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全人源抗MAGE-A1单链抗体的筛选及免疫活性鉴定
引用本文:丁贵鹏,朱进,朱毅,孙景军,张建平,冯振卿,管晓虹.全人源抗MAGE-A1单链抗体的筛选及免疫活性鉴定[J].南京医科大学学报,2005,25(7):484-488,F003.
作者姓名:丁贵鹏  朱进  朱毅  孙景军  张建平  冯振卿  管晓虹
作者单位:南京医科大学病理学系 江苏南京210029 (丁贵鹏,朱毅,孙景军,冯振卿),南京医科大学病理学系分子生物学研究所 江苏南京210029 (朱进),南京医科大学第二附属医院普外科 江苏南京210011 (张建平),南京医科大学病理学系分子生物学研究所 江苏南京210029(管晓虹)
基金项目:江苏省卫生厅科技资助项目(H200103)
摘    要:目的:从全人源单链噬菌体抗体库中筛选出抗MAGE鄄A1特异性单链抗体并进行免疫活性鉴定。方法:以纯化MAGE鄄A1为抗原,经过五轮吸附—洗脱—扩增,从单链噬菌体抗体库中筛选出特异性抗MAGE鄄A1噬菌体抗体,ELISA、DotBlotting检测其抗原结合能力,并对特异性较强的克隆提取质粒,表达可溶性抗体。WesternBlotting、DotBlotting、免疫细胞化学检测其抗原结合活性,非竞争ELISA法检测其亲和常数。结果:从单链噬菌体抗体库中筛选出噬菌体抗体并进行富集,经鉴定为抗MAGE鄄A1的特异性噬菌体抗体。抗MAGE鄄A1可溶性抗体分子量约为30kD,与MAGE鄄A1特异性结合,其亲和常数约为1.432×106L/mol。结论:所得全人源抗MAGE鄄A1单链抗体保留完整抗体分子结合抗原的特异性,免疫原性弱,是肿瘤导向治疗的理想载体。

关 键 词:MAGE-A1  肿瘤  单链抗体  全人源抗体  亲和常数
文章编号:1007-4368(2005)07-0484-05

Screening and identification of human ScFv antibody against MAGE-A1
DING Gui-peng,ZHU Jin,ZHU Yi,SUN Jing-jun,ZHANG Jian-ping,FENG Zhen-qing,GUAN Xiao-hong.Screening and identification of human ScFv antibody against MAGE-A1[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2005,25(7):484-488,F003.
Authors:DING Gui-peng  ZHU Jin  ZHU Yi  SUN Jing-jun  ZHANG Jian-ping  FENG Zhen-qing  GUAN Xiao-hong
Institution:DING Gui-peng,ZHU Jin1,ZHU Yi,SUN Jing-jun,ZHANG Jian-ping2,FENG Zhen-qing*,GUAN Xiao-hong1
Abstract:
Keywords:MAGE-A1  tumor  scFv  human antibody  affinity constant
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