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人源全分子抗c-Met 抗体的制备及对鼻咽癌细胞生物学特性的影响
引用本文:白璐月,刘金荣,唐 奇,熊四平,陈 雅,杜银娟,周 荧,朱 进,陈仁杰.人源全分子抗c-Met 抗体的制备及对鼻咽癌细胞生物学特性的影响[J].南京医科大学学报,2016(6):687-692.
作者姓名:白璐月  刘金荣  唐 奇  熊四平  陈 雅  杜银娟  周 荧  朱 进  陈仁杰
作者单位:南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科,江苏 南京 210011,南京医科大学附属南京妇幼保健院妇产科,江苏 南京 210004,南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室 江苏 南京 211166,南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室 江苏 南京 211166,南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室 江苏 南京 211166,南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科,江苏 南京 210011,南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科,江苏 南京 210011,南京军区军事医学研究所,江苏 南京 210002,南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科,江苏 南京 210011
基金项目:江苏省科技厅临床医学科技专项计划(BL2013038);国家自然科学基金(81502673)
摘    要:目的:利用基因工程技术制备全分子人源抗 c-Met抗体,分析该抗体免疫学特性,并观察该全分子抗体对鼻咽癌细胞增殖?迁移和侵袭的影响?方法:设计引物扩增抗c-Met Fab抗体的重轻链可变区序列,将其分别克隆到真核表达载体pFUSE-CHIg-hG1 和 pFUSE-CLIg-hκ 中?转染真核细胞,表达产物用Protein A柱纯化?通过ELISA?Western blot和免疫荧光等方法鉴定该抗体的免疫学特性?CCK-8检测抗体对人鼻咽癌细胞增殖的抑制作用,划痕实验?Transwell侵袭实验分析抗体对人鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响?结果:成功重组全分子人源抗c-Met 抗体的表达载体,获得的全分子抗体保留了与抗原的特异性结合活性?CCK-8实验中结果显示全分子抗体能抑制c-Met阳性鼻咽癌细胞CNE2和HONE1的增殖?细胞划痕和Transwell侵袭实验结果显示全分子抗体能抑制c-Met阳性细胞CNE2和HONE1的迁移和侵袭能力?结论:本研究成功制备人源全分子抗c-Met抗体,该抗体有明显的中和活性,为探索鼻咽癌分子靶向治疗奠定了基础?

关 键 词:鼻咽癌  c-Met  人源抗体
收稿时间:2015/11/3 0:00:00

Preparation of full molecule human anti-c-Met antibody and its effects on nasopharyngeal carcinoma cells
Bai Luyue,Liu Jinrong,Tang Qi,Xiong Siping,Chen Y,Du Yinjuan,Zhou Ying,Zhu Jin and Chen Renjie.Preparation of full molecule human anti-c-Met antibody and its effects on nasopharyngeal carcinoma cells[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2016(6):687-692.
Authors:Bai Luyue  Liu Jinrong  Tang Qi  Xiong Siping  Chen Y  Du Yinjuan  Zhou Ying  Zhu Jin and Chen Renjie
Institution:Dpartment of Otolaryngology, the Second Affiliated Hospital of NJMU, Nanjing 210011,Obstetrics and Gynecology Department, Nanjing Maternity and Child Care Hospital Affiliated to NJMU, Nanjing 210004,Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health, NJMU, Nanjing 211166,Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health, NJMU, Nanjing 211166,Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health, NJMU, Nanjing 211166,Dpartment of Otolaryngology, the Second Affiliated Hospital of NJMU, Nanjing 210011,Dpartment of Otolaryngology, the Second Affiliated Hospital of NJMU, Nanjing 210011,Medical Research Institute of Nanjing Military Region, Nanjing 210002, China and Dpartment of Otolaryngology, the Second Affiliated Hospital of NJMU, Nanjing 210011
Abstract:
Keywords:nasopharyngeal carcinoma  c-Met  full molecule human antibody
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