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SIV p27单克隆抗体的制备和鉴定
引用本文:孙敏,涂新明,魏强,丛喆,蒋虹,佟巍,陈颂,赖春晖,于浩,秦川.SIV p27单克隆抗体的制备和鉴定[J].中国比较医学杂志,2006,16(1):29-33,F0003.
作者姓名:孙敏  涂新明  魏强  丛喆  蒋虹  佟巍  陈颂  赖春晖  于浩  秦川
作者单位:中国医学科学院,中国协和医科大学,实验动物研究所,北京,100021
基金项目:中国CIPRA NIH项目
摘    要:目的建立SIVp27杂交瘤细胞株,并对其分泌的SIVp27单克隆抗体进行初步鉴定。方法使用基因重组的SIVp27蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术使用半固体培养基法建立杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体。通过染色体核型对杂交瘤细胞株进行鉴定;采用Western blot、免疫荧光法、酶联免疫吸附法确定单克隆抗体的交叉反应性、相对亲和力、抗原识别表位、免疫球蛋白的类型和亚类。对单克隆抗体进行鉴定。结果获得4株可稳定分泌SIVp27单克隆抗体的杂交瘤细胞,IC3、286为IgG1类,2E12为IgG2b类,3G3为IgG2a类。4株单抗均能识别SIV的p27蛋白,与逆转录病毒SRV、STLV无交叉反应,286、2E12与H1Vp24有交叉反应。免疫荧光法检测腹水效价为1:10240~1:40960。1C3、286、2E12、3G3染色体平均数分别为103、97、96、101。2E12与3G3识别不同的抗原表位。结论成功地制备出4株SIVp27单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立免疫分析方法,进行SIV/SAIDS及其艾滋病相关研究,奠定了基础。

关 键 词:蛋白质p27  杂交瘤  单克隆抗体
文章编号:1671-7856(2006)01-0029-05
收稿时间:2005-08-29
修稿时间:2005年8月29日

Preparation and Characterization of the Monoclonal Antibody Against SIV p27 Antigen
SUN Min,TU Xin-ming,WEI Qiang,CONG Zhe,JIANG Hong,TONG Wei,CHEN Song,LAI Chun-hui,YU Hao,QIN Chuan.Preparation and Characterization of the Monoclonal Antibody Against SIV p27 Antigen[J].Chinese Journal of Comparative Medicine,2006,16(1):29-33,F0003.
Authors:SUN Min  TU Xin-ming  WEI Qiang  CONG Zhe  JIANG Hong  TONG Wei  CHEN Song  LAI Chun-hui  YU Hao  QIN Chuan
Abstract:
Keywords:SIV
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