ACK1在子痫前期孕妇胎盘中的表达及其对滋养细胞侵袭功能的调控

目的：研究活化的Cdc42结合激酶（activated Cdc42 associated kinase，ACK1）在正常足月孕妇胎盘与子痫前期（preeclampsia，PE）孕妇胎盘组织中的表达差异及其对滋养细胞功能的调控作用，探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法：收集2015年10月至2016年10月在重庆医科大学附属第一院产科行计划性剖宫产手术的23例正常足月孕妇胎盘和23例PE孕妇胎盘组织，使用免疫组化（immunohistochemistry，IHC）及蛋白免疫印迹法（Western blot，WB）检测胎盘组织中ACK1的表达及差异情况。滋养细胞株（HTR8/SVneo）分为3组：常氧对照组（N组）、缺氧/复氧组（H/R组）及ACK1 基因序列慢病毒敲降组（ACK1 shRNA组），使用Transwell实验分析检测各组细胞的侵袭情况，采用流式细胞仪检测各处理组细胞凋亡率。使用West－ern blot检测各组细胞中ACK1蛋白，金属蛋白质酶（matrix metalloproteinase，MMP）-9及其特异性抑制因子（the tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP）-2的蛋白表达差异。结果：与正常足月孕妇胎盘比较，ACK1在人类子痫前期胎盘中表达明显降低（t=3.890，P=0.018）。细胞学实验中，与N组比较，ACK1 shRNA组和H/R组ACK1蛋白表达明显降低（t=12.260，P=0.000；t=10.740，P=0.000），ACK1 shRNA组和H/R组MMP9蛋白表达均明显降低（t=8.071，P=0.000；t=7.745，P=0.001），TIMP1蛋白表达显著升高（t=10.690，P=0.000；t=14.330，P=0.000）。ACK1 shRNA组和H/R组细胞迁移至下室的细胞数明显减少（t=12.260，P=0.000；t=11.320，P=0.000），H/R组细胞凋亡率显著升高（t=2.260，P=0.000），但ACK1 shRNA组细凋亡率无明显改变（t=8.317，P=0.088）。结论：ACK1的表达下调可抑制滋养细胞的侵袭，可能在子痫前期发病机制中有重要的作用。

Expression of activated Cdc42-associated kinase in the placenta of pregnant women with preeclampsia and its regulatory effect on invasion of trophoblasts