星形胶质细胞上调基因-1对胃癌干细胞增殖、凋亡及干性的影响

目的探讨星形胶质细胞上调基因-1（AEG-1）在胃癌干细胞中的表达及其作用。方法采用实时荧光定量技术（qRT-PCR）及Western blotting检测胃癌干细胞（HGC-27、MKN-45）及相应非干细胞mRNA及蛋白表达水平,采用瞬时转染法对AEG-1进行处理,使用MTS、细胞周期检测细胞增殖情况及作用机制,Annexin Ⅴ及Caspase-3/7活性检测细胞凋亡情况,干细胞成球实验评估AEG-1沉默对胃干细胞干性的影响,裸鼠体内成瘤实验评估AEG-1对裸鼠体内胃干细胞肿瘤发生的影响。Ⅴ结果胃癌干细胞MKN-45中AEG-1表达水平高于非干细胞组（P < 0.01）;AEG-1-siRNA转染的癌干细胞导致癌干细胞周期停滞在G₁期,明显抑制了细胞增殖（P < 0.01）;Annexin Ⅴ及Caspase 3/7活性检测AEG-1敲低可诱导胃干细胞凋亡;AEG-1表达被敲低时显著抑制了胃癌干细胞的成球能力;AEG-1缺失抑制了肿瘤干细胞的体内成瘤能力。结论AEG-1沉默抑制细胞增殖,诱导胃癌干细胞G₁期细胞周期停滞和细胞凋亡,抑制肿瘤发生,在胃癌干细胞的肿瘤发生中起着积极作用。     

星形胶质细胞在神经再生中的作用研究进展

<正>神经胶质细胞发现距今已100多年,其功能学却是近年随着神经分子生物学的发展才有较为深入的阐明。星形胶质细胞不只是中枢神经系统的"填充物",起支持作用,在神经发育、突触传递、神经组织修复与再生、神经免疫及多种神经疾病中都起着十分重要的作用。近年来,随着成年动物脑内存在神经     

星形胶质细胞在阿尔茨海默病中的研究进展

中枢神经系统中,体积最大数量最多的星形胶质细胞(astrocyte, AS)具有营养支持、调节脑血流、维持脑稳态、分泌神经胶质、参与突触修剪、免疫等功能来维持脑内稳态。近年来研究发现,在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)病变过程中,AS不仅表现为生理功能的下降,还会促进Aβ沉积,Tau磷酸化,诱发炎症反应等,最终导致突触减少及神经元死亡。因此,本文对AS参与AD的有关机制进行系统综述。     

星形胶质细胞在癫痫发病机制中研究进展

星形胶质细胞是中枢神经系统主要的大胶质细胞,不仅对神经元起支持、保护、分隔和营养等作用,而且具有对各种神经损害产生强烈反应的特性,在病理条件下,星形胶质细胞反复增生、活化,并能释放某些活性物质使神经元的兴奋性提高,对神经系统的损害具有重要的影响。近年来,越来越多实验已证实星形胶质细胞在癫痫发病机制中起重要作用,本文就星形胶质细胞与癫痫发病机制关系综述如下。形态学变化与癫痫发病有关Hawrylak等[1]用电镜观察周期性电刺激点燃的大鼠癫痫模型脑组织,发现星形胶质细胞突起的中间和末梢的体积分别增加37%和33%,特别是在C…     

极光激酶B在骨肉瘤侵袭与转移中的作用研究进展

极光激酶B(Aurora-B)是一种有丝分裂的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,隶属于极光激酶家族,参与细胞周期的完成。近年来,越来越多的研究发现Aurora-B参与多种肿瘤的侵袭和转移。在骨肉瘤中,Aurora-B可通过介导NPM1的磷酸化、microRNA、mTOR/ULK1、PI3K/Akt/NF-κB等多种方式,参与调控骨肉瘤的侵袭和迁移。文章就Aurora-B的生物学特性及其在骨肉瘤侵袭与转移中作用的研究进展进行综述。     

小分子干扰RNA下调星形细胞上调基因1的表达对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)下调星形细胞上调基因1(AEG-1)表达对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法卵巢癌细胞株SKOV3分为3组:空白对照组(不做任何处理)、阴性对照组(对照siRNA转染)和观察组(AEG-1 siRNA转染)。用反转录聚合酶链反应观察AEG-1 siRNA对AEG-1基因表达的影响;甲基噻唑基四唑法观察AEG-1 siRNA对卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测AEG-1 siRNA对卵巢癌SKOV3细胞凋亡和细胞周期的影响。结果空白对照组和阴性对照组AEG-1 mRNA表达、SKOV3细胞增殖、细胞凋亡率及在DNA合成前期(G0/G1期)、合成期(S期)、合成后期(G2/M期)的细胞比例差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组SKOV3细胞AEG-1 mRNA表达显著低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。观察组SKOV3细胞增殖在24、48、72 h较空白对照组和阴性对照组均显著减慢,差异有统计学意义(P<0.01)。观察组SKOV3细胞凋亡率显著高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);观察组SKOV3细胞在DNA合成前期(G0/G1期)细胞比例显著高于空白对照组和阴性对照组(P<0.01),而合成期(S期)、合成后期(G2/M期)的细胞比例均显著低于空白对照组和阴性对照组(P<0.01),差异均有统计学意义。结论 siRNA可通过下调卵巢癌SKOV3细胞AEG-1基因的表达,抑制其增殖,促进其凋亡。     

反应性星形胶质细胞在脊髓损伤后作用研究进展

星形胶质细胞是脊髓内最主要的胶质细胞类型,广泛分布于脊髓的各个区域.星形胶质细胞在脊髓损伤后经过一系列变化形成反应性星形胶质细胞.反应性星形胶质细胞与星形胶质细胞在形态、分子表达等方面有许多不同之处,并在脊髓损伤与修复过程中起重要作用.现就脊髓损伤与修复过程中有关RAS的作用的最新研究进展情况作一综述.     

PDTC对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及星形细胞上调基因-1表达的影响

目的:观察NF-κB特异性抑制剂PDTC对人肺腺癌A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及星形细胞上调基因-1(AEG-1)表达的影响。方法:用不同浓度(25、50、100、200μmol/L)的PDTC分别处理A549细胞,对照组不给PDTC。应用MTT法检测处理24、48、72h后细胞增殖抑制率,流式细胞术检测处理24h后细胞周期的变化,Ho-echst33342荧光染色检测处理24h后细胞的凋亡情况,RT-PCR和Westernblot检测处理24h后细胞AEG-1mRNA和蛋白的表达。结果:经PDTC处理的A549细胞增殖明显受抑,呈时间和浓度依赖性(F时间=531.981,F浓度=388.475,P<0.05);与对照组相比,PDTC处理24h后A549细胞G0/G1期细胞比例上升(P<0.05),细胞形态出现明显凋亡改变;随着PDTC浓度的增加,癌细胞内AEG-1mRNA和蛋白的表达水平降低(F=275.162、59.473,P<0.05)。结论:PDTC可抑制A549细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与PDTC抑制NF-κB、AEG-1的表达有关。     

TH基因修饰的中脑星形胶质细胞的建立

目的 体外构建酪氨酸羟化酶(TH)基因修饰的中脑星形胶质细胞,为进行帕金森病(PD)的转基因细胞治疗奠定基础。方法 应用逆转录病毒表达载体将鼠TH基因转入逆转录病毒包装细胞PA317,通过G418抗性筛选,获取高滴度产毒PA317／pN2ATH细胞株,以其产生的病毒上清感染鼠中脑星形胶质细胞,继续培养7～9d后,免疫组化检测细胞TH表达。结果获得了高滴度产毒PA317／pN2ATH细胞,并且转染pN2ATH的中脑星形胶质细胞成功表达TH。结论转染pN2ATH的中脑星形胶质细胞可以有效表达TH,为将其应用于PD基因治疗实验研究提供了基础。     

miR-300通过负向调控垂体肿瘤转化基因1抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭和转移

目的研究miR-300及垂体肿瘤转化基因1（PTTG1）对骨肉瘤侵袭转移的影响，探讨引起骨肉瘤侵袭转移的分子机制。方法Western blot检测人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中PTTG1的表达情况，并检测转染敲低PTTG1质粒后细胞的转染效率; Transwell侵袭实验和CCK8实验检测敲低PTTG1及过表达miR-300对骨肉瘤细胞MG63侵袭和增殖能力的影响; 网上预测并筛选与PTTG1互补结合的microRNAs（miRNAs）; qRT-PCR检测人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中miR- 300的表达情况; Western blot检测转染过表达miR-300质粒后PTTG1在骨肉瘤细胞MG63的表达情况; 双荧光素酶实验检测miR-300和PTTG1的靶向结合情况; Transwell侵袭实验和CCK8实验检测过表达miR-300和过表达PTTG1质粒共转后对骨肉瘤细胞MG63侵袭和增殖能力的影响。结果PTTG1在骨肉瘤细胞MG63中表达较高（P=0.0002）; 敲低PTTG1可抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭（P=0.0002）和增殖（P=0.0039）能力; 网上预测软件预测可能与PTTG1互补结合的miRNAs，NCBI数据库下载数据集分析确定研究对象为miR-300;qRT-PCR结果表明miR-300在骨肉瘤细胞MG63中表达降低（P=0.0004）; 采用过表达质粒过表达骨肉瘤细胞MG63中的miR-300，qRT-PCR结果提示转染成功（P < 0.0001）; Western blot发现过表达miR-300后PTTG1的表达明显降低（P=0.0007）; 双荧光素酶实验结果显示miR-300可与PTTG1靶向结合（P=0.0010）; 细胞共转实验显示过表达PTTG1可逆转miR-300对骨肉瘤细胞侵袭（P=0.0003）和增殖（P=0.0077）能力的影响。结论miR-300通过靶向结合PTTG1抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭转移能力。     

ASK1在损伤的大鼠脊髓星形胶质细胞增生中的作用

目的 探讨细胞凋亡信号调节蛋白1 (ASK1)在损伤的大鼠脊髓星形胶质细胞增生中的作用.方法 原代培养得到高纯度(＞96％)大鼠脊髓星形胶质细胞,建立星形胶质细胞损伤模型.星形胶质细胞损伤后立即给予生理盐水(损伤模型组)、ASK1特异性抑制剂(Trx组)、ASK1特异性抗体(抗体中和组)处理;对照组为原代大鼠脊髓星形胶质细胞,不作任何处理.应用蛋白质印迹法检测星形胶质细胞标志蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(Vimentin)的表达情况,应用免疫荧光标记技术检测星形胶质细胞划痕宽度的变化,应用CCK-8法检测星形胶质细胞增殖活性.结果 损伤后24 h及72 h损伤模型组GFAP和Vimentin蛋白的表达均显著高于对照组、Trx组和抗体中和组(P＜0.01);损伤后24 h及72 h损伤模型组星形胶质细胞划痕平均宽度明显小于对照组、Trx组和抗体中和组(P＜0.01);损伤后12h、24 h、72 h对照组、Trx组和抗体中和组星形胶质细胞增殖活性明显低于损伤模型组(P＜0.05).结论 大鼠脊髓星形胶质细胞损伤后阻断ASK1可抑制其细胞增生.     

铅对星形胶质细胞影响的研究进展

铅是工业和生活中常见的重金属毒物之一.它对人的影响主要表现在中枢系统,能够损伤神经的多种功能.铅能通过作用于中枢神经系统中星形胶质细胞,从而对星形胶质细胞参与的许多正常生理活动或神经病理过程等造成相应的影响.因此,铅对星形胶质细胞的形响是铅神经毒性中重要组成命分.本文就铅对星形胶质细胞影响的研究进展阐述如下.     

星形胶质细胞在癫痫发病中的作用

目前临床上的抗癫痫药物都是通过调节神经元活动起作用的,但是仍有近三分之一的癫痫患者发展成为难治性癫痫。近年来随着对癫痫发生机制的深入研究,星形胶质细胞在癫痫中的作用得到了国内外研究者的关注。大量研究发现,癫痫的形成、发作过程常常伴随星形胶质细胞明显的功能改变,这提示星形胶质细胞在癫痫的发病机制中起着重要作用。因此,对星形胶质细胞在癫痫发病机制中的作用进行深入研究,有可能发现新的抗癫痫药物作用靶点,对癫痫治疗策略产生深刻影响。     

星形胶质细胞与癫痫

癫痫是人类常见病和多发病,发病时大脑皮层神经元发生异常放电。星形胶质细胞是大脑中重要的胶质细胞对神经元具有支持和保护作用。本文通过收集星形胶质细胞在癫痫状态下的各种表现,以待对星形胶质细胞和癫痫发病之间的联系作深入研究。     

星形胶质细胞在脊髓损伤修复中的作用

中枢神经系统损伤后的修复一直是科研人员和临床工作者关注的重点.虽然关于中枢神经系统损伤修复的研究已经很多,比如嗅鞘细胞、神经干细胞移植以及各种细胞因子等在损伤修复方面的积极作用[1-4],但目前在该领域的研究却没有实质性进展.星形胶质细胞(astrocyte,AST)是神经系统中数目众多的细胞之一,以往认为它仅是被动的辅助角色,只是起支持、提供营养及协助代谢等作用,而且胶质细胞过度增生形成的胶质瘢痕对哺乳动物神经系统损伤后轴突再生起障碍作用.     

星形胶质细胞在脑铁代谢中作用的研究进展

铁在神经组织中发挥着重要的作用,脑铁代谢必需受到精确的调控。脑组织星形胶质细胞可通过摄取血红素铁、转铁蛋白结合铁和非转铁蛋白结合铁,除了供自身利用外,还能以铁蛋白的形式储存大量的铁,并可通过铁释放蛋白释放铁,在铁跨血脑屏障的转运及脑铁稳态的维持中起着至关重要的作用。星形胶质细胞铁摄取、储存和转运的异常,均有可能引起脑铁平衡的紊乱,造成神经退行性病变等疾病的发生。星形胶质细胞铁代谢的调控有望成为神经变性等疾病治疗的新靶点。     

癫痫状态星形胶质细胞增生机制的研究进展

胶质细胞是神经系统的重要组成部分,星形胶质细胞(astrocyte,Ast)与其他胶质细胞一样,不但对神经元起到营养、支持和保护作用,而且在神经元的生理和病理生理活动中也是重要的参与者。正是依靠包括Ast在内的各类神经胶质细胞与神经元之间的协调作用,才使神经元完成一系列复杂而精密的生理活动。然而,几乎所有的中枢神经系统(CNS)的病变中都能观察到Ast形态和功能的改变,病变以细胞增生和细胞体积增大为主,重时导致神经胶质瘢痕的形成和胶质膜的重建,可见Ast在CNS疾病的发生过程中发挥了重要的作用。大量研究表明在癫痫的发生发展过程中,除了神经元存在病理生理的改变外,伴随显著的Ast增殖异常。本文就     

星形胶质细胞在抑郁症发病机制中的研究进展

星形胶质细胞是中枢神经系统数量最多、分布最广的非神经元细胞.一般认为该类细胞主要起支持、营养、修复、隔离、绝缘、参与血脑屏障形成等作用.随着对星形胶质细胞在大脑中功能研究的深入,目前对星形胶质细胞在抑郁症发病中的认识越来越清晰.研究发现重度抑郁症患者脑中星形胶质细胞的形态和功能均有明显改变.动物实验研究发现,仅胶质纤维酸性蛋白阳性细胞丢失足以诱导大鼠出现抑郁样行为.本文就星形胶质细胞在抑郁症发病机制中的作用进行综述.     

EFEMP1促进骨肉瘤侵袭及转移能力的研究

目的 检测EFEMP1在骨肉瘤组织及细胞株F4和F5M2中的表达,探讨EFEMP1在骨肉瘤细胞中的表达,明确其对骨肉瘤细胞侵袭和迁移的影响。 方法 采用免疫组织化学SP法检测45例临床骨肉瘤及12例骨软骨瘤病例肿瘤组织中EFEMP1表达;采用免疫印迹法(Western blot)及逆转录定量PCR(qRT-PCR)检测具有不同转移潜能的骨肉瘤细胞株(F4、F5M2)中EFEMP1的表达水平;Tanswell实验检测重组人EFEMP1对F5M2细胞侵袭和迁移的影响。 结果 免疫组化结果显示在45例骨肉瘤标本中,有42例EFEMP1阳性(93.3%),其中强阳性为29例(64.4%),3例(6.7%)为阴性。骨软骨瘤中EFEMP1表达均为阴性。qRT-PCR检测以及Western-blot结果显示,在mRNA和蛋白水平上,骨肉瘤细胞株F4和F5M2中均有EFEMP1的表达,F5M2细胞株EFEMP1的表达高于F4细胞株,Western-blot显示EFEMP1在F4和F5中均有表达,且在F5M2中EFEMP1表达水平高于F4(P＜0.05),这一结果与qRT-PCR检测结果一致。Tanswell实验结果显示,与阳性对照组和空白对照组相比,实验组F5M2细胞的侵袭和迁移能力显著增加,重组人全长蛋白EFEMP1可促进骨肉瘤细胞的侵袭和迁移能力。 结论 EFEMP1在人骨肉瘤组织中表达水平增高,骨肉瘤细胞株F4及F5M2中EFEMP1表达阳性,且高转移骨肉瘤细胞株F5M2中EFEMP1表达量较低转移细胞株F4表达水平明显增高,重组人EFEMP1能够促进骨肉瘤细胞侵袭及转移。EFEMP1可为骨肉瘤患者早期诊断和治疗提供一个新的策略。      

血红蛋白诱导的HO-1对离体星形胶质细胞损伤作用的研究

目的探讨血红蛋白(hemoglobin,Hb)诱导的血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)对离体星形胶质细胞的损伤作用。方法体外培养纯化获得星形胶质细胞,采用荧光标记胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillary acidic protein,GFAP)鉴定细胞;实验分为正常组、Hb组及HO-1活性抑制剂锌原卟啉(ZnPPIX)+Hb组。Hoechst 33342及CCK-8法检测细胞损伤情况;Western blot检测HO-1、p-JNK、JNK、Bcl-2及Bax等蛋白的表达情况;RT-PCR检测HO-1的mRNA表达情况。结果 GFAP鉴定显示97%以上的细胞为星形胶质细胞;HO-1检测结果显示:40μmol/L的Hb可显著诱导HO-1 mRNA及蛋白的表达(P<0.001);Hoechst33342及CCK-8检测结果显示:40μmol/L的Hb对离体星形胶质细胞具有损伤作用,而ZnPPIX可明显减轻上述损伤;Western blot检测结果显示:HO-1被诱导高表达时p-JNK及Bax蛋白的表达水平也显著升高而Bcl-2蛋白的表达水平显著下降(P<0.01),ZnPPIX...