| 通用腺相关病毒载体构建及表达报告基因GFP的研究 |
| |
| 引用本文： | 杨宇,王全师,吴江,胡海涛,胡林森,杨广笑.通用腺相关病毒载体构建及表达报告基因GFP的研究[J].中风与神经疾病杂志,2004,21(1):10-12. |
| |
| 作者姓名： | 杨宇 王全师 吴江 胡海涛 胡林森 杨广笑 |
| |
| 作者单位： | 1. 吉林大学第一医院神经内科,吉林,长春,130021
2. 西安交通大学解剖教研室,陕西,西安,710000 |
| |
| 摘 要： | 目的 构建基因治疗通用型 AAV载体并检测它转导外源基因作用。方法 使用限制性内切酶切出p SSV9int-质粒中的 AAV病毒 Rep和 Cap基因元件后 ,插入了重组腺病毒专用穿梭质粒 -p ACCMVp L p A的含有CMV启动子、多克隆位点 (MCS)和多聚腺苷酸信号 (Poly A)的表达盒 ,构建了重组 AAV通用载体质粒 p SSHG-CMV。在该质粒 MCS插入 GFP基因后 ,我们使用 p SSHG-CMV-GFP、p GF14 0和 p AAV/Ad 3种质粒共转染 2 93包装细胞 ,制备 GFP重组 AAV,应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度度 ,并将该病毒感染新生大鼠星形胶质细胞 ,荧光显微镜观察 GFP表达。结果 重组 AAV的滴度在浓缩前可达 2× 10 11,浓缩后可达 2× 10 13 ,表明成功的构建了重组 AAV载体 ,插入外源基因 GFP后 ,在包装病毒和辅助质粒的联合作用下 ,能产生具有感染性的重组AAV。感染了重组 GFP-AAV的大鼠星形胶质细胞表达了明显的 GFP荧光。结论 本文构建的重组 AAV通用载体 p SSHG-CMV,可转导外源基因 ,用于基因治疗的研究
|
| 关 键 词： | 通用腺 相关病毒 载体构建 基因表达 报告基因 GFP |
| 文章编号： | 1003-2754(2004)01-0010-03 |
| 修稿时间： | 2003年8月12日 |
Construction of a General Adeno-associated Virus Vector and GFP Expressing in Rat Astrocytes Transduced by the rAAV Vector |
| |
| YANG Yu,WANG Quan-shi,WU Jiang,et al..Construction of a General Adeno-associated Virus Vector and GFP Expressing in Rat Astrocytes Transduced by the rAAV Vector[J].Journal of Apoplexy and Nervous Diseases,2004,21(1):10-12. |
| |
| Authors: | YANG Yu WANG Quan-shi WU Jiang |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | rAAV vector report gene gene therapy as trocyte |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
