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| 8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞p16基因启动子DNA结合蛋白及其mRNA表达的影响 | |
| 引用本文： | 张莹,苏安英,吴景兰,丁一,王一菱,宫璀璀.8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞p16基因启动子DNA结合蛋白及其mRNA表达的影响[J].郑州大学学报(医学版),2003,38(5):691-693. |
| 作者姓名： | 张莹 苏安英 吴景兰 丁一 王一菱 宫璀璀 |
| 作者单位： | 1. 郑州大学分子细胞生物学研究中心,郑州,450052 2. 河北工程学院医学部,邯郸,056029 3. 解放军第153医院检验中心,郑州,450042 |
| 基金项目： | 河南省自然科学基金资助项目 984021800;河南省教育科研基金资助项目 200018007 |
| 摘 要： | 目的应用Southwestern技术研究8-Br-cAMP和槲皮素(quercetin)对Eca-109细胞DNA结合蛋白与p16基因启动子区的结合调控mRNA表达的影响.方法将贴壁培养的Eca-109细胞随机分成3组,Br组加8-Br-cAMP至终浓度为2×105 mol/L;Q组加槲皮素至终浓度为43 μmol/L;C组不加任何药物,只加入新培养液培养.同时培养48 h,应用质粒提取及限制性酶切回收目的DNA片段,采用生物素随机引物标记探针;应用DNA斑点印迹技术检测探针的灵敏度后以Southwestern印迹技术检测与p16基因启动子区特异性结合的DNA 结合蛋白(DBP);以原位杂交检测p16基因mRNA的表达情况.结果实验组条带强于对照组,Br组强于Q组;核基质DNA结合蛋白主带位于Mr66 000、58 000和20 000;核外DNA结合蛋白主带位于Mr40 000、28 000和20 000;2者中20 000是共同成分.原位杂交技术显示p16基因mRNA蓝紫色信号颗粒位于胞质,杂交信号以实验组较强.结论8-Br-cAMP和quercetin尤其是前者作用于人食管癌Eca-109细胞,诱导产生与p16基因启动子结合较强的DBP,启动p16基因表达. |
| 关 键 词： | Eca-109细胞 8-Br-cAMP 槲皮素 DNA结合蛋白 核基质蛋白 p16基因启动子 Southwestern印迹 食管癌 |
| 修稿时间： | 2003年2月20日 |
Mechanism for regulating p16 gene promoter and its mRNA expression with Southwestern blot in Eca-109 cell |
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| ZHANG Ying ,SU Anying ,WU Jinglan ,DING Yi ,WANG Yiling ,GONG Cuicui Molecular Cell Biology Research Center,Zhengzhou University,Zhengzhou Medical Center,Hebei Engineering College,Handan Laboratory Medicine Center,the PLA No. Hospital,Zhengzhou.Mechanism for regulating p16 gene promoter and its mRNA expression with Southwestern blot in Eca-109 cell[J].Journal of Zhengzhou University: Med Sci,2003,38(5):691-693. | |
| Authors: | ZHANG Ying SU Anying WU Jinglan DING Yi WANG Yiling GONG Cuicui Molecular Cell Biology Research Center Zhengzhou University Zhengzhou Medical Center Hebei Engineering College Handan Laboratory Medicine Center the PLA No Hospital Zhengzhou |
| Institution: | ZHANG Ying 1),SU Anying 2),WU Jinglan 1),DING Yi 1),WANG Yiling 1),GONG Cuicui 3) 1)Molecular Cell Biology Research Center,Zhengzhou University,Zhengzhou 450052 2)Medical Center,Hebei Engineering College,Handan 056029 3)Laboratory Medicine Center,the PLA No. 153 Hospital,Zhengzhou 450042 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Eca 109 cell line 8 Br cAMP quercetin DNA binding protein nuclear matrix protein p16 gene promoter Southwestern blot |
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