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多肽301LARSLKT307抑制心肌分化的细胞实验研究
引用本文:许耿,朱金改,喻博识,韩树萍,顾海涛,余章斌.多肽301LARSLKT307抑制心肌分化的细胞实验研究[J].安徽医科大学学报,2021,56(2):238-243.
作者姓名:许耿  朱金改  喻博识  韩树萍  顾海涛  余章斌
作者单位:南京医科大学附属妇产医院(南京市妇幼保健院)儿科,南京 210004;南京医科大学第一附属医院(江苏省人民医院)小儿心胸外科,南京 210029;南京医科大学附属妇产医院(南京市妇幼保健院)儿科,南京 210004;南京医科大学附属妇产医院(南京市妇幼保健院)儿科,南京 210004;南京医科大学附属妇产医院(南京市妇幼保健院)儿科,南京 210004;南京医科大学第一附属医院(江苏省人民医院)小儿心胸外科,南京 210029;南京医科大学附属妇产医院(南京市妇幼保健院)儿科,南京 210004
基金项目:南京市卫生科技发展专项资金杰出青年项目;国家自然科学基金
摘    要:目的 前期发现多肽301LARSLKT307可在动物水平显著抑制胚胎期心脏发育.该研究拟进一步在P19细胞系水平探究301 LARSLKT307抑制心肌分化的作用和机制.方法 利用PepDraw Tool、Uniprot和ProtParam在线生物信息学分析网站,对多肽301 LARSLKT307的结构、保守性和理化性质进行生物信息学分析.在荧光显微镜下观察FITC标记的多肽301 LARSLKT307进入P19细胞的情况.通过倒置显微镜观察多肽301 LARSLKT307对P19细胞分化的影响.实时定量PCR及蛋白质免疫印迹法检测多肽对心肌分化标志基因肌钙蛋白cTnT和转录因子GATA4表达的影响.实时定量PCR检测多肽对Notch1信号通路关键分子Notch1和下游Hey1及Hey2的影响.结果 生物信息学分析结果 显示多肽位于其前体蛋白Talin的301~307氨基酸位点,其分子量小、结构稳定、亲脂性高,且前体蛋白保守性高.荧光显微镜下可见FITC标记的多肽301 LARSLKT307可以穿过细胞膜进入P19细胞内.与对照组比较,多肽组细胞部分坏死,生长形态紊乱,细胞厚薄不一.实时定量PCR与蛋白质免疫印迹法检测显示,与对照组比较,多肽组的分化相关基因GATA4及cTnT的mRNA及蛋白表达量均有不同程度下降.实时定量PCR检测显示,与对照组比较,多肽组Notch1通路的相关基因Notch1、Hey1及Hey2的mRNA表达均有不同程度下降.结论 多肽301LARSLKT307可能是通过抑制Notch1通路关键因子的表达发挥抑制心肌分化的生物功能.

关 键 词:法洛四联症  心肌分化  内源性多肽  Notch1信号通路  P19细胞系

Effect of peptide 301LARSLKT307 on myocardial differentiation
Xu Geng,Zhu Jingai,Yu Boshi.Effect of peptide 301LARSLKT307 on myocardial differentiation[J].Acta Universitis Medicinalis Anhui,2021,56(2):238-243.
Authors:Xu Geng  Zhu Jingai  Yu Boshi
Abstract:
Keywords:
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