| 肿瘤相关抗原Trop-2胞外区片段蛋白的表达及其特性分析 |
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| 引用本文： | 林〓红,张慧林,梁 洁,朱〓进,唐〓奇,苏亦平,冯振卿,管晓红.肿瘤相关抗原Trop-2胞外区片段蛋白的表达及其特性分析[J].南京医科大学学报,2010(3):312-315. |
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| 作者姓名： | 林〓红 张慧林 梁 洁 朱〓进 唐〓奇 苏亦平 冯振卿 管晓红 |
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| 作者单位： | 南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室;南京医科大学附属南京市妇幼保健院;南京军区军事医学研究所; |
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| 基金项目： | 南京市医学科技发展项目(ZKX09015);;南京市科技发展项目(200901083) |
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| 摘 要： | 目的:从临床乳腺癌组织中扩增肿瘤相关抗原Trop-2胞外肽段基因,在大肠杆菌中表达重组蛋白,并对该蛋白的生物学特性进行鉴定。方法:RT-PCR扩增Trop-2胞外肽段基因并克隆于pMD18-T载体中进行测序分析,用NcoⅠ和EcoRⅠ将含Trop-2胞外区重组基因的质粒双酶切后,克隆到pBAD-gⅢ中。重组质粒经酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌TOP10,以L-阿拉伯糖诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经后His柱亲和层析纯化后,用Western blot、ELISA检测鉴定。结果:重组表达质粒经酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确。SDS-PAGE和Western blot显示,表达的重组蛋白分子质量约为38ku,此抗原能够与商业化抗体特异性结合。结论:成功制备Trop-2胞外区重组基因表达的蛋白,并证明原核表达的Trop-2胞外肽段保持了原有的抗原性。
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| 关 键 词： | Trop-2基因 胞外区 原核表达 |
Expression and characterization of Trop-2 extracellular domain protein of tumor relative antigen |
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| LIN Hong,ZHANG Hui-lin,LIANG Jie,ZHU Jin,TANG Qi,SU Yi-ping,FENG Zhen-qing and GUANG Xiao-hong.Expression and characterization of Trop-2 extracellular domain protein of tumor relative antigen[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2010(3):312-315. |
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| Authors: | LIN Hong ZHANG Hui-lin LIANG Jie ZHU Jin TANG Qi SU Yi-ping FENG Zhen-qing and GUANG Xiao-hong |
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| Institution: | Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health/a>;NJMU/a>;Nanjing 210029/a>;1Nanjing Maternal and Child Health Hospital Affiliated to NJMU/a>;2Huadong Medical Institute of Biotechniques/a>;Nanjing 210002/a>;China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trop-2 extracellular peptide prokaryotic expression |
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