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miR-300通过负向调控垂体肿瘤转化基因1抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭和转移
引用本文:梁 答,吴晓林,白 俊,张丽萍,尹崇高,钟 伟. miR-300通过负向调控垂体肿瘤转化基因1抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭和转移[J]. 南方医科大学学报, 2021, 41(2): 285-291. DOI: 10.12122/j.issn.1673-4254.2021.02.18
作者姓名:梁 答  吴晓林  白 俊  张丽萍  尹崇高  钟 伟
作者单位:潍坊医学院 附属医院关节外一科//矫形骨科,山东 潍坊 261053;潍坊医学院 基础医学院病理学教研室,山东 潍坊 261053;潍坊医学院 护理学院,山东 潍坊 261053
基金项目:山东省自然科学基金;潍坊市科技局医学类项目
摘    要:

关 键 词:骨肉瘤  miR-300  垂体肿瘤转化基因1  侵袭  转移  增殖

MiR-300 inhibits invasion and metastasis of osteosarcoma cell MG63 by negatively regulating PTTG1
,#x06881; ,#x07b54;,,#x05434; ,#x06653;,#x06797;,,#x0767d; ,#x04fca;,,#x05f20; ,#x04e3d;,#x0840d;,,#x05c39; ,#x05d07;,#x09ad8;,,#x0949f; ,#x04f1f;. MiR-300 inhibits invasion and metastasis of osteosarcoma cell MG63 by negatively regulating PTTG1[J]. Journal of Southern Medical University, 2021, 41(2): 285-291. DOI: 10.12122/j.issn.1673-4254.2021.02.18
Authors:    ,吴      ,白    ,张      ,尹      ,钟    
Abstract:目的研究miR-300及垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)对骨肉瘤侵袭转移的影响,探讨引起骨肉瘤侵袭转移的分子机制。方法Western blot检测人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中PTTG1的表达情况,并检测转染敲低PTTG1质粒后细胞的转染效率; Transwell侵袭实验和CCK8实验检测敲低PTTG1及过表达miR-300对骨肉瘤细胞MG63侵袭和增殖能力的影响; 网上预测并筛选与PTTG1互补结合的microRNAs(miRNAs); qRT-PCR检测人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中miR- 300的表达情况; Western blot检测转染过表达miR-300质粒后PTTG1在骨肉瘤细胞MG63的表达情况; 双荧光素酶实验检测miR-300和PTTG1的靶向结合情况; Transwell侵袭实验和CCK8实验检测过表达miR-300和过表达PTTG1质粒共转后对骨肉瘤细胞MG63侵袭和增殖能力的影响。结果PTTG1在骨肉瘤细胞MG63中表达较高(P=0.0002); 敲低PTTG1可抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭(P=0.0002)和增殖(P=0.0039)能力; 网上预测软件预测可能与PTTG1互补结合的miRNAs,NCBI数据库下载数据集分析确定研究对象为miR-300;qRT-PCR结果表明miR-300在骨肉瘤细胞MG63中表达降低(P=0.0004); 采用过表达质粒过表达骨肉瘤细胞MG63中的miR-300,qRT-PCR结果提示转染成功(P < 0.0001); Western blot发现过表达miR-300后PTTG1的表达明显降低(P=0.0007); 双荧光素酶实验结果显示miR-300可与PTTG1靶向结合(P=0.0010); 细胞共转实验显示过表达PTTG1可逆转miR-300对骨肉瘤细胞侵袭(P=0.0003)和增殖(P=0.0077)能力的影响。结论miR-300通过靶向结合PTTG1抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭转移能力。
Keywords:骨肉瘤   miR-300   垂体肿瘤转化基因1   侵袭   转移   增殖
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