml/kg,每周1次。各组大鼠均给药4周。结果:与模型组比较,三七总皂苷低、高剂量组和甲氨蝶呤组大鼠左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)较高,而左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)水平较低,心肌组织病理评分较低,心肌组织细胞凋亡率较低,心肌组织Bcl-2表达水平较高,Bax、Caspase-3表达水平较低(均P<0.05),且三七总皂苷干预组呈现一定量效关系。结论:三七总皂苷能剂量依赖性的改善EAM大鼠心功能,减轻心肌炎症病理变化,抑制细胞凋亡,其作用可能与调节Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路中凋亡相关蛋白表达有关。     

心复力颗粒对阿霉素致扩张型心肌病心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨心复力颗粒对阿霉素（adriamycin,ADR）致扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy,DCM）心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法72只SD大鼠随机分为正常组,模型组,厄贝沙坦组,心复力颗粒低、中、高剂量组,除正常组外均予ADR腹腔注射制备DCM心衰大鼠模型,正常组注射等量生理盐水,每周1次,持续6周。从注射ADR第5周各组开始灌胃给药,将心复力颗粒用蒸馏水配成0.5 g/mL的混悬液,心复力颗粒低、中、高剂量组的灌胃剂量分别为0.675、1.350、2.700 g/（kg·d）,厄贝沙坦组剂量为50 mg/（kg·d）,正常组和模型组给予与中剂量组等量生理盐水,每天上午灌胃1次,连续给药4周。用原位末端转移酶标记（terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）技术法检测大鼠心肌细胞凋亡,免疫组化方法检测心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与正常组比较,模型组心肌细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax比值明显下降（P<0.05）。与模型组比较,心复力颗粒高剂量组和厄贝沙坦组Bcl-2表达水平及 Bcl-2／Bax比值显著升高（P<0.01）;心复力颗粒各剂量组和厄贝沙坦组Bax蛋白表达水平明显下降（P<0.01）。结论心复力颗粒能明显减轻DCM心衰大鼠心肌细胞凋亡,逆转心脏重构的发生、发展,其机制可能与调控Bcl-2、Bax蛋白表达有关。