中药逆转乳腺癌细胞多药耐药性的实验研究

目的:从单味中药中筛选具有逆转乳腺癌细胞耐药性的逆转剂.方法:建立乳腺癌耐药细胞的细胞模型,采用SRB法测定单味中药及其对应血清的细胞毒性作用及其逆转作用.结果:理气类中药中延胡索具有对MCF-7/VCR耐药性的逆转作用,而且它的细胞毒作用很小;1.667g/L的延胡索可使MCF-7/VCR的耐药性逆转3.27倍.结论:延胡索能够有效地逆转乳腺癌细胞MCF-7/VCR的耐药性.     

延胡索伍用白芷对延胡索乙素药动学的影响

 目的探索中药配伍对中药复方药效成分药动学的影响。方法采用反相高效液相色谱法测定延胡索乙素的血药浓度,非房室模型拟合药动学参数,统计学处理采用t检验法。结果延胡索提取物组和延胡索白芷提取物组的主要药动学参数:ρ_max分别为(0.484±0.30)和(0.853±0.52)mg·L^-1,AUC_0-∞分别为(1.822±1.0)和(5.542±3.8)mg·h·L^-1,t_max分别为(1.06±0.83)和(1.88±1.6)h,两组药动学参数的差异具有显著性统计学意义(P<0.05)。结论延胡索与白芷配伍对延胡索乙素的药动学特征有显著影响,提示该配伍可能是导致延胡索乙素的药动学特征变化的原因。     

补骨脂素逆转人乳腺癌耐药细胞MCF-7／ADR多药耐药性的研究

目的研究具有钙拮抗作用的中药补骨脂素对多耐药性的逆转作用。方法：选用异搏定作阳性对照，观察其对多药耐药细胞系MCF-7／ADR多药耐药性的逆转作用。结果：补骨脂素在非细胞毒性剂量下能使MCF-7／ADR对阿霉素的浓度升高。结论：补骨脂素具有逆转人乳腺癌MCF-7／ADR多药耐药性的作用。     

导数光谱法测定延胡索中延胡索乙素的含量

利用乙醇超声提取，二阶导数光谱法测定延胡索中延胡索乙素的含量。本法简便、灵敏，重视性好，平均回收率为１０１．３％，ＲＳＤ为２．４３％。     

补骨脂素逆转人乳腺癌耐药细胞株MCF-7多药耐药性研究

人乳腺癌细胞产生多药耐药性(multidrugresistance,MDR)是肿瘤化疗失败的主要原因之一。已知某些中药具有钙拮抗作用,且药物作用较温和,能逆转MDR从而提高化疗效果,具有很好的应用和开发前景。补骨脂是补益药中少有的钙离子通道拮抗剂,本实验选用其主要成分之一的补骨脂素为研究对象,进行逆转人乳腺癌细胞株耐药性的研究,为今后进一步开发有效耐药逆转剂打下基础。材料和方法1·材料实验用细胞株MCF-7(人乳腺癌细胞株)及MCF-7/ADR(用长春新碱诱导的MCF-7多药耐药细胞株)由北京大学提供。RPMI-1640由GIBCO公司出品,P-170单抗购于…     

延胡索乙素和延胡索炮制品提取物的药动学比较

目的:研究延胡索乙素、延胡索生品和醋炙品提取物在大鼠体内的药动学。方法:高效液相色谱法测定血浆中延胡索乙素的血药浓度,采用3p97药动学处理软件,计算药动学参数,CmaxTmax采用实测值。结果:延胡索乙素单体、延胡索药材生品和醋炙品T1/2为(5.66±1.92)、(4.24±1.54)、(4.35±1.34)h;Tmax为(1.5±0.5)、(1.0±0.55)、(0.5±0.68)h;Cmax为(0.71±0.29)、(0.37±0.11)、(0.67±0.35)μg/ml;AUCo-t为(2.58±0.85)、(1.96±0.69)、(2.95±1.61)μg/ml。结论:延胡索生品和醋炙品均能缩短延胡索乙素的达峰时间,说明其两者能起效迅速。     

RP-HPLC测定复方延胡索片中延胡索乙素的含量

复方延胡索片系根据妇科名老中医经验方研制成的中药新药复方制剂,具活血化瘀,破气行滞,消积定痛功效,用于治疗妇女原发性痛经.成分由延胡索、三棱、莪术等8种中药组成.     

HPLC测定延胡索不同炮制品中延胡索乙素含量

目的：比较炮制对延胡索中延胡索乙素含量的影响。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为C18，流动相为[甲醇-水(70：30)]：磷酸缓冲液(100：1．8)，检测波长为280nm。结果：各样品中，以醋制品中延胡索乙素含量为高。加样回收率为99．07％，RSD为1．81％，相关系数r=0．9998。结论：醋制后能增加延胡索中延胡索乙素含量。     

延胡索中延胡索乙素不同提取方法的比较研究

目的比较延胡索中延胡索乙素的不同提取方法的效果。方法以提取液的得膏率以及延胡乙素的含量为指标,考察不同提取方法的提取效果。结果超临界萃取法提取率高,且含固量低。结论超临界萃取法作为延胡索中延胡索乙素的提取工艺是高效可行的。     

延胡索指标性成分延胡索乙素的影响因素分析

目的:分析影响延胡索中延胡索乙素含量的因素,为延胡索质量控制提供数据.方法:测定不同产地、生长年限、软化方法、粒径大小的延胡索中延胡索乙素的含量,并用统计学方法进行分析.结果:浙江产延胡索含量高于陕西产延胡索,1年生延胡索含量高于2年生延胡索,润法所制的饮片含量高于泡法,不同粒径大小延胡索中延胡索乙素含量无明显差异.结论:延胡索产地、药材生长年限、饮片软化方法均可影响延胡索中延胡索乙素的含量,粒径大小对延胡索乙素含量没有显著影响.     

丹参酮IIA对阿霉素耐药人乳腺癌细胞的多药耐药逆转作用及机制研究

目的 研究丹参酮II_A对阿霉素耐药人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的多药耐药逆转作用及相关机制。方法 分别用丹参酮II_A、阿霉素、阿霉素联合丹参酮II_A处理人乳腺癌MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞,采用MTT法检测细胞增殖率;流式细胞术检测丹参酮II_A干预后MCF-7/ADR细胞内阿霉素蓄积量的变化;检测丹参酮II_A干预后MCF-7/ADR细胞三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）消耗量的变化;采用qRT-PCR、Western blotting法检测丹参酮II_A干预后MCF-7/ADR细胞ATP结合转运蛋白B1（ATP-binding cassette transporter B1,ABCB1）、ABCG2和ABCC1基因和蛋白表达的变化。结果 丹参酮II_A显著抑制MCF-7及MCF-7/ADR细胞增殖（P<0.05）,呈剂量相关性;丹参酮II_A能够逆转MCF-7/ADR细胞的多药耐药性（P<0.05）,增加MCF-7/ADR细胞内阿霉素的蓄积（P<0.05）,减少MCF-7/ADR细胞的ATP消耗（P<0.05）,显著下调ABCC1和ABCG2基因和蛋白表达（P<0.05）。结论 丹参酮II_A能够通过调控ABCG2、ABCC1介导的转运,逆转MCF-7/ADR细胞的多药耐药性。     

Reversal of multidrug resistance by morning glory resin glycosides in human breast cancer cells

Reversal of multidrug resistance (MDR) by thirty resin glycosides from the morning glory family (Convolvulaceae) was evaluated in vinblastine-resistant human breast carcinoma cells (MCF-7/Vin). The effects of these amphipathic compounds on the cytotoxicity and P-glycoprotein (P-gp)-mediated MDR were estimated with the sulforhodamine B colorimetric assay. Active noncytotoxic compounds exerted a potentiation effect of vinblastine susceptibility by 1- to over 1906-fold at tested concentrations of 5 and 25 μg/mL. Murucoidin V (1) enhanced vinblastine activity 255-fold when incorporated at 25 μg/mL and also, based on flow cytometry, significantly increased the intracellular accumulation of rhodamine 123 with the use of reserpine as a positive control for a MDR reversal agent. Incubation of MCF-7/Vin cells with 1 caused an increase in uptake and notably lowered the efflux rate of rhodamine 123. Decreased expression of P-glycoprotein by compound 1 was detected by immunofluorescence flow cytometry after incubation with an anti-P-gp monoclonal antibody. These results suggest that resin glycosides represent potential efflux pump inhibitors for overcoming MDR in cancer therapy.     

大蒜素逆转人乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药性的研究

[目的]探索大蒜素对人乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药性的逆转作用及调控机制.[方法]以对数生长期人乳腺癌耐顺铂MCF-7/DDP细胞为受试细胞,设空白对照组(DMSO)、大蒜素(20μg/mL)单药组、顺铂(6μg/mL)单药组、联合组(大蒜素20μg/mL+顺铂6μg/mL).药物干预48 h后,噻唑蓝(MTT)染色法...     

异乌药内酯对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用及其机制研究

目的研究异乌药内酯对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法体外培养MCF-7细胞,分为对照组及不同浓度异乌药内酯处理组。采用MTT实验检测异乌药内酯对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术和TUNEL染色法检测异乌药内酯对MCF-7细胞周期、线粒体膜电位及细胞凋亡的影响;采用Western blotting法检测与细胞凋亡密切相关的蛋白表达情况。结果异乌药内酯以时间和剂量依赖性抑制MCF-7细胞增殖、促进细胞凋亡;能够将MCF-7细胞周期阻滞在G2/M期,诱导线粒体膜电位去极化;上调cleaved Caspase-3和促凋亡蛋白Bax表达,抑制抗凋亡蛋白Bcl-2表达,诱导MCF-7细胞的凋亡。结论异乌药内酯对MCF-7细胞的增殖抑制作用呈剂量和时间依赖性,其作用机制可能是通过线粒体途径诱导细胞凋亡。     

龙葵碱对乳腺癌MCF-7细胞微管系统的影响

目的研究龙葵碱对乳腺癌MCF-7细胞微管系统的影响。方法 MTT法检测龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪分析龙葵碱对MCF-7细胞周期的影响以及细胞内α-微管蛋白及微管相关蛋白(MAP-2)的变化。结果龙葵碱对MCF-7细胞的IC50为22.08μg/mL,能够将MCF-7细胞阻滞于S期;能够增加MCF-7细胞内α-微管蛋白和MAP-2的量。结论龙葵碱通过升高MCF-7细胞内的微管蛋白及MAP-2的表达,将MCF-7细胞阻滞于S期,从而抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长。     

粉防己碱对人乳腺癌MCF-7细胞线粒体能量代谢的影响

目的研究粉防己碱对人乳腺癌MCF-7细胞线粒体能量代谢的影响,探讨其抗肿瘤作用及其机制。方法采用MTT法检测粉防己碱对MCF-7细胞的细胞毒活性,评价其增殖抑制作用;通过检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)变化、三磷酸腺苷(adenosinetriphosphate,ATP)含量、活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)水平和呼吸电子传递链复合酶I～IV活力,评价粉防己碱对MCF-7细胞线粒体功能的影响;运用细胞能量代谢分析仪对活体细胞能量代谢进行实时全过程分析,评价粉防己碱对MCF-7细胞能量代谢的影响。结果粉防己碱可抑制MCF-7细胞增殖,其半数抑制浓度(50%concentration of inhibition,IC_(50))值为20.13μmol/L;粉防己碱显著降低MCF-7细胞MMP、ATP含量、ROS水平和呼吸电子传递链复合酶I～IV活力(P0.05、0.01);粉防己碱可对MCF-7细胞能量代谢过程中基础氧消耗、ATP产能、线粒体储备能和质子漏产生影响。结论粉防己碱能够通过破坏线粒体功能并减少细胞能量代谢,从而抑制MCF-7细胞增殖。     

Saikosaponin-A induces apoptotic mechanism in human breast MDA-MB-231 and MCF-7 cancer cells

The effects of Saikosaponin-A on human breast cancer cell lines (MDA-MB-231 and MCF-7) were investigated. Results demonstrated that Saikosaponin-A inhibited the proliferation or viability of the MDA-MB-231 and MCF-7 cells in a dose-dependent manner. Saikosaponin-A treatment of MDA-MB-231 for 3 hours and of MCF-7 cells for 2 hours, respectively caused an obvious increase in the sub-G1 population of cell cycles. Apoptosis in MDA-MB-231 cells was independent of the P53/p21 pathway mechanism and was accompanied by an increased ratio of Bax to Bcl-2 and c-myc levels and activation of caspase-3. In contrast, apoptosis of MCF-7 cells may have been initiated by the Bcl-2 family of proteins and involved p53/p21 dependent pathway mechanism, and was accompanied by an increased level of c-myc protein. Both the apoptosis of MDA-MB-231 cells and MCF-7 cells showed a difference worthy of further research.     

葡萄籽提取物原花青素诱导乳腺癌 MCF-7 细胞脱落凋亡

目的 检测葡萄籽提取物原花青素诱导乳腺癌MCF-7细胞脱落凋亡的作用。方法 采用DNA ladder检测及软琼脂集落形成试验方法，观察乳腺癌MCF-7细胞对脱落凋亡的敏感性以及原花青素诱导其脱落凋亡的作用。结果 MCF-7细胞具有抗脱落凋亡的特性，而0．1mmol／L原花青素即可引起悬浮培养的MCF-7细胞凋亡。表现为细胞染色质DNA断裂及软琼脂集落形成受阻。结论 原花青素可诱导乳腺癌MCF-7细胞脱落凋亡。     

番荔枝内酯类化合物对耐阿霉素乳腺癌细胞MCF-7/ADR体外活性的影响

目的 研究15种番荔枝内酯类化合物对耐阿霉素乳腺癌细胞MCF-7/ADR的活性,并初步探讨其构效关系。方法MTT法检测15种番荔枝内酯化合物:annotemoyin-1(1)、annosquamin B(2)、annosquamin A(3)、annosquamin C(4)、annosquacin C(5)、urarigrandin A(6)、isodesacetyluvaricin(7)、annosquacin D(8)、annosquacin B(9)、12,15-cis-squamostatin-A(10)、squamostatin-A(11)、squamostanin-B(12)、squamostanin-A(13)、squamostatin-D(14)、squamostatin-E(15)对MCF-7/ADR细胞的抑制作用。结果 所有受试化合物对MCF-7/ADR细胞均有强烈的抑制活性,且活性强于阳性药维拉帕米,化合物1的活性达到维拉帕米的190倍之多。结论 四氢呋喃环与内酯环间的碳数越长,活性越强;链上羟基越多,活性越强;间双四氢呋喃型番荔枝内酯中,链上含有4个羟基的活性最强;相对构型为赤式的番荔枝内酯的活性比苏式的强,四氢呋喃环为反式构型的番荔枝内酯的活性比顺式的强。此外,相对分子质量为622,链上含有3个羟基,相对构型为赤式的邻双四氢呋喃型番荔枝内酯活性显著。