消症方含药血清对子宫腺肌病异位内膜间质细胞VEGF-CmRNA及MMP-9mRNA表达的影响

目的探讨消症方含药血清对子宫腺肌病异位内膜间质细胞血管内皮因子-C(VEGF-C)mRNA、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA表达的影响。方法将雌性SD大鼠分为5组:消症方高、中、低剂量组,孕三烯酮组,生理盐水组,药物灌胃后采血制备含药血清,采用胶原酶消化法培养人离体子宫异位内膜间质细胞,将传至P4代细胞,制备成单细胞溶液接种于96孔培养板后,分别加入不同浓度消症方含药血清、孕三烯酮含药血清和生理盐水含药血清,以CCK-8法检测含药血清对其增殖的影响,PCR法检测其对VEGF-C mRNA和MMP-9 mRNA表达的影响。结果与生理盐水组相比,孕三烯酮组和不同剂量消症方对异位内膜间质细胞增殖的影响,有差异显著性(P0.05),其中消症方高剂量含药血清最具明显抑制作用。与生理盐水组相比,孕三烯酮对VEGF-C mRNA的表达,无显著性差异(P0.05),消症方对VEGF-C mRNA的表达,有显著差异(P0.05)。孕三烯酮和消症方对MMP-9 mRNA的表达均有不同程度的下降,有显著性差异(P0.05)。结论消症方可通过降低异位内膜间质细胞VEGF-C mRNA和MMP-9 mRNA的表达,最终抑制子宫异位内膜的种植、侵袭和转移。     

SDF-1、CXCR4、MMP-9及VEGF在子宫内膜异位症组织中的表达及意义

目的探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、趋化因子受体-4(CXCR4)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症患者子宫内膜组织中的表达情况及意义。方法取50例子宫肌瘤患者正常子宫内膜组织标本作为正常组,50例子宫内膜异位症患者在位内膜组织和异位内膜组织标本分别作为在位组和异位组。采用免疫组化法及PCR技术检测SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF在各组的表达情况。结果 SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF在子宫内膜异位症患者异位内膜组织、在位内膜组织及正常子宫内膜组织腺上皮细胞和间质细胞中均有表达,以腺上皮表达为著。异位组SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF平均光密度值和SDF-1 mRNA、CXCR4 mRNA、MMP-9 mRNA、VEGF mRNA表达量均明显高于在位组和正常组(P均0.05),而在位组高于正常组(P均0.05)。结论 SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF的高表达与子宫内膜异位症发病相关,推测SDF-1、CXCR4高表达可能直接或通过其他相关通路影响MMP-9及VEGF的表达而参与子宫内膜异位症的侵袭和血管形成过程,为子宫内膜异位症的发病机制及诊治提供了更深入的靶点。     

少腹逐瘀丸对子宫内膜异位症大鼠MMP-9和TIMP-1mRNA表达的影响

目的 探讨少腹逐瘀丸(当归、赤芍、川芎等)对患子宫内膜异位症大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响.方法 采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组、少腹逐瘀丸高剂量组、低剂量组,另设假手术组.给药30 d后,以RT-PCR法检测大鼠在位以及异位内膜组织中MMP-9和TIMP-1 mRNA表达.结果 少腹逐瘀丸能显著降低子宫内膜异位症大鼠MMP-9 mRNA的表达(P＜0.01),显著升高TIMP-1 mRNA的表达(P＜0.01).结论 少腹逐瘀丸可调节MMP-9/TIMP-1的平衡,这可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一.     

温经汤对子宫内膜异位症小鼠TLR4/NF-κB通路的影响研究

目的 观察温经汤对子宫内膜异位症小鼠Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路表达的影响，探讨温经汤抑制异位内膜生长的可能作用机制。方法 取54只雌性BALB/c小鼠，采用腹腔内注射子宫内膜碎片法建立子宫内膜异位症模型。将建模成功的50只小鼠随机分为5组，每组10只。温经汤低、中、高剂量组分别给予7.97 g/kg、15.93 g/kg、31.85 g/kg温经汤灌胃，西药组给予孕三烯酮0.5 mg/kg灌胃，模型组给予10 mL/kg生理盐水灌胃。另取5只健康雌性BALB/c小鼠作为空白组，给予10 mL/kg生理盐水灌胃。各组小鼠均连续灌胃21 d后处死，收集异位内膜病灶并称重，ELISA法检测血清和腹腔上清液中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)含量，RT-PCR法和Western blot法测定异位内膜病灶中TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB、转录激活蛋白1(AP-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的mRNA和蛋白表达情况。结果 与模型组比较...     

姜黄素对人类子宫内膜异位症异位内膜组织中基质细胞衍生因子-1及间质细胞增殖和侵袭的影响

目的观察姜黄素对人类子宫内膜异位症异位内膜组织中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)表达及间质细胞增殖和侵袭的影响。方法建立子宫内膜异位症异位内膜组织的间质细胞原代培养模型,随机分为对照组(0μmol/L)、姜黄素低剂量组(10μmol/L)、姜黄素中剂量组(30μmol/L)、姜黄素高剂量组(50μmol/L),分别连续给药24 h后PCR法检测异位内膜组织中SDF-1的mRNA表达情况,分别连续给药12 h、24 h、48 h后MTT法检测异位内膜组织细胞抑制率,分别连续给药48 h后Transwell小室观测异位内膜组织细胞侵袭能力。结果姜黄素各剂量组异位内膜间质细胞中SDF-1 mRNA表达量均显著下降(P均0.05),且随药物浓度的增加下降更明显。各浓度姜黄素对细胞作用24 h、48 h、72 h后细胞抑制率比较差异均有统计学意义(P均0.05),同时点姜黄素高、中、低剂量组细胞抑制率比较差异均有统计学意义(P均0.05),姜黄素对异位内膜间质细胞的生长增殖抑制呈明显的剂量和时间效应关系。作用48 h后,侵袭抑制率组间整体比较差异有统计学意义(P0.05),随着姜黄素浓度的升高,间质细胞的侵袭数量减少,浓度越高,侵袭率越低。结论姜黄素可以明显降低异位内膜组织中SDF-1表达,且随着姜黄素浓度的增加SDF-1表达呈阶梯型减少,SDF-1/CXCR4轴可能参与了子宫内膜异位症的发展过程;姜黄素对异位内膜细胞的增殖、侵袭有明显抑制作用,抑制作用呈阶梯型增强。姜黄素可能通过降低细胞SDF-1mRNA的表达,抑制上游核转录因子κB(NF-κB)活性而下调MMP的表达,进而抑制人子宫内膜异位症细胞的侵袭和转移。     

姜黄对大鼠子宫内膜异位症影响的实验研究

目的 通过中药姜黄对子宫内膜异位症的内膜组织血管内皮生长因子(VEGF)、金属蛋白酶(MMP)-9的表达,探讨其治疗机理.方法 采用SD雌性大鼠子宫内膜自体移植建立模型,成功建模3周后,随机分为模型组(B组,n=10);孕三烯酮组(C组,n=10);姜黄组D组,n=12)、以假手术为空白对照组(A组,n=8),各组分别给药3周后,检测异位子宫内膜组织VEGF、MMP-9的表达.结果 C、D两组均降低异位内膜组织VEGF、MMP-9的表达,与B组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),C、D组间P＞0.05,无明显差异.结论 姜黄可能是通过降低VEGF、MMP-9的表达,而抑制模型大鼠异位内膜的生长、致其萎缩,达到实现治疗的目的.     

活血化瘀消癥法对子宫内膜异位症的MMP-9/TIMP-3表达的影响

目的观察活血化瘀消癥法对子宫内膜异位症在位、异位内膜上MMP-9、TIMP-3表达的影响,探讨莪棱胶囊的作用机理。方法将90例子宫内膜异位症患者随机分为3组,即莪棱胶囊组(口服莪棱胶囊)、孕三烯酮组(口服孕三烯酮)及空白对照组(不服药),各30例,3月后行腹腔镜下卵巢巧克力囊肿剔除术。采用免疫组化法检测异位、在位内膜上MMP-9、TIMP-3的表达水平。结果与空白对照组比较,莪棱胶囊组异位、在位内膜上MMP-9下降,而TIMP-3升高(P0.05);与孕三烯酮组比较,TIMP-3的表达水平升高(P0.05),MMP-9差异无显著性(P0.05)。结论莪棱胶囊作用机理可能与调整MMP-9/TIMP-3表达、抑制内膜的侵袭性有关。     

二色补血草总黄酮对功能性子宫出血模型大鼠子宫内膜VEGF、MMP-9表达的影响

目的:观察二色补血草总黄酮对功能性子宫出血模型大鼠子宫内膜VEGF、MMP-9表达的影响。方法:大鼠去势并利用雌激素负荷法建立无排卵型功能失调性子宫出血(ADUB)子宫内膜增生症大鼠模型,给予二色补血草总黄酮后,观察大鼠子宫内膜血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平的变化。结果:造模后大鼠VEGF和MMP-9蛋白和m RNA表达水平均显著增加(P0.01,P0.05),导致子宫内膜异常增生。给药后,二色补血草总黄酮高剂量组可明显降低大鼠子宫内膜VEGF和MMP-9蛋白和m RNA表达水平(P0.05);二色补血草总黄酮中剂量组能明显降低大鼠子宫内膜VEGF和MMP-9 m RNA表达水平(P0.05)和VEGF蛋白水平(P0.05)。结论:二色补血草总黄酮治疗ADUB的机制可能是通过下调VEGF的转录和翻译水平,引起MMP-9表达水平下降,减轻子宫内膜血管脆性从而达到止血的目的。     

丹莪妇康煎膏对子宫内膜异位症大鼠基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA表达的影响

 目的 探讨子宫内膜异位症大鼠在位和异位子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）表达的差异以及丹莪妇康煎膏对其影响。方法 采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组、丹莪妇康煎膏高剂量组、低剂量组以及假手术组,共5组。给药30 d后,以反转录聚合酶链反应法检测大鼠在位以及异位内膜组织中基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA表达。结果 丹莪妇康煎膏能显著降低子宫内膜异位症大鼠基质金属蛋白酶-9 mRNA的表达（P＜0.01）,显著升高基质金属蛋白酶抑制剂-1 mRNA的表达（P＜0.01）。结论 丹莪妇康煎膏可调节基质金属蛋白酶-9/基质金属蛋白酶抑制剂-1的平衡,这可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一。     

复方莪术散对子宫内膜异位症大鼠异位内膜组织基质金属蛋白酶2和血管内皮生长因子表达的影响

目的研究复方莪术散治疗子宫内膜异位症(EM)的作用机制。方法 Wistar大鼠60只,采用自体移植法建立EM大鼠模型,将造模成功的40只大鼠随机分为复方莪术散低、中、高剂量组[分别以5.85g/(kg·d),11.7g/(kg·d),23.4g/(kg·d)],孕三烯酮组[0.05mg/(kg·d)],模型对照组(生理盐水1ml/100g),选取8只作为空白对照组(生理盐水1ml/100g),各组连续灌胃28d,每天1次。28d后测定大鼠在位以及异位子宫内膜组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。结果 EM大鼠异位子宫内膜组织中MMP-2和VEGF蛋白表达高于在位子宫内膜组织(P<0.05);复方莪术散在一定剂量关系上能显著抑制异位组织的生长,缩小异位病灶体积,抑制MMP-2和VEGF的表达,与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),与孕三烯酮组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方莪术散可抑制MMP-2和VEGF表达水平,降低异位病灶的侵袭和血管生成能力,这可能是其治疗EM的机制之一。     

KISS-I/MMP-9对子宫内膜异位症的表达及意义研究

目的:通过检测KISS-I及MMP-9在EMs患者增生期与分泌期子宫内膜中的表达及对比研究,探讨其临床意义及两者相关性。方法:通过免疫组化和图像分析法对KISS-I、MMP-9蛋白在EMs患者的ECE组(48例)、匹配的EUE组(30例)以及CE组(27例)中的表达进行定位和半定量分析。结果:①KISS-I、MMP-9在ECE组、EUE组以及CE组子宫内膜组织中表达清楚;②MMP-9表达顺序为:ECE组>EUE组>CE组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。三组表达强度在不同的月经周期中无统计学差异(P>0.05);KISS-I表达顺序为:CE组>EUE组>ECE组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:KISS-I及MMP-9在EUE、ECE以及CE均有表达,且表达存在差异性,可能共同参与EMs患者发病过程中子宫内膜异位侵袭、种植的过程。     

消瘤方对子宫内膜异位症患者子宫内膜细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨中药消瘤方对子宫内膜异位症(EMS)患者在位和异位内膜基质细胞增殖和凋亡的影响。方法采用改良筛网法原代分离、培养EMS患者在位、异位及正常人子宫内膜基质细胞;将分离出的子宫内膜细胞分为3组,分别为正常组、在位组和异位组,其中在位组和异位组再随机分为生理盐水组、孕三烯酮组(西药组)以及消瘤方提取物5 g/L组(中药低剂量组)及消瘤方提取物10 g/L组(中药高剂量组),各组分别加入相应药物干预后,对内膜细胞的增殖以及凋亡状况进行分析。结果在使用药物干预后,西药组以及中药高剂量组可以起到抑制在位以及异位子宫内膜细胞增殖的作用,并且可以促进细胞的凋亡,并且差异具有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论子宫内膜异位症的发生与EMS患者在位和异位内膜细胞的异常增殖和凋亡下降密切相关,消瘤方可通过抑制子宫内膜细胞的增殖和促进其凋亡的发生,从而阻止EMS的形成而起到治疗作用。     

桂枝茯苓丸治疗大鼠子宫内膜异位症的机制研究

目的:探讨桂枝茯苓丸对子宫内膜异位症(EMS)大鼠止疼痛的作用机制及对基质金属蛋白酶表达的影响。方法:复制大鼠模型,分为模型组,芬必得组(0.054 g·kg-1),丹那唑组(0.036 g·kg-1),桂枝茯苓丸低、高剂量组(含生药0.256,1.024 g·kg-1),连续ig给药4周,放免法测定大鼠血浆中6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α),β-内啡肽(β-EP),血栓素B2(TXB2),剥取大鼠异位内膜组织,测定体积,并检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在异位内膜的表达。结果:桂枝茯苓丸各组异位内膜体积明显减小(P<0.01);桂枝茯苓丸各剂量组均能升高大鼠血浆6-keto-PGF1 a,β-EP水平,降低TXB2水平(P<0.01);桂枝茯苓丸各剂量组MMP-2及MMP-9表达阳性强度均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:桂枝茯苓丸能抑制异位内膜的生长,其作用机制可能与抑制内膜组织中MMP-2及MMP-9表达有关;桂枝茯苓丸止痛机制可能是通过平衡前列腺素水平,缓解子宫平滑肌痉挛,升高内啡肽实现的。     

内异消癥汤含药血清对子宫内膜异位症在位和异位内膜间质细胞增殖及分泌Ang-2的影响

目的:观察内异消癥汤含药血清对子宫内膜异位症在位和异位内膜间质细胞增殖及分泌Ang-2的影响。方法:对在位和异位内膜间质细胞进行体外分离原代培养,免疫细胞化学法鉴定。制备大鼠含药血清,分为内异消癥汤组、米非司酮组、空白血清组,用MTT法检测含药血清对间质细胞的生长抑制率,并用Elisa法检测对间质细胞分泌的Ang-2水平。结果:体外原代细胞培养方法可培养出纯度较高的间质细胞,与空白血清组相比内异消癥汤含药血清可以抑制间质细胞的增殖(P0.01),同时可以显著减少Ang-2的分泌水平(P0.01)。结论:内异消癥汤含药血清可以抑制间质细胞的增殖,显著减少Ang-2的分泌水平。     

淫羊藿苷对IL-1β诱导的炎症性软骨细胞表型与代谢的影响

目的探讨淫羊藿苷(Icariin,ICA)对IL-1β诱导的炎症软骨细胞表型的影响。方法分离培养大鼠关节软骨细胞,利用白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导原代软骨细胞,模拟骨关节炎软骨细胞炎症内坏境。实验分为空白组、模型组(含IL-1β10 mg/L)、ICA低浓度组(含10 mg/L IL-1β和1μmol/L ICA)和ICA高浓度组(含10 mg/L IL-1β和5μmol/L ICA)。利用Western blot的方法检测II型胶原蛋白(collagen-II,Col-II)和蛋白聚糖(aggrecan)蛋白表达情况,利用RT-PCR法检测collagen-II、aggrecan、MMP-13、ADAMTS-5 m RNA表达情况。结果培养3天时,与模型组比较,ICA对炎症软骨细胞collagen-II m RNA和蛋白表达有明显的促进作用(P0.05),ICA高浓度组对collagen-II m RNA和蛋白表达的促进作用较低浓度组更强(P0.05);与模型组比较,ICA对炎症软骨细胞aggrecan m RNA和蛋白表达有明显的促进作用(P0.05),不同浓度的ICA促进作用差异不明显。与模型组比较,ICA可抑制MMP-13、ADAMTS-5 m RNA表达(P0.05),ICA高浓度组抑制MMP-13 m RNA表达作用更显著(P0.05),不同浓度ICA对ADAMTS-5 m RNA表达差异不明显。结论 ICA可以通过抑制MMP-13、ADAMTS-5的表达,促进炎症软骨细胞collagen-II和aggrecan的表达,从而维持软骨细胞表型和促进基质代谢。     

少腹逐瘀汤含药血清对子宫内膜异位症在位内膜分泌MMP-2和MMP-9的影响

目的:研究少腹逐瘀汤含药血清对子宫内膜异位症在位内膜分泌MMP-2和MMP-9的影响。方法:实验分为少腹逐瘀汤含药血清高剂量组、低剂量组及空白对照组。收集接收手术治疗的子宫内膜异位症病人的在位子宫内膜组织,经体外分离、培养,以实时荧光定量PCR分析不同浓度少腹逐瘀汤含药血清对在位内膜细胞表达MMP-2和MMP-9的影响。结果:少腹逐瘀汤含药血清能剂量依赖性抑制在位内膜细胞表达MMP-2和MMP-9。结论:少腹逐瘀汤含药血清可抑制体外培养的子宫内膜异位症在位内膜细胞MMP-2和MMP-9的分泌,提示少腹逐瘀汤对于治疗子宫内膜异位症可能具有一定的作用。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制因子在胚泡着床中的作用及中医药研究进展

基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制因子-1,3(TIMP-1,3)对细胞外基质(ECM)的降解是胚泡着床的关键步骤.MMP-9/TIMP-1,3在子宫内膜的高表达使子宫内膜容受性增加,同时参与胚胎滋养层侵袭,子宫内膜蜕膜化和胎盘形成过程,有利于胚胎着床和维持妊娠.近年来相关中医药研究提示中药可提高和改善子宫内膜的微环境,有利于胚胎着床.     

祛瘀解毒法对子宫内膜异位症患者术后治疗效果及组织MMP-9的影响

目的:观察祛瘀解毒法对子宫内膜异位症(EMs)患者术后治疗效果及对在位、异位内膜组织MMP-9表达水平的影响。方法:将60例EMs患者按随机数字表法分为3组,祛瘀解毒方组、丹那唑组及空白对照组各20例,均于第4个月经周期月经干净后的3～5 d行腹腔镜下卵巢子宫内膜异位囊肿剔除术和诊刮术(未婚者不行诊刮术);收集同期在本院因输卵管性不孕症而行诊刮术的育龄妇女15例作为正常对照组;比较各组治疗效果及MMP-9表达情况。结果:祛瘀解毒方组与丹那唑组总有效率均为95%,两组治愈加显效率分别为70%和65%,两组比较差异无统计学意义(χ2=0.570,P=0.273);空白对照组在位内膜上MMP-9表达阳性率及强阳性率分别为88.2%、23.5%,异位内膜上MMP-9表达阳性率及强阳性率分别为90.0%、35.0%,均明显高于正常子宫内膜阳性率及强阳性率(P<0.05);祛瘀解毒方组与丹那唑组与空白对照组相应的在位内膜或异位内膜比较,MMP-9的表达阳性率及强阳性率均显著降低(P<0.05)。结论:EMs的发生与MMP-9表达失调有关,祛瘀解毒方可抑制MMP-9表达,是治疗EMs的有效方药。     

基于PI3K/Akt/NF-κB途径探究补肾活血方治疗子宫内膜异位症的作用机制研究

目的 探究补肾活血方（BSHXR）治疗子宫内膜异位症（EMS）的作用机制。方法 采用自体子宫内膜移植术建立EMS大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、BSHXR高、中、低剂量组、LY294002（PI3K抑制剂）组,每组10只。给药28 d后,测定大鼠异位子宫内膜病灶体积,苏木精-伊红（HE）染色观察异位子宫内膜组织病理变化,酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）的水平,免疫组化染色检测异位子宫内膜组织血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）表达,实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测异位子宫内膜组织血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA水平,Western blot法检测异位内膜组织磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/核因子κB（NF-κB）通路蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,EMS大鼠异位子宫内膜病灶体积显著增加,血清炎症因子水平升高,CD31阳性细胞数量增加,VEGF、MMP-9 mRNA水平升高,PI3K/Akt/NF-κB信号通路被活化（P＜0.05）。与模型组比较,BSHXR可缩小大鼠异位子宫内膜病灶体积,降低血清炎症因子水平,减少CD31阳性细胞数量,降低VEGF、MMP-9 mRNA表达水平,抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路活化,其作用呈剂量依赖性（P＜0.05）。结论 BSHXR对大鼠EMS具有治疗作用,其作用机制与抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路活化有关。     

补肾活血方对子宫自然杀伤细胞与子宫间质细胞旁分泌基因表达谱的影响

目的观察补肾活血方对子宫自然杀伤(uterine natural kil er,u NK)细胞与子宫间质细胞旁分泌基因表达谱的影响。方法从育龄期妇女的增殖期子宫内膜提取人间质细胞,分为空白组、对照组和中药组。中药组加入DMEM/F12稀释至终浓度为2 mg/m L的补肾活血方药液,空白组和对照组加入等体积的DMEM/F12,对照组和中药组培养24 h后再加入20%无血清DMEM加80%u NK细胞分泌提取液,于37℃,5%CO2培养6 h,提取3组细胞RNA。运用基因芯片技术检测各组间质细胞的基因表达谱,同时应用q RT-PCR和ELISA法检测筛选基因粒细胞趋化蛋白1(CXCL1)]、细胞间黏附分子-(ICAM-1)、IL-8和白血病抑制因子(leukocyte inhibitor factor,LIF)m RNA和蛋白表达。结果与空白组比较,对照组和中药组上升4倍的差异基因表达谱基本一致,共63个基因。与对照组比较,中药组IL-15受体α(IL-15RA)上调1.27倍,血管内皮生长因子(VEGF)上调1.55倍,LIF上调1.45倍,IL-8上调1.10倍,IL-11上调1.23倍,转化生长因子-β(TGF-β)上调1.40倍,表皮生长因子(EGF)上调1.10倍,单核细胞趋化蛋白8(CCL8)上调1.13倍,运输蛋白1(TAP 1)上调1.02倍,细胞表面趋化因子受体2(CXCR2)上调1.22倍,ICAM-1上调1.15倍(P0.05)。结论 u NK细胞旁分泌作用对提高子宫内膜容受性和种植妊娠率发挥着重要的作用,补肾活血方可改善并提高此旁分泌系统的功能。