重型再生障碍性贫血患者外周血树突细胞亚群及共刺激分子表达的研究

目的了解重型再生障碍性贫血(SAA)患者在免疫抑制治疗(IST)前、后外周血树突细胞(DC)亚群数量、比值的变化,测定外周血 T 细胞激活协同分子(CD80、CD86、CD40)在树突细胞及 B细胞表面的表达。方法用单克隆抗体三标法和流式细胞术检测26例发病期和13例 IST 后恢复的SAA 患者外周血髓系 DC 前体(pDC1)与淋系 DC 前体(pDC2)的数量、比例,并与15名正常对照比较。其中10例患者检测了治疗前、后2个月的 pDC1与 pDC2的数量。检测16例 SAA 患者及12名正常对照外刷血 DC 及 B 淋巴细胞表面 CD80、CD86、CD40的表达。结果正常对照组外周血 pDC 总量、pDC1、pDC2及 pDC1/pDC2比值分别为(0.72±0.08)%,(0.41±0.05)%,(0.30±0.05)%,1.58±0.18:而初发 SAA 患者为(0.96±0.18)%,(0.67±0.13)%.(0.32±0.06)%,2.70±0.32,pDC1显著增多(P<0.05),pDC1/pDC2比例明显失衡(P<0.01);恢复期 SAA 患者上述指标下降为(0.77±0.13)%,(0.43±0.10)%,(0.34±0.09)%,1.78±0.36,与正常对照组无差异(P 值均>0.05)。10例 SAA 患者治疗前 pDC1、pDC2及 pDC1/pDC2比值分别为(0.87±0.31)%,(0.35±0.09)%,2.65±0.40,治疗2个月后分别为(0.24±0.09)%,(0.14±0.04)%,2.16±0.26,pDC1、pDC2显著下降(P值均<0.05)。正常对照组外周血 DC 表面 CD80、CD86、CD40的表达分别为(1.61±0.84)%,(11.97±4.31)%,(0.56±0.45)%,而 SAA 患者分别为(9.14±4.08)%,(29.84±3.02)%,(7.04±3.79)%,SAA 患者 DC 表面 CD86表达明显高于正常对照(P<0.05)。正常对照组外周血淋巴细胞CD19、CD80、CD86、CD40的表达分别为(9.38±0.92)%,(2.57±0.44)%,(1.86±0.32)%,(7.34±1.22)%;而 SAA 患者分别为(11.12±2.26)%,(5.17±0.68)%,(5.98±0.96)%,(8.85±2.49)%,CD80~+细胞、CD86~+细胞比例明显高于正常对照(P 值分别为<0.05和0.01)。正常对照外周血 B 淋巴细胞 CD80、CD86、CD40的表达分别为(28.22±3.56)%,(8.04±0.66)%,(81.6±6.48)%;而 SAA患者分别为(23.06±3.73)%,(20.46±2.78)%,(81.57±5.29)%,SAA 患者 B 淋巴细胞上 CD86表达明显高于正常对照组(P<0.05)。结论 SAA 患耆 pDC 亚群明显异常,与 Th1细胞激活有关的pDC1明显增多,这种变化与 SAA 病情密切相关。SAA 患者 T 细胞活化所需要的共刺激信号 B7-2途径处于高度激活状态,这可能是导致 T 细胞异常激活的机制之一。     

重型再生障碍性贫血患者骨髓Ⅰ型树突细胞亚群的变化

目的　测定重型再生障碍性贫血 (SAA)患者在免疫抑制治疗前、后骨髓中Ⅰ型树突细胞(DC1)亚群 (CD11c CD1a 细胞、CD11c CD83 细胞 )的改变 ,评价CD11c CD83 细胞与Th1细胞、CD3 CD8 细胞及造血功能的相关性 ,探讨DC1在SAA发病机制中的作用。方法　以正常人为对照 ,用单克隆抗体及流式细胞仪检测发病期和恢复期SAA患者骨髓中Th1细胞、CD3 CD8 细胞、CD11c CD1a 细胞、CD11c CD83 细胞百分率及CD11c CD83 细胞 /CD11c CD1a 细胞比值的改变 ;评价CD11c CD83 细胞与Th1细胞、CD3 CD8 细胞及网织红细胞绝对值、中性粒细胞绝对值(ANC)的相关性。结果　正常人骨髓中Th1细胞、CD11c CD1a 细胞、CD11c CD83 细胞百分率及CD11c CD83 细胞 /CD1a CD11c 细胞比值分别为 (0 .4 2± 0 .30 ) %、(0 .38± 0 .2 9) %、(0 .37±0 .32 ) %、1.0 7± 0 .10 ,SAA患者发病期为 (4.87± 0 .5 4 ) %、(1.73± 0 .2 4 ) %、(3.38± 0 .5 6 ) %、2 .2 1±0 .32 ,SAA患者恢复期为 (0 .5 3± 0 .2 2 ) %、(0 .6 1± 0 .2 3) %、(0 .6 5± 0 .2 2 ) %、1.37± 0 .2 5 ;SAA患者发病期Th1细胞、CD11c CD1a 细胞、CD11c CD83 细胞百分率及CD11c CD83 细胞 /CD11c CD1a 细胞比值均显著高于正常对照     

转录因子T-bet在再生障碍性贫血小鼠骨髓中的表达及其意义

目的探讨放射免疫介导再障小鼠骨髓中转录因子T-bet的表达及其意义。方法建立再障小鼠模型,取再障和正常组小鼠骨髓单个核细胞（BMMNC）,在终浓度为15拉g／mL植物血凝素（PHA）条件下培养,用双抗体夹心ELISA方法检测小鼠骨髓淋巴细胞培养上清Thl及Th2类细胞因子IL-2、IFN-γ和IL．4、IL．10的浓度水平;用RT-PCR技术检测小鼠骨髓转录因子T-betmRNA表达强度。结果再障小鼠骨髓BMMNC培养上清中细胞因子IL-2、IFN-γ水平均显著高于正常组（P〈0．01）,而IL．4、IL-10水平均明显低于正常组（P〈0．01）;转录因子T-betmRNA表达也明冠高于正常组（P〈0．01）。结论T-bet表达增强可能是再障小鼠出现Th1细胞优势分化状态的重要原因之一。     

再生障碍性贫血T淋巴细胞亚群及其功能研究

免疫功能紊乱在再生障碍性贫血（再障）病理过程的发生和发展中起着十分重要的作用。我们通过研究再障患者不同状态和不同分化阶段的Ｔ淋巴细胞亚群变化和其对造血的抑制作用，寻找诊断免疫型再障的较准确的方法，为临床治疗提供依据。病例和方法１　病例　再障２２例，其中重型再障（ＳＡＡ）Ⅰ型５例，Ⅱ型６例，慢性再障（ＣＡＡ）１１例；男１９例，女３例；平均年龄３１．３岁（２０～５０岁）。除１例ＣＡＡ外均接受过治疗。１４名献血员为正常对照组。２　单个核细胞激活　１０６／ｍｌ外周血单个核细胞在体积分数为１０％的牛血清，…     

再生障碍性贫血患者外周血树突状细胞亚群分析

目的检测再生障碍性贫血(AA)患者外周血树突状细胞(DCs)亚群,并探讨其意义。方法采用免疫荧光三色标记流式细胞术检测14例AA患者外周血DCs亚群(DC1/CD11c+和DC2/CD123+),并以14例正常人作为对照。结果 AA患者外周血CD11c+DCs百分率为0.353±0.084,比健康对照组0.264±0.087明显增高(P0.05),CD123+DCs百分率为0.187±0.067,与健康对照组的0.140±0.064相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论 AA患者外周血中DC1亚群占优势,导致向Th1样免疫反应偏移,可能与AA的发病有关。     

再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病患者CD4＋T细胞亚群转录因子表达的变化及其临床意义

本研究通过检测CD4＋T细胞亚群特异性转录因子的mRNA（T-bet、GA TA-3、Foxp3、RORγt）在再生障碍性贫血（AA）、骨髓增生异常综合征（MDS）和急性髓系白血病（AML）患者外周血中的表达变化,探讨3种疾病的细胞免疫状态及其作用机制.采用实时荧光定量方法检测AA组23例、MDS组42例、AML组17例和正常组16例外周血单个核细胞（PBMNC）中转录因子的T-bet、GA TA-3、Foxp3、RORγt mRNA表达并进行对比分析.结果显示：与正常组比较,AA组患者T-bet、RORγt mRNA的表达均显著增高（P＜0.01）,GATA-3、Foxp3表达减低（P＜0.01）.MDS组T-bet、GATA-3 mRNA表达无显著性变化,而Foxp3、RORγt表达均显著增高（P＜0.05）;MDS-RA组T-bet、RORγt表达均较正常组升高（P＜0.01）,GA TA-3表达显著性减低（P＜0.05）,Foxp3较正常组无显著性差异;MDS-RAEB和AML组T-bet、RORγt表达均低于正常对照（P＜0.05）,而GA TA-3、Foxp3mRNA表达均高于正常对照组（P＜0.01）.结论：AA、MDS不同阶段以及AML患者外周血中CD4＋T细胞转录因子表达水平不同,提示细胞免疫状态有差异,在AA和MDS早期阶段,异常免疫介导的造血细胞过度凋亡在骨髓衰竭中可能起重要作用,而在MDS晚期阶段和在AML时,恶性克隆的大量积聚可能是其主要原因.     

再生障碍性贫血患者T淋巴细胞亚群检测

我们于1991～1994年间,用APAAP技术,对31例再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞亚群进行了检测,现报告如下。 1 材料与方法 1.1 一般资料 再障患者31例,其中女性20例,男性11例,年龄7～84岁,均为住院患者,经血常规、血小板计数,骨髓象检查确诊,符合1987年宝鸡再障会议制定的诊断标准。1例为纯红再障,6例缓解期,余均为慢性型。其中9例Hb低于30g/L,15例Hb在50～80g/L。除6例缓解期患者外,均有不同程度的出血。对照组:42名,均为健康献血员,其中女性23例,男性19例,年龄24～47岁。 1.2 方法 采用军事医学科学院生产的T淋巴细胞亚群试剂盒。用APAAP桥联酶标技术,对上述73例外周血T淋巴细胞亚群进行了检测。     

再生障碍性贫血患者外周血T细胞亚群检测

再生障碍性贫血患者外周血Ｔ细胞亚群检测唐晓文邵景章张学光张毅李建勇郑列琳谢炜王爱青再生障碍性贫血（再障）患者对免疫抑制治疗有效以及细胞毒性Ｔ淋巴细胞对造血细胞的体外抑制作用等临床及实验室结果均支持细胞介导的免疫反应在再障发病中所起的作用，然而对Ｔ细胞...     

再生障碍性贫血患者的T淋巴细胞研究进展

再生障碍性贫血（再障）是骨髓造血功能衰竭导致全血细胞减少的疾病。大量研究结果表明，再障患者骨髓造血功能衰竭的发生、发展与免疫机制，特别是Ｔ淋巴细胞数量及功能的异常密切相关［１，２］。我们就再障患者Ｔ淋巴细胞的研究进展作一综述。１　再障患者Ｔ淋巴细胞数量及亚群的变化　　再障患者外周血淋巴细胞的比例相对增高，他们的骨髓造血组织被脂肪组织或其它非造血细胞所代替，淋巴细胞在骨髓穿刺液中所占的比例明显增高。再障患者骨髓活检标本中ＣＤ３＋淋巴细胞亦明显增多［３］。再障患者ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞所占的比例增加，Ｃ…     

免疫介导的再生障碍性贫血小鼠模型胸腺T-bet的表达水平及其意义

目的：探讨再生障碍性贫血（AA）小鼠模型中T-bet蛋白在胸腺的表达水平和意义。方法：建立免疫介导的骨髓衰竭模型，用免疫组织化学方法检测AA胸腺组织石蜡切片中T-bet蛋白表达水平。结果：模型小鼠组胸腺组织石蜡切片中T-bet蛋白表达水平（1．06＋0．18）％明显高于正常小鼠组（0．41±0．05）％（P〈0．01）；模型小鼠组胸腺T-bet蛋白表达与网织红细胞相对值（RC）及中性粒细胞绝对值（ANC）呈负相关（r值分别为-0．679和-0．701，P〈0．05），而与血小板数及血红蛋白无明显的线性相关关系。结论：在免疫介导的骨髓衰竭模型小鼠中转录因子T-bet蛋白在胸腺表达增加，说明在AA发病机制中T-bet可能起一定作用。     

血必净对心肺复苏后转录因子GATA-3和T-bet表达调节的实验研究

目的 探讨血必净对心肺复苏后转录因子GATA-3和T-bet表达的调节作用.方法 建立心肺复苏大鼠模型,30只SD大鼠动物随机(随机数字法)分为三组:假手术组(B组),仅进行麻醉和气管切开插管、血管穿刺,不进行窒息及心肺复苏;常规复苏组(C组),常规复苏+生理盐水4 mL/kg;血必净治疗组(D组),常规复苏+血必净4mL/kg.动态观察血清GATA-3和T-betmRNA表达及白介素-12(IL-12)、白介素-4(IL-4)、r-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化.多组间均数比较采用单因素方差分析,方差齐则采用成组设计资料的t检验,两两比较用SNK法;如方差不齐,则采用随机区组设计的秩和检验(Wilcoxon检验),P<0.05为差异有统计学意义.结果 C,D组复苏后6 h与对照组、复苏后即刻比较,IL-12,IFN-γ,TNF-α水平均升高(P<0.01);C组复苏后6 h GATA表达下调(P>0.05),T-bel表达上调(P<0.01),GATA-3/T-bet下降(P<0.05).D组复苏后6 h T-bet表达上调(P>0.05),GATA表达上调(P<0.01),GATA-3/T-bet升高(P<0.05);D组复苏后6h与C组同时点比较,IL-12,IFN-γ,TNF-α水平低于C组(P<0.01),GATA-3表达上调、T-bet表达下调、GATA-3/T-bet升高均有统计学意义(P<0.01).结论 心肺复苏后存在转录因子T-bet和GATA-3失衡表达,血必净可调节GATA-3/T-bet趋向平衡及细胞因子IL-12,IFN-γ,TNF-α水平.     

当归芍药散对外周血单个核细胞GATA-3和T-bet mRNA表达的影响

目的:研究中药当归芍药散对外周血T淋巴细胞转录因子GATA-3和T-bet mRNA表达的影响,初步探讨其用于治疗不明原因反复自然流产的可能性。方法:体外分离提取11例志愿者外周血单核细胞,在含有或不含当归芍药散的培养液中培养24h,用实时定量PCR技术检测GATA-3和T-bet mRNA的表达。结果:用10μg/mL浓度当归芍药散处理后,单核细胞中GATA-3 mRNA的含量与对照组比较显著增高(P<0.05)。当归芍药散处理细胞后,T-bet mRNA的表达水平呈降低趋势,当浓度为100μg/mL时,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:当归芍药散可上调转录因子GATA-3mRNA的表达或下调T-bet mRNA的表达,从而可能通过调节Th2/Th1平衡向Th2偏移、对于Th1反应异常增强的不明原因反复自然流产有一定的治疗潜能。     

异基因外周血造血干细胞移植治疗急性再生障碍性贫血--一例报告附文献复习

目的探索异基因外周血造血干细胞移植治疗急性再生障碍性贫血(再障)的疗效及其长期造血重建.方法1例急性再障患者,30岁,供者为其胞弟,HLA配型完全相合.动员方案G-CSF250?μg/d×6d.预处理方案环磷酰胺(CTX)50mg·kg-1·d-1×4d,抗胸腺细胞球蛋白(ATG)20mg·kg-1·     

重型再生障碍性贫血患者骨髓中辅助性T细胞亚群数量及功能的变化

目的　研究重型再生障碍性贫血 (SAA)患者在免疫抑制治疗 (IST)恢复前后骨髓中辅助性T细胞 (Th细胞 )亚群改变情况及与造血功能的关系。方法　以流式细胞仪测定 2 4例发病期、15例恢复期SAA患者及 16名正常对照者骨髓中Th细胞亚群及CD3 CD8 细胞改变情况 ;以放射免疫法测定 2 0例发病期SAA患者、12例IST后恢复期患者及 16名正常对照者血清中TNF α、IL 4水平 ;评价Th1与CD3 CD8 细胞、TNF α的相关关系 ;评价Th1、CD3 CD8 细胞、TNF α、IL 4及Th1/Th2平衡与网织红细胞、中性粒细胞绝对值的相关关系。结果　正常对照组骨髓中Th1细胞、Th2细胞百分率及Th1/Th2比值分别为 (0 .4 2± 0 .30 ) %、(0 .2 4± 0 .17) %、1.5 7± 0 .93;发病期SAA分别为 (4 .87± 2 .6 4 ) %、(0 .4 1±0 .2 6 ) %、2 1.2 2± 5 .0 7,均显著多于正常对照 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,恢复期分别为 (0 .5 3± 0 .2 2 ) %、(0 .4 4± 0 .15 ) %、1.38± 0 .4 5 ,与正常对照组相当 (P均 >0 .0 5 ) ;CD3 CD8 细胞亦由发病期的(32 .32± 18.6 9) %显著下降为 (13.76± 2 .96 ) % (P <0 .0 1) ;SAA发病期血清中TNF α、IL 4为 (4 .2 9± 3.15 ) μg/L、(1.2 4± 0 .73) μg/L ,高于正常对照组的 (1.2 1± 1.16 ) μg/L     

维生素E对胃癌患者血清中GATA-3、T-bet及血脂的影响

目的观察维生素E对胃癌患者血清GATA-3、T-bet及血脂的影响。方法选取我院2010年8月—2013年4月收治的经胃镜活检证实为胃腺癌的男性患者22例,随机分为维生素E组(n=10)和对照组(n=12),维生素E组口服维生素E(100 mg/d)14 d,对照组不做任何处理,观察两组治疗前后血清中GATA-3、T-bet的浓度及甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的变化情况。结果治疗后,维生素E组TC、TG、GATA-3较治疗前降低,T-bet表达量升高,差异均有统计学意义(P均0.05);治疗后维生素E组血清TC、TG水平及GATA-3表达量明显低于对照组,T-bet表达量明显高于对照组,差异均有统计学意义(P均0.05)。结论维生素E能很好地激活胃癌患者机体细胞免疫机制,并降低脂质过氧化损伤。     

重型再生障碍性贫血患者Th3细胞、调节T细胞数量和转化生长因子β1的水平

目的测定重型再生障碍性贫血(SAA)患者外周血辅助性T细胞Ⅲ型(Th3)、CD+ CD25+调节T细胞(Tr)数量和血浆中转化生长因子β1(TGF-β1)水平,探索SAA患者细胞免疫耐受被打破的机制。方法用流式细胞术检测20例发病期和10例免疫抑制治疗(IST)后恢复期的SAA患者外周血表达TGF-β1的CD4+细胞(Th3)数量;用流式细胞术检测12例新发SAA患者、9例IST后未恢复和10例恢复期SAA患者的Tr数量,并与12名正常对照比较,分析其与CD3+CD4+、CD3+CD8+细胞及CD3+CD4+／CD3+CD8+细胞比值的相关性;采用ELISA法检测25例SAA患者血浆中TGF-β1水平,分析其与Th3细胞、血小板计数的相关性。结果正常对照组Th3细胞、CD8+TGF-β1+细胞及Th3／CD8+TGF-β1+细胞比值分别为(5．10±0．91)％,(4．93±0．97)％、1．20±0．19;SAA发病组分别为(1．33±0．20)％,(1．72±0．24)％,1．00±0．25,Th3细胞、CD8+TGF-β1+细胞比例明显下降(P< 0．01和P<0．05);SAA恢复组分别为(2．19±0．21)％,(2．07±0．33)％,1．71±0．52,Th3细胞、CD8+ TGF-β1+细胞比例均较SAA发病组升高,但仍明显低于正常对照组(P值均<0．05);正常对照组Tr比例为(8．25±1．96)％;新发SAA组为(3．32±0．81)％,明显低于正常对照组;SAA治疗后未恢复组Tr为(7．09±1．84)％,较新发SAA组明显升高(P<0．05),与正常对照组差异无统计学意义;SAA恢复组Tr为(7．49±1．27)％,较新发SAA组明显升高(P<0．05),与正常对照组差异无统计学意义;SAA患者Tr与CD3+CD4+细胞、CD4+／CD8+细胞比值呈正相关(r=0．855,P<0．01:r=0．729,P< 0．01),而与CD3+CD8+细胞呈负相关(r=-0．488,P<0．05);正常对照组血浆TGF-β1水平为(11．06±0．49)μg／L,SAA组为(2．49±0．51)μg／L,较正常对照组明显下降(P<0．01);SAA组血浆TGF-β1水平与Th3细胞呈正相关(r=0．396,P<0．05),与血小板水平呈正相关(r=0．701,P<0．01)。结论SAA患者外周血Th3细胞、Tr数量和血浆中TGF-β1水平下降可能导致SAA患者细胞免疫耐受被打破。     

减低剂量的脐血造血干细胞移植/输注治疗重型再生障碍性贫血21例临床研究

目的观察HLA基因位点不相合的非亲缘脐血造血干细胞移植（简称脐血移植）治疗重型再生障碍性贫血（SAA）的疗效。方法采用3~6个HLA基因位点相合的非亲缘脐血移植/输注治疗重型SAA患者21例。从血缘关系及HLA基因位点、SAA分型、患者体重4个方面进行研究。预处理方案：环磷酰胺50mg·kg^-1·d^-1×2d＋抗人淋巴细胞球蛋白15mg·kg^-1·d^-1/抗胸腺细胞球蛋白3mg·kg^-1·d^-1×5d。应用环孢素A预防移植物抗宿主病（GVHD）。结果5组患者均能达到造血快速重建,总的完全造血重建率达80.98%。根据SAA分型,21例患者中SAA-Ⅰ型16例,15例达到完全造血重建,1例死亡。SAA-Ⅱ型5例,2例完全造血重建,2例部分重建,1例死亡。体重〈60kg的SAA患者13例,11例完全造血重建,2例部分造血重建。体重大于60kg的SAA患者8例,6例完全造血重建,2例死亡。结论脐血移植/输注治疗SAA是一种有效的治疗方法,特别适合于SAA-Ⅰ型的低体重儿童,其配型要求无需十分严格,大体重儿童或成年人应用双份脐血同样可以达到很好的治疗效果。